| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-16页 |
| ·免疫佐剂的研究进展 | 第9-13页 |
| ·免疫佐剂概述 | 第9页 |
| ·免疫佐剂作用机制与免疫佐剂的种类 | 第9页 |
| ·常见免疫佐剂与新型佐剂的研究进展 | 第9-13页 |
| ·Gp96 蛋白的研究进展 | 第13-15页 |
| ·Gp96 蛋白的概述 | 第13页 |
| ·Gp96 蛋白的结构特性 | 第13-14页 |
| ·Gp96 蛋白在免疫佐剂方面的研究 | 第14-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 热激蛋白Gp96N基因与猪瘟病毒E2 基因的克隆与串联片段的重组甲病毒载体的表达及体外特性研究 | 第16-40页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·载体、细胞与毒株 | 第16-17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-30页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·E2 基因与佐剂分子Gp96N端基因及GE基因的T载体的构建 | 第18-24页 |
| ·甲病毒复制子真核表达载体的构建 | 第24-27页 |
| ·pSCA质粒体外表达特性的研究 | 第27-28页 |
| ·pSCA-E2、pSCA-GE重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第28-30页 |
| ·实验结果分析 | 第30-37页 |
| ·猪瘟E2 蛋白基因与GP96 蛋白基因的扩增及串联 | 第30-32页 |
| ·甲病毒复制子真核表达载体的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| ·pSCA-EGFP质粒的构建与鉴定 | 第33-36页 |
| ·pSCA-GE、pSCA-E2 质粒的构建与鉴定。 | 第36-37页 |
| ·pSCA-GE、pSCA-E2 质粒表达性能的研究 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·关于甲病毒载体的改造 | 第38页 |
| ·关于重组甲病毒复制子的表达 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 猪热激蛋白GP96N端基因与猪瘟病毒E2 基因串联片段的原核表达 | 第40-56页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·载体与细胞 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·培养基与溶液的配置 | 第41-42页 |
| ·western-blotting使用主要溶液 | 第42页 |
| ·实验仪器及设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-48页 |
| ·猪瘟病毒E2 基因与佐剂分子GP96N端基因以及GE融合基因的T载体的构建 | 第42-43页 |
| ·猪瘟病毒E2 基因、GE融合基因重组原核表达质粒（pET-E2、pET-GE）的构建 | 第43-46页 |
| ·E2 蛋白、GE重组蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·E2 蛋白、GE重组蛋白的纯化与复性 | 第47-48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-54页 |
| ·E2 蛋白基因、GE蛋白基因片段的获取 | 第48-49页 |
| ·重组原核表达质粒pET-E2、pET-GE的鉴定 | 第49页 |
| ·重组菌表达形式的鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组菌表达产物的优化 | 第50-52页 |
| ·E2 蛋白、GE重组蛋白的纯化与复性 | 第52-53页 |
| ·western blotting | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·关于原核表达体系的选择 | 第54页 |
| ·关于目的蛋白表达条件的优化 | 第54页 |
| ·关于目的蛋白的表达及纯化与复性 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 原核表达重组串联蛋白的免疫原性研究 | 第56-60页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·病毒和实验动物 | 第56页 |
| ·主要试剂和抗体 | 第56页 |
| ·实验用溶液及其配置 | 第56-57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·动物免疫 | 第57页 |
| ·血清抗体动态监测 | 第57-58页 |
| ·实验结果 | 第58-59页 |
| ·小鼠血清抗体的测定 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 1 pET-32a-c(+)载体 | 第66-67页 |
| 附录 2 pSFV1 甲病毒载体 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
