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ETEC 987P基因工程乳酸菌的制备及其免疫效果的检测

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
第一章 引言第14-26页
   ·产肠毒素性大肠杆菌的概述及其疫苗的研究进展第14-21页
     ·产肠毒素大肠杆菌菌毛黏附素的研究进展第14-16页
     ·肠毒素第16-18页
     ·ETEC 疫苗的研究进展第18-21页
   ·乳酸菌作为抗原呈递载体的研究进展第21-25页
     ·乳酸菌简介第21-22页
     ·乳酸菌益生功能的研究现状第22页
     ·乳酸菌作为外源抗原呈递载体的优越性第22-23页
     ·乳酸菌对机体免疫作用的影响第23-24页
     ·乳酸菌作为口服疫苗呈递载体的应用第24-25页
   ·研究的目的与意义第25-26页
第二章 重组 ETEC 987P 干酪乳杆菌的构建第26-42页
   ·材料第26-27页
     ·质粒和菌株第26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·方法第27-35页
     ·重组表达载体 pLA-987P 的构建第27-31页
     ·ETEC 987P 重组干酪乳杆菌表达载体的构建第31-32页
     ·ETEC 987P 重组干酪乳杆菌的鉴定第32-34页
     ·外源蛋白在乳酸菌表面的定位第34-35页
   ·结果第35-39页
     ·ETEC 987P 菌毛基因 PCR 扩增第35页
     ·重组质粒的酶切鉴定结果第35-36页
     ·PCR 扩增干酪乳杆菌转化子的结果第36页
     ·Western blot 蛋白表达检测结果第36-37页
     ·间接免疫荧光法鉴定重组蛋白在乳酸菌表面的表达第37-38页
     ·流式细胞术鉴定外源蛋白在干酪乳杆菌表面的表达第38-39页
   ·讨论第39-41页
   ·结论第41-42页
第三章 重组 ETEC 987P 干酪乳杆菌免疫小鼠研究第42-56页
   ·材料第42-43页
     ·试验动物第42页
     ·菌株第42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要仪器第42-43页
   ·方法第43-48页
     ·免疫用重组干酪乳杆菌悬液的制备第43页
     ·试验动物的分组及免疫第43页
     ·样本采集第43-44页
     ·间接 ELISA第44-45页
     ·淋巴细胞的免疫学试验第45-46页
     ·细胞因子的检测第46-47页
     ·小鼠攻毒保护性试验第47-48页
   ·结果第48-52页
     ·重组蛋白的纯化结果第48页
     ·血清中 ETEC 987P 特异性 IgG 效价第48-49页
     ·粪便中抗 987P 特异性 sIgA 效价的测定第49页
     ·小肠冲洗液和气管冲洗液中特异性 sIgA 效价的测定第49-50页
     ·血清中 IgG 抗体亚类的检测结果第50页
     ·淋巴细胞增殖实验第50-51页
     ·细胞因子的检测结果第51页
     ·小鼠的攻毒保护结果第51-52页
   ·讨论第52-55页
   ·结论第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66-68页
个人简历第68页

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