摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-22页 |
·传染性法氏囊病概况 | 第10页 |
·IBDV的基本特性 | 第10-12页 |
·病毒的分类和形态 | 第10-11页 |
·血清型 | 第11页 |
·理化特性 | 第11页 |
·生物学特性 | 第11-12页 |
·抵抗力 | 第12页 |
·IBDV基因组结构 | 第12-13页 |
·IBDV的编码蛋白及其功能 | 第13-15页 |
·VP1 蛋白 | 第13页 |
·VP2 蛋白 | 第13-14页 |
·VP3 蛋白 | 第14页 |
·VP4 蛋白 | 第14页 |
·VP5 蛋白 | 第14-15页 |
·IBDV的培养特性 | 第15-16页 |
·病毒在鸡胚上培养 | 第15页 |
·病毒在细胞上培养 | 第15-16页 |
·IBDV感染性克隆技术研究进展 | 第16-17页 |
·流行病学 | 第17-19页 |
·分布区域 | 第17页 |
·宿主 | 第17-18页 |
·传播媒介 | 第18页 |
·潜伏期和临床症状 | 第18-19页 |
·发病率和死亡率 | 第19页 |
·IBD的诊断方法 | 第19-20页 |
·病毒的分离 | 第19页 |
·血清学和免疫学诊断方法 | 第19-20页 |
·分子生物学诊断技术 | 第20页 |
·IBD的防治 | 第20-21页 |
·目的和意义 | 第21-22页 |
第二章vvIBDV毒力分子机制及进化研究 | 第22-36页 |
·前言 | 第22页 |
·材料和方法 | 第22-27页 |
·毒株、SPF鸡 | 第22页 |
·菌株、载体和主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·致病性试验 | 第23页 |
·VP2 序列测定 | 第23-26页 |
·VP2 同源性分析和进化树构建 | 第26-27页 |
·结果 | 第27-33页 |
·致病性试验 | 第27页 |
·VP2 扩增结果 | 第27-28页 |
·VP2 高变区的分子特征 | 第28页 |
·VP2 基因同源性比对与进化树分析 | 第28-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
·vvIBDV的毒力位点 | 第33-34页 |
·VP2 氨基酸水平同源性和进化树分析 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第三章IBDV B87 不同鸡胚代次毒株毒力和细胞嗜性差异的分子机制研究 | 第36-44页 |
·前言 | 第36页 |
·材料和方法 | 第36-37页 |
·毒株、SPF鸡和鸡胚 | 第36页 |
·菌株、载体和主要试剂 | 第36页 |
·E2, E6 VP2 序列测定 | 第36页 |
·E2, E6 在CEF上的增殖 | 第36-37页 |
·E2, E6 对SPF鸡的安全性比较 | 第37页 |
·结果 | 第37-41页 |
·E2, E6 VP2 序列比较 | 第37-38页 |
·E2, E6 在CEF上的增殖情况 | 第38页 |
·E2, E6 对SPF鸡的安全性比较 | 第38-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
·毒力差异的分子机制 | 第41-42页 |
·细胞嗜性差异的分子机制 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第四章IBDV B87 株感染性克隆的初步建立 | 第44-61页 |
·引言 | 第44页 |
·材料和方法 | 第44-53页 |
·鸡胚、毒株、菌株和载体 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·仪器设备 | 第45页 |
·病毒的增殖和浓缩 | 第45页 |
·c DNA全长的获得 | 第45-46页 |
·c DNA与T载体连接并鉴定 | 第46-47页 |
·引入核酶序列和酶切位点 | 第47-49页 |
·连接真核表达载体pCAGGS | 第49-51页 |
·病毒拯救 | 第51-53页 |
·结果 | 第53-57页 |
·A, B片段RT-PCR的结果 | 第53页 |
·pClone EZ-TOPO-A,B重组质粒的鉴定 | 第53-54页 |
·多重PCR法引入核酶和酶切位点 | 第54页 |
·真核表达载体的酶切鉴定结果 | 第54-55页 |
·构建的真核表达载体测序结果 | 第55-56页 |
·间接免疫荧光检测结果 | 第56页 |
·观察细胞病变 | 第56页 |
·RT-PCR检测结果 | 第56-57页 |
·病毒拯救结果 | 第57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·影响病毒拯救效率的因素 | 第57-58页 |
·判断病毒拯救成功与否的指标 | 第58-59页 |
·本试验构建方法的优点和缺点 | 第59页 |
·未成功拯救出病毒的原因分析和下一步探索 | 第59-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录Ⅰ | 第70-74页 |
附录Ⅱ | 第74-75页 |
个人简历 | 第75页 |