摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
·A型鸭病毒性肝炎病概述 | 第14-15页 |
·病原学 | 第14-15页 |
·临床症状与病理变化 | 第15页 |
·DHAV流行病学 | 第15页 |
·A型鸭肝炎病毒基因组的结构和功能 | 第15-17页 |
·编码区 | 第16-17页 |
·非编码区 | 第17页 |
·小RNA病毒3'UTR的结构 | 第17-21页 |
·复制起始点R(OriR) | 第17-19页 |
·Poly(A)尾巴 | 第19页 |
·环化型结构 | 第19-20页 |
·吻型结构 | 第20-21页 |
·“Z”形结构 | 第21页 |
·小RNA病毒3’UTR的功能 | 第21-23页 |
·参与病毒基因组复制 | 第21-22页 |
·参与病毒基因组翻译 | 第22-23页 |
·影响病毒感染性 | 第23页 |
·结语 | 第23-24页 |
第二章 A型鸭肝炎病毒微基因组的构建及初步应用 | 第24-34页 |
摘要 | 第24页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·菌株,质粒和细胞 | 第24页 |
·试剂与耗材 | 第24页 |
·实验试剂及配制方法 | 第24-26页 |
·主要仪器设备 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-30页 |
·目的基因序列生物学初步分析 | 第26页 |
·引物设计 | 第26-27页 |
·A型鸭肝炎病毒微基因组构建 | 第27-28页 |
·阳性质粒的筛选与鉴定 | 第28-29页 |
·DHAV微基因组缺失突变体的构建 | 第29页 |
·DHAV微基因组转染 | 第29页 |
·RT-PCR分析DHAV微基因组 | 第29页 |
·DHAV微基因组生长曲线 | 第29-30页 |
·Western Blot检测DHAV微基因组 | 第30页 |
·荧光素酶活性检测 | 第30页 |
·结果 | 第30-32页 |
·微基因组构建与鉴定 | 第30-31页 |
·RT-PCR鉴定 | 第31页 |
·Western Blot检测 | 第31-32页 |
·DHAV微基因组生长曲线 | 第32页 |
·非编码区全部缺失和部分缺失对报告基因fLuc的影响 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 A型鸭肝炎病毒复制子的构建及初步应用 | 第34-43页 |
摘要 | 第34页 |
·实验材料 | 第34页 |
·菌株,质粒和细胞 | 第34页 |
·主要试剂与仪器 | 第34页 |
·试剂及配制方法 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·引物设计 | 第34-35页 |
·A型鸭肝炎病毒复制子的构建 | 第35-36页 |
·DHAV复制子缺失突变体的构建 | 第36页 |
·DHAV复制子及其突变体转染 | 第36页 |
·RT-PCR分析 | 第36-37页 |
·生长曲线 | 第37页 |
·Western Blot检测 | 第37页 |
·间接免疫荧光实验(IFA) | 第37页 |
·荧光素酶活性检测 | 第37-38页 |
·结果 | 第38-41页 |
·构建并鉴定DHV复制子 | 第38-41页 |
·3'UTR部分或全部缺失对报告基因fLuc表达的影响 | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第四章 全文总结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简历 | 第50页 |