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H19/IGF2印记簇在骨骼肌发育中的调控机理初步研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-25页
   ·研究问题的由来第12-13页
   ·猪骨骼肌的发生发育过程第13页
   ·骨骼肌发育的分子机理第13-16页
     ·与肌肉发育相关的生肌调节因子第13页
     ·与肌肉发育相关的信号通路第13-14页
     ·miRNA对骨骼肌发育的重要调控作用第14-15页
     ·印记基因对骨骼肌发育的相关研究第15-16页
   ·H19/IGF2印记基因簇对骨骼肌发育有重要的调控作用第16-17页
   ·H19、IGF2的研究进展第17-23页
     ·印记基因的表达模式第17-20页
     ·甲基化对H19、IGF2的重要调控作用第20页
     ·转录因子对H19的调控作用第20-21页
     ·miRNA对H19调控研究第21-23页
   ·H19-IGF2印记基因簇内其他基因的研究进展第23页
   ·本研究的目的与意义第23-25页
2 材料与方法第25-40页
   ·材料第25-28页
     ·小鼠、猪组织样第25页
     ·菌株和载体第25-26页
     ·细胞第26页
     ·试剂第26-27页
     ·主要试剂的配制第27页
     ·主要分子生物学软件及数据库第27-28页
   ·方法第28-39页
     ·细胞的培养第28-29页
     ·miRNAs及基因表达量分析第29-32页
     ·启动子载体的构建第32-35页
     ·细胞的转染第35页
     ·细胞的处理与收集第35-36页
     ·双荧光素酶检测及数据分析第36页
     ·甲基化检测及数据分析第36-39页
   ·本研究的技术路线第39-40页
3 结果第40-54页
   ·H19、IGF2以及let7家族在大白、梅山猪三个时期中的组织表达规律检测第40-43页
   ·let7家族与H19以及pH值的相关性研究结果第43-44页
   ·在小鼠中H19、miR-675-3p组织表达谱第44-45页
   ·H19-IGF2印记基因簇相关基因在C2C12细胞分化过程中的表达情况第45页
   ·H19启动子转录活性检测第45-47页
     ·H19转录因子结合位点在线软件预测第45-46页
     ·H19启动子载体构建及双荧光活性检测第46-47页
   ·H19基因DMR区甲基化水平分析第47-54页
     ·H19基因CpG岛的在线预测第47-48页
     ·H19基因上游CTCF结合位点的确定第48页
     ·H19基因DMR区测序分析第48页
     ·卡方检验在各时间点C2C12细胞中4个CTCF位点的甲基化差异情况第48-54页
4 讨论第54-58页
   ·关于H19基因在组织、细胞中的表达第54页
   ·关于H19-IGF2基因簇相关基因对H19的调控作用第54-55页
   ·关于miRNA对H19的调控研究第55页
   ·关于H19在C2C12细胞中的转录调控研究第55-58页
5 小结第58-60页
   ·本研究的主要结果第58-59页
   ·本研究的创新点和特色第59页
   ·本研究的不足及下一步工作建议第59-60页
参考文献第60-69页
致谢第69页

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