摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-25页 |
·研究问题的由来 | 第12-13页 |
·猪骨骼肌的发生发育过程 | 第13页 |
·骨骼肌发育的分子机理 | 第13-16页 |
·与肌肉发育相关的生肌调节因子 | 第13页 |
·与肌肉发育相关的信号通路 | 第13-14页 |
·miRNA对骨骼肌发育的重要调控作用 | 第14-15页 |
·印记基因对骨骼肌发育的相关研究 | 第15-16页 |
·H19/IGF2印记基因簇对骨骼肌发育有重要的调控作用 | 第16-17页 |
·H19、IGF2的研究进展 | 第17-23页 |
·印记基因的表达模式 | 第17-20页 |
·甲基化对H19、IGF2的重要调控作用 | 第20页 |
·转录因子对H19的调控作用 | 第20-21页 |
·miRNA对H19调控研究 | 第21-23页 |
·H19-IGF2印记基因簇内其他基因的研究进展 | 第23页 |
·本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-40页 |
·材料 | 第25-28页 |
·小鼠、猪组织样 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25-26页 |
·细胞 | 第26页 |
·试剂 | 第26-27页 |
·主要试剂的配制 | 第27页 |
·主要分子生物学软件及数据库 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-39页 |
·细胞的培养 | 第28-29页 |
·miRNAs及基因表达量分析 | 第29-32页 |
·启动子载体的构建 | 第32-35页 |
·细胞的转染 | 第35页 |
·细胞的处理与收集 | 第35-36页 |
·双荧光素酶检测及数据分析 | 第36页 |
·甲基化检测及数据分析 | 第36-39页 |
·本研究的技术路线 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-54页 |
·H19、IGF2以及let7家族在大白、梅山猪三个时期中的组织表达规律检测 | 第40-43页 |
·let7家族与H19以及pH值的相关性研究结果 | 第43-44页 |
·在小鼠中H19、miR-675-3p组织表达谱 | 第44-45页 |
·H19-IGF2印记基因簇相关基因在C2C12细胞分化过程中的表达情况 | 第45页 |
·H19启动子转录活性检测 | 第45-47页 |
·H19转录因子结合位点在线软件预测 | 第45-46页 |
·H19启动子载体构建及双荧光活性检测 | 第46-47页 |
·H19基因DMR区甲基化水平分析 | 第47-54页 |
·H19基因CpG岛的在线预测 | 第47-48页 |
·H19基因上游CTCF结合位点的确定 | 第48页 |
·H19基因DMR区测序分析 | 第48页 |
·卡方检验在各时间点C2C12细胞中4个CTCF位点的甲基化差异情况 | 第48-54页 |
4 讨论 | 第54-58页 |
·关于H19基因在组织、细胞中的表达 | 第54页 |
·关于H19-IGF2基因簇相关基因对H19的调控作用 | 第54-55页 |
·关于miRNA对H19的调控研究 | 第55页 |
·关于H19在C2C12细胞中的转录调控研究 | 第55-58页 |
5 小结 | 第58-60页 |
·本研究的主要结果 | 第58-59页 |
·本研究的创新点和特色 | 第59页 |
·本研究的不足及下一步工作建议 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69页 |