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产紫杉醇内生真菌的诱变选育及其遗传差异分析

中文摘要第1-3页
Abstract第3-7页
第1章 前言第7-24页
   ·紫杉醇简介第7-15页
     ·抗肿瘤药物紫杉醇的化学结构及化学性质第7-8页
     ·紫杉醇的抗癌作用机理第8-9页
     ·紫杉醇研究的现状及紧迫性第9页
     ·紫杉醇抗肿瘤作用机理的研究第9-10页
     ·紫杉醇的生物合成途径第10-12页
     ·提高生物合成紫杉醇产量的方法第12-13页
     ·紫杉醇的常用提取分离方法第13-15页
   ·微生物发酵法生产紫杉醇第15-17页
     ·紫杉醇产生菌的生物多样性第15-16页
     ·微生物发酵法生产紫杉醇的优点第16-17页
   ·高产菌株的诱变选育第17-19页
     ·诱变选育高产菌株的原理第17页
     ·诱变选育高产菌株的各种方法及优点第17-19页
     ·微生物诱变育种的研究进展第19页
   ·mRNA差异显示技术第19-22页
     ·mRNA差异显示技术第19-20页
     ·mRNA差异显示技术的操作流程第20页
     ·mRNA差异显示技术的优缺点第20-21页
     ·差异显示技术的研究进展第21-22页
   ·本课题研究的目的意义及主要内容第22-24页
第2章 材料与方法第24-41页
   ·试验材料第24-30页
     ·菌种第24页
     ·培养基第24-25页
     ·主要药品和试剂第25-28页
     ·主要设备和仪器第28-29页
     ·引物第29-30页
   ·试验方法第30-41页
     ·菌种活化第30页
     ·孢子培养第30页
     ·孢子悬液的制备第30-31页
     ·制霉菌素培养基最小抑制浓度的确定第31页
     ·诱变处理第31-32页
     ·高产菌株的筛选第32页
     ·发酵液中紫杉醇的提取第32-33页
     ·发酵液中紫杉醇定性和定量的鉴定——薄层层析法和高效液相色谱法第33-35页
     ·HD86-9紫杉醇合成时期差异基因表达的分析第35-41页
第3章 结果与分析第41-56页
   ·紫杉醇产生菌出发菌株产量的研究结果第41-42页
     ·薄层层析结果第41-42页
   ·紫杉醇产生菌出发菌株的诱变选育结果第42-50页
     ·紫杉醇产生菌出发菌株的紫外诱变的研究结果第43-46页
     ·紫杉醇产生菌出发菌株的Licl+红外线复合诱变结果第46-50页
     ·高效液相色谱(HPLC)定量测定紫杉醇含量结果第50页
   ·紫杉醇高产菌株细胞总RNA提取结果第50-51页
     ·紫杉醇高产菌株细胞总RNA提取结果第51页
   ·差异显示技术获得、检测并回收差异片段的结果第51页
     ·mRNA差异显示结果第51页
   ·测序结果及进行同源序列、相似序列检索结果第51-56页
     ·DNA序列的测序结果第51-53页
     ·差异片段的同源性、相似序列的对比结果第53-56页
第4章 讨论第56-59页
   ·人为操作的影响第56页
   ·紫外诱变的选择与机理第56页
   ·诱变前后菌落形态的差别第56-57页
   ·诱变率的影响第57页
   ·薄层层析的影响第57页
   ·mRNA差异显示技术第57-58页
   ·后续工作第58-59页
第5章 结论第59-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间参与研究的课题第68-69页

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