| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一部分 引言 | 第8-20页 |
| 一、p53 研究进展 | 第8-16页 |
| （一） p53 基因的结构及功能 | 第8-9页 |
| （二） p53 基因突变的检测方法 | 第9页 |
| （三） p53 蛋白的结构与功能 | 第9-10页 |
| （四） p53 抗体 | 第10-16页 |
| 二、噬菌体展示技术 | 第16-20页 |
| （一） 丝状噬菌体的结构和生物学特性 | 第16页 |
| （二） PⅢ展示系统 | 第16页 |
| （三） PⅧ展示系统 | 第16-17页 |
| （四） 噬菌体展示的载体 | 第17页 |
| （五） 噬菌体展示技术的应用 | 第17-18页 |
| （六） 噬菌体抗体库技术的特点 | 第18-20页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第20-28页 |
| 一、实验材料 | 第20-21页 |
| （一） 质粒、细菌菌株 | 第20页 |
| （二） 主要试剂 | 第20-21页 |
| 二、试验方法 | 第21-28页 |
| （一） 人野生型重组p53 蛋白的制备 | 第21-22页 |
| （二） 人重组p53 蛋白抗原性鉴定 | 第22-23页 |
| （三） 杂合噬菌体的制备及免疫原性鉴定 | 第23-24页 |
| （四） 血清p53 抗体的 ELISA 检测 | 第24-28页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第28-39页 |
| 一、重组人p53 表达、纯化与抗原性鉴定 | 第28-31页 |
| （一） 重组人p53 蛋白的诱导表达 | 第28-29页 |
| （二） 重组人p53 蛋白的镍柱纯化及浓缩 | 第29页 |
| （三） 重组人p53 蛋白浓度的测定 | 第29-30页 |
| （四） 重组人p53 蛋白抗原性鉴定 | 第30-31页 |
| 二、杂合噬菌体的制备及抗原性鉴定 | 第31-32页 |
| （一） 噬菌粒pfd88-D07 的验证 | 第31页 |
| （二） 杂合噬菌体的制备与 SDS-PAGE 分析 | 第31-32页 |
| （三） 杂合噬菌体蛋白 Western blot 分析 | 第32页 |
| 三、血清p53 抗体的 ELISA 检测 | 第32-39页 |
| （一） 间接 ELISA 检测p53 抗体体系的建立 | 第32-35页 |
| （二） cut-off 值的确立 | 第35-36页 |
| （三） 肿瘤患者血清p53 抗体的检测 | 第36-39页 |
| 第四部分 讨论 | 第39-42页 |
| 一、检测p53 抗体的 ELISA 体系建立 | 第39-40页 |
| 二、肿瘤患者血清p53 抗体的检测 | 第40-41页 |
| 三、体检人群血清p53 抗体检测 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 在研期间公开发表论文情况 | 第50页 |
| 在研期间参加项目情况 | 第50页 |
