摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语表(ABBREVIATION) | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-17页 |
·JE的历史及其危害 | 第12页 |
·JE的病原学及流行病学特性 | 第12-14页 |
·JE病原学 | 第12-13页 |
·JEV PrM、E和NS1蛋白的功能 | 第13页 |
·JE流行特征 | 第13-14页 |
·JE传播媒介和宿主 | 第14页 |
·JE疫苗 | 第14页 |
·糖基化与黄病毒 | 第14-17页 |
·糖基化与病毒的研究 | 第14-15页 |
·糖基化对病毒免疫的影响 | 第15-16页 |
·黄病毒N-糖基化的研究 | 第16页 |
·N-糖基化与黄病毒蛋白免疫 | 第16-17页 |
第2章 研究目的和意义 | 第17-18页 |
第3章 材料与方法 | 第18-32页 |
·试验材料 | 第18-22页 |
·菌株、细胞和毒株 | 第18页 |
·载体与质粒 | 第18-19页 |
·主要仪器及设备 | 第19-20页 |
·酶、试剂和引物 | 第20页 |
·主要溶液的配制 | 第20-22页 |
·实验动物 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-32页 |
·病毒的扩增 | 第22页 |
·蚀斑法测定乙型脑炎病毒滴度 | 第22-23页 |
·JEV去糖基化处理 | 第23页 |
·JEV去糖基化处理后Western blot验证 | 第23-24页 |
·JEV去糖基化处理后的蚀斑试验 | 第24页 |
·JEV滴度统计及蚀斑大小的测定 | 第24页 |
·JEV的RNA提取 | 第24-25页 |
·目的基因片段的获得及质粒的构建 | 第25-27页 |
·目的基因的定点突变及真核表达质粒的构建 | 第27-30页 |
·DNA免疫小白鼠试验 | 第30页 |
·ELISA检测免疫小白鼠血清抗体滴度 | 第30页 |
·免疫小白鼠的血清中和试验 | 第30-31页 |
·免疫小白鼠免疫保护力检测试验 | 第31-32页 |
第4章 结果与分析 | 第32-42页 |
·N-糖基化对JEV感染和增殖作用的研究 | 第32-35页 |
·JEV的扩增滴度测定 | 第32页 |
·糖工酶处理JEV去糖基化后Western blot结果 | 第32-33页 |
·糖工酶处理JEV去糖基化后蚀斑试验 | 第33-34页 |
·JEV去糖基化后滴度变化统计 | 第34-35页 |
·N-糖基化对JEV基因免疫效果的研究 | 第35-42页 |
·JEV NS_1基因片段的获取 | 第35-36页 |
·PCR定点突变及真核表达质粒构建 | 第36-38页 |
·免疫小白鼠血清抗体滴度检测 | 第38-39页 |
·免疫小白鼠血清中和抗体的检测 | 第39-40页 |
·免疫小白鼠免疫保护力检测 | 第40-42页 |
第5章 讨论与结论 | 第42-45页 |
·讨论 | 第42-44页 |
·N-糖基化对JEV感染和增殖的作用 | 第42-44页 |
·N-糖基化对JEV基因免疫效果的影响 | 第44页 |
·结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致谢 | 第50页 |