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鸡传染性贫血病毒VP1和VP2基因的表达和免疫原性研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
缩略词表第8-10页
插图及附表清单第10-12页
第一章 引言第12-19页
   ·鸡传染性贫血研究进展第12-16页
     ·历史第12页
     ·病原学第12-13页
     ·流行病学第13-14页
     ·诊断技术第14-15页
     ·预防第15-16页
   ·昆虫杆状病毒表达系统概述第16-18页
     ·历史第16-17页
     ·特点第17页
     ·应用情况第17页
     ·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统第17-18页
   ·本研究的目的与意义第18-19页
第二章 鸡传染性贫血病毒VP1 和VP2 基因的杆状病毒表达第19-42页
   ·试验材料第19-20页
     ·标准毒株、血清第19页
     ·载体、菌株和细胞第19页
     ·培养基、胎牛血清第19页
     ·Western blot及IFA所用抗体第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·所用溶液及配制方法(见附录 1)第20页
     ·主要仪器设备第20页
   ·试验方法第20-31页
     ·病毒DNA的提取第20-21页
     ·CIAV VP1、VP2 基因的扩增第21-22页
     ·IRES序列的扩增第22-23页
     ·PCR回收产物的连接第23页
     ·转化第23页
     ·PCR鉴定第23-24页
     ·质粒提取第24页
     ·重组转移载体pFastBacHTA-VP1、pFastBacHTA-VP2 的构建第24-25页
     ·重组转移载体pFastBacHTA-VP1-IRES-VP2 的构建第25-26页
     ·重组转移载体pFast BacDual-VP1-VP2 的构建第26-27页
     ·重组表达载体Bacmid的构建第27-28页
     ·重组杆状病毒的获得与鉴定第28-30页
     ·目的蛋白的表达与检测第30-31页
   ·结果第31-39页
     ·CIAV VP1、VP2 基因的克隆第31-32页
     ·IRES序列的克隆第32页
     ·重组转移载体的鉴定第32-35页
     ·重组转移载体的测序第35页
     ·重组表达载体的鉴定第35-37页
     ·重组杆状病毒滴度的测定第37-38页
     ·表达产物的检测与鉴定第38-39页
   ·讨论第39-41页
     ·CIAV VP1、VP2 基因的克隆表达第39-40页
     ·重组转移载体的构建第40页
     ·重组蛋白的表达第40-41页
   ·小结第41-42页
第三章 重组蛋白的表达条件优化及免疫原性研究第42-52页
   ·试验材料第42页
     ·主要试剂和材料第42页
     ·试验动物第42页
     ·主要仪器第42页
   ·试验方法第42-44页
     ·表达条件的优化第42-43页
     ·目的蛋白的获取第43页
     ·疫苗制备第43页
     ·动物免疫试验第43-44页
   ·结果第44-50页
     ·表达条件的优化第44-49页
     ·油乳剂疫苗的制备第49页
     ·免疫试验结果第49-50页
   ·讨论第50-51页
     ·表达条件的优化第50页
     ·免疫试验第50-51页
   ·小结第51-52页
第四章 结论第52-53页
第五章 对本研究的下一步设想第53-54页
参考文献第54-58页
致谢第58-59页
附录第59-68页
作者简历第68页

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