| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-18页 |
| ·抗体的结构和研究现状 | 第9-10页 |
| ·基因工程抗体 | 第10-11页 |
| ·噬菌体展示技术(PHAGE DISPLAY TECHNIQUES,PDT) | 第11-12页 |
| ·载体系统及噬粒载体pCANTAB-5E | 第12-13页 |
| ·噬菌体抗体库技术 | 第13页 |
| ·抗体库的分类 | 第13-14页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第14-15页 |
| ·噬菌体抗体库的应用 | 第15-16页 |
| ·噬菌体抗体库技术在水产上的应用 | 第16-18页 |
| 2 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·实验对象 | 第19页 |
| ·酶、Marker及试剂盒 | 第19页 |
| ·工具质粒与菌株 | 第19页 |
| ·主要培养基和试剂 | 第19-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第20-21页 |
| ·构建斑点叉尾鮰天然单链噬菌体抗体库 | 第21-27页 |
| ·提取斑点叉尾鮰淋巴细胞 | 第21-22页 |
| ·提取斑点叉尾鮰总RNA | 第22页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·扩增和纯化VH和VL的PCR产物 | 第23-24页 |
| ·组装ScFv基因 | 第24页 |
| ·扩增ScFv基因 | 第24页 |
| ·ScFv基因的内切酶消化 | 第24-25页 |
| ·ScFv基因与pCANTAB-5E载体的连接 | 第25页 |
| ·感受态大肠杆菌XL1-Blue的制备 | 第25页 |
| ·电转化 | 第25-26页 |
| ·噬菌粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·转化子的鉴定 | 第26-27页 |
| ·噬菌体单链抗体表面展示文库的构建 | 第27页 |
| ·以卵清蛋白-磺胺甲恶唑(OVA-SMZ)为抗原进行噬菌体抗体库筛选 | 第27-30页 |
| ·对数生长期大肠杆菌XL1-Blue的制备 | 第27页 |
| ·OVA-SMZ包被板的制备 | 第27页 |
| ·重组噬菌体的PEG沉淀 | 第27-28页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第28页 |
| ·重组噬菌体的制备 | 第28页 |
| ·ELISA检测 | 第28-30页 |
| 4 实验结果 | 第30-34页 |
| ·总RNA质量分析 | 第30页 |
| ·cDNA质量分析 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增VH、VL | 第31页 |
| ·ScFv基因的组装 | 第31-32页 |
| ·抗体库中转化子的鉴定 | 第32页 |
| ·抗体库库容的测定 | 第32页 |
| ·利用OVA-SMZ所筛选抗体结果鉴定 | 第32-34页 |
| 5 讨论 | 第34-37页 |
| ·实验对象的选择 | 第34页 |
| ·建库类型的选择 | 第34-35页 |
| ·抗体库的质量 | 第35页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第35-37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-47页 |
| 致谢 | 第47页 |