单核细胞增生性李斯特菌适配子的筛选及其初步应用
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| ·单增李斯特菌概述 | 第12-20页 |
| ·生物学特性 | 第12-13页 |
| ·食品污染状况 | 第13-14页 |
| ·危害 | 第14-15页 |
| ·检测方法 | 第15-20页 |
| ·适配子 | 第20-23页 |
| ·适配子优点 | 第20-21页 |
| ·适配子筛选方法 | 第21-22页 |
| ·适配子的应用 | 第22-23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 单增李斯特菌适配子的筛选 | 第24-49页 |
| ·材料 | 第24-28页 |
| ·随机ssDNA文库与引物 | 第24页 |
| ·实验用菌株 | 第24-25页 |
| ·主要培养基及配制方法 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-27页 |
| ·其它主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-38页 |
| ·单增李斯特菌适配子的筛选 | 第28-34页 |
| ·结构分析 | 第34-37页 |
| ·单增李斯特菌适配子的特异性分析 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-44页 |
| ·PCR最佳工作条件 | 第38-40页 |
| ·ssDNA次级文库与单增李斯特菌的亲和力测定 | 第40-41页 |
| ·适配子的一级结构 | 第41-42页 |
| ·适配子二级结构预测 | 第42-43页 |
| ·适配子特异性测定 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| ·文库种类的选择 | 第44-45页 |
| ·ssDNA文库制备方法对实验结果的影响 | 第45页 |
| ·PCR产量对实验结果的影响 | 第45页 |
| ·每轮筛选应相应改变PCR扩增条件 | 第45-46页 |
| ·适配子与单增李斯特菌的亲和力 | 第46页 |
| ·适配子一级结构分析 | 第46-47页 |
| ·适配子二级结构分析 | 第47页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳的选择 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 3 单增李斯特菌ELASA检测方法的研究 | 第49-65页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·实验用菌株 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49-50页 |
| ·试剂的配制 | 第50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·包被方法以及链霉亲和素包被浓度的选择 | 第50-51页 |
| ·捕获适配子饱和浓度的测定 | 第51-52页 |
| ·辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素最佳工作浓度 | 第52页 |
| ·底物最佳显色时间 | 第52页 |
| ·不同生长时期的单增李斯特菌的检测 | 第52页 |
| ·适配子缓冲液的选择 | 第52-53页 |
| ·ELASA反应体系的特异性分析 | 第53页 |
| ·检测方法的灵敏度 | 第53页 |
| ·检测方法的特异性 | 第53-54页 |
| ·单增李斯特菌人工污染牛奶样品的检测 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·链霉亲和素的包被方法 | 第54-55页 |
| ·捕获适配子饱和浓度 | 第55-56页 |
| ·Sterptavidin/HRP最佳工作浓度 | 第56-57页 |
| ·底物最佳显色时间 | 第57页 |
| ·不同生长时期的单增李斯特菌的检测 | 第57-58页 |
| ·适配子稀释液的确定 | 第58-59页 |
| ·ELASA反应体系的特异性 | 第59-60页 |
| ·ELASA的最低检出浓度 | 第60页 |
| ·检测方法的特异性 | 第60-61页 |
| ·ELASA检测人工污染牛奶样品 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·单增李斯特菌ELASA的应用前景 | 第62-63页 |
| ·适配子的特性对检测方法的影响 | 第63页 |
| ·ELASA检测方法优点 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 4 结论与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| ·展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
