摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
缩略词表 | 第8-10页 |
插图及附表清单 | 第10-12页 |
第一章 引言 | 第12-19页 |
·鸡传染性贫血研究进展 | 第12-16页 |
·历史 | 第12页 |
·病原学 | 第12-13页 |
·流行病学 | 第13-14页 |
·诊断技术 | 第14-15页 |
·预防 | 第15-16页 |
·昆虫杆状病毒表达系统概述 | 第16-18页 |
·历史 | 第16-17页 |
·特点 | 第17页 |
·应用情况 | 第17页 |
·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 | 第17-18页 |
·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 鸡传染性贫血病毒VP1 和VP2 基因的杆状病毒表达 | 第19-42页 |
·试验材料 | 第19-20页 |
·标准毒株、血清 | 第19页 |
·载体、菌株和细胞 | 第19页 |
·培养基、胎牛血清 | 第19页 |
·Western blot及IFA所用抗体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·所用溶液及配制方法(见附录 1) | 第20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-31页 |
·病毒DNA的提取 | 第20-21页 |
·CIAV VP1、VP2 基因的扩增 | 第21-22页 |
·IRES序列的扩增 | 第22-23页 |
·PCR回收产物的连接 | 第23页 |
·转化 | 第23页 |
·PCR鉴定 | 第23-24页 |
·质粒提取 | 第24页 |
·重组转移载体pFastBacHTA-VP1、pFastBacHTA-VP2 的构建 | 第24-25页 |
·重组转移载体pFastBacHTA-VP1-IRES-VP2 的构建 | 第25-26页 |
·重组转移载体pFast BacDual-VP1-VP2 的构建 | 第26-27页 |
·重组表达载体Bacmid的构建 | 第27-28页 |
·重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第28-30页 |
·目的蛋白的表达与检测 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-39页 |
·CIAV VP1、VP2 基因的克隆 | 第31-32页 |
·IRES序列的克隆 | 第32页 |
·重组转移载体的鉴定 | 第32-35页 |
·重组转移载体的测序 | 第35页 |
·重组表达载体的鉴定 | 第35-37页 |
·重组杆状病毒滴度的测定 | 第37-38页 |
·表达产物的检测与鉴定 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
·CIAV VP1、VP2 基因的克隆表达 | 第39-40页 |
·重组转移载体的构建 | 第40页 |
·重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第三章 重组蛋白的表达条件优化及免疫原性研究 | 第42-52页 |
·试验材料 | 第42页 |
·主要试剂和材料 | 第42页 |
·试验动物 | 第42页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-44页 |
·表达条件的优化 | 第42-43页 |
·目的蛋白的获取 | 第43页 |
·疫苗制备 | 第43页 |
·动物免疫试验 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-50页 |
·表达条件的优化 | 第44-49页 |
·油乳剂疫苗的制备 | 第49页 |
·免疫试验结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
·表达条件的优化 | 第50页 |
·免疫试验 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第四章 结论 | 第52-53页 |
第五章 对本研究的下一步设想 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附录 | 第59-68页 |
作者简历 | 第68页 |