| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·牛呼吸道疾病综合症的研究进展 | 第12-13页 |
| ·溶血性曼氏杆菌的研究进展 | 第13-18页 |
| ·病原及流行病学 | 第13-14页 |
| ·细菌毒力因子 | 第14-16页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第16页 |
| ·发病机理与诊断方法 | 第16-17页 |
| ·预防和控制 | 第17-18页 |
| ·多杀性巴氏杆菌的研究进展 | 第18-27页 |
| ·病原及流行病学 | 第18-19页 |
| ·致病机制 | 第19页 |
| ·临床症状 | 第19-20页 |
| ·主要的毒力因子及免疫原 | 第20-25页 |
| ·治疗和预防 | 第25-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 溶血性曼氏杆菌白细胞毒素（lktA）的截短表达及免疫原性检测 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·实验菌株与载体 | 第28页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·酶和生化试剂 | 第28页 |
| ·主要试剂盒 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·M.haemolytica lktA 引物的设计与合成 | 第29页 |
| ·M.haemolytica 基因组提取与 lktA 基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·M.haemolytica lktA 基因 PCR 产物的回收与纯化 | 第30页 |
| ·M.haemolytica lktA 与 pMD18-T 连接 | 第30-31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·lktA-pMD18-T 重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·lktA 原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白 lktA 的诱导表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白 lktA 的 Western blotting 分析 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-37页 |
| ·M.haemolytica lktA 的 PCR 扩增结果及克隆鉴定结果 | 第35页 |
| ·M.haemolytica lktA 基因测序结果 | 第35-36页 |
| ·重组表达载体 lktA-pET-28a 的 PCR 及酶切鉴定结果 | 第36页 |
| ·重组蛋白 lktA 的诱导表达及纯化结果 | 第36页 |
| ·重组蛋白 lktA 的 Western Blotting 结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组融合蛋白 lktA-OmpH 的原核表达及免疫原性鉴定 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·酶及生化试剂 | 第38页 |
| ·试剂盒等 | 第38页 |
| ·仪器设备等 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·基因的引物设计与合成 | 第38页 |
| ·融合基因 lktA-OmpH 的扩增 | 第38-39页 |
| ·重组融合蛋白 lktA-OmpH 的表达与纯化 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白 lktA-OmpH 的 Western blotting | 第40页 |
| ·结果 | 第40-43页 |
| ·融合基因 lktA-OmpH 的扩增结果 | 第40页 |
| ·克隆载体 lktA-OmpH-pMD18-T 的 PCR 和酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·测序结果 | 第41页 |
| ·重组表达载体 lktA-OmpH-pET-28a 的 PCR 及酶切鉴定结果 | 第41页 |
| ·重组融合蛋白 lktA-OmpH 的表达及纯化结果 | 第41-42页 |
| ·重组融合蛋白的 Western Blotting 结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 重组融合蛋白 lktA-OmpH 的实验免疫 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·实验菌株和动物 | 第44页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·重组蛋白内毒素的检测 | 第44页 |
| ·实验动物的分组与免疫 | 第44-45页 |
| ·ELISA 抗体检测 | 第45页 |
| ·MTT 检测 | 第45-47页 |
| ·小鼠攻毒保护实验 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·重组蛋白内毒素检测结果 | 第47-48页 |
| ·ELISA 抗体检测结果 | 第48页 |
| ·MTT 检测结果 | 第48-49页 |
| ·淋巴细胞 IFN-γ的检测结果 | 第49页 |
| ·细胞因子 IL-4 检测结果 | 第49-50页 |
| ·攻毒试验保护结果 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 附录 | 第66-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
