| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-14页 |
| 文献综述 | 第14-38页 |
| 1 隐孢子虫体外培养研究进展 | 第17-22页 |
| ·人源孢子虫体外培养研究进展 | 第18-19页 |
| ·禽源孢子虫体外培养研究进展 | 第19页 |
| ·其他动物源孢子虫体外培养研究进展 | 第19-22页 |
| 2 鸡气管组织体外培养模型研究进展 | 第22-30页 |
| ·鸡气管组织培养在病原研究中应用 | 第22-25页 |
| ·鸡气管组织培养模型在其他方面的应用 | 第25-28页 |
| ·鸡气管组织培养方法和条件研究 | 第28-30页 |
| 3 体外培养模型中隐孢子虫检测方法研究进展 | 第30-38页 |
| ·显微计数法 | 第30-31页 |
| ·酶免疫检测法（EIA） | 第31-32页 |
| ·分子和其他方法 | 第32-38页 |
| 试验一 C. baileyi 地方分离株扩增、纯化与脱囊 | 第38-48页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·卵囊接种 | 第39页 |
| ·卵囊收集 | 第39-40页 |
| ·卵囊纯化 | 第40页 |
| ·卵囊脱囊 | 第40页 |
| ·不同组成脱囊液和脱囊条件对脱囊率的影响 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊扩增 | 第41页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊纯化 | 第41-43页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊脱囊 | 第43-44页 |
| 3 结论与讨论 | 第44-48页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊扩增 | 第44页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊纯化 | 第44-45页 |
| ·鸡源贝氏隐孢子虫卵囊脱囊 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 试验二 C. baileyi 鸡胚气管环体外培养模型建立 | 第48-62页 |
| 引言 | 第48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-53页 |
| ·主要试剂及材料 | 第48-50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·培养基配制 | 第50页 |
| ·卵囊与子孢子纯化 | 第50页 |
| ·气管环制备 | 第50-51页 |
| ·虫体接种与培养 | 第51页 |
| ·气管环纤毛活力评价体系与观测指标 | 第51页 |
| ·鸡胚气管环接种卵囊后组织学检查 | 第51-52页 |
| ·间接免疫荧光检查 | 第52-53页 |
| ·PCR-RFLP 分析 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-58页 |
| ·鸡胚气管环培养模型中虫体发育史观察 | 第53页 |
| ·虫体感染鸡胚气管环后对纤毛摆动活性的影响 | 第53-54页 |
| ·鸡胚气管环感染贝氏隐孢子虫后组织学与间接免疫荧光检查 | 第54-56页 |
| ·鸡胚气管环感染贝氏隐孢子虫后电镜检查 | 第56-57页 |
| ·鸡胚气管环感染贝氏隐孢子虫后 PCR-RFLP 检测 | 第57-58页 |
| 3 结论与讨论 | 第58-62页 |
| ·鸡胚气管环体外培养模型中隐孢子虫发育史观察 | 第58-59页 |
| ·虫体分离株与培养条件对虫体体外培养的影响 | 第59页 |
| ·鸡胚气管组织培养 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-62页 |
| 试验三 鸡胚气管环体外培养体系中C.baileyi SYBR GreenⅠ实时定量PCR 检测方法建立与应用 | 第62-76页 |
| 引言 | 第62-63页 |
| 1 材料与方法 | 第63-67页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-67页 |
| ·引物设计及合成 | 第63-64页 |
| ·引物特异性初步分析 | 第64-65页 |
| ·气管环制备与虫体接种 | 第65-66页 |
| ·样品 DNA 提取与测定 | 第66页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量 PCR 反应体系条件优化 | 第66页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 扩增及标准曲线的建立 | 第66-67页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 敏感性测定 | 第67页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 重复性测定 | 第67页 |
| ·鸡胚气管环培养模型中 C. baileyi SYBR GreenⅠ实时定量 PCR 检测 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-72页 |
| ·引物特异性初步分析结果 | 第67-68页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量 PCR 引物反应性确认 | 第68-69页 |
| ·退火温度优化 | 第69页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量 PCR 标准曲线 | 第69-71页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR敏感性测定结果 | 第71页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR重复性测定结果 | 第71页 |
| ·鸡胚气管环培养模型中C. baileyi SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测结果 | 第71-72页 |
| 3 结论与讨论 | 第72-76页 |
| ·关于鸡胚气管环体外培养模型中C. baileyi SYBR GreenⅠ实时定量 PCR检测方法的建立 | 第72-73页 |
| ·建立标准曲线用卵囊显微计数 | 第73页 |
| ·鸡胚气管环体外培养模型中 C. baileyi SYBR GreenⅠ实时定量 PCR 检测方法验证 | 第73-74页 |
| ·相对定量法在鸡胚气管环体外培养模型中C. baileyi SYBR GreenⅠ实时定量PCR 检测中的应用 | 第74页 |
| ·关于样品中 DNA 提取 | 第74页 |
| ·基于SYBR GreenⅠ实时定量PCR 检测法测定的鸡胚气管环体外培养模型中C. baileyi 发育动态 | 第74-75页 |
| ·基于SYBR GreenⅠ实时定量PCR 测定硝唑尼特和巴龙霉素对鸡胚气管环体外培养模型中 C. baileyi 发育的影响 | 第75页 |
| ·结论 | 第75-76页 |
| 试验四 硝唑尼特和巴龙霉素对鸡胚培养模型中C. baileyi作用 | 第76-86页 |
| 引言 | 第76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-78页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-78页 |
| ·卵囊扩增 | 第77页 |
| ·卵囊纯化 | 第77页 |
| ·卵囊计数 | 第77页 |
| ·药物毒性试验 | 第77页 |
| ·鸡胚试验分组 | 第77-78页 |
| ·鸡胚观察指标与方法 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-84页 |
| ·药物毒性试验 | 第78页 |
| ·NTZ 和 PRM 对 C. baileyi 在鸡胚培养模型中发育影响 | 第78-79页 |
| ·NTZ 和 PRM 对 C. baileyi 在鸡胚培养模型中增殖影响 | 第79-84页 |
| 3 结论与讨论 | 第84-86页 |
| ·关于鸡胚培养模型在隐孢子虫培养中的应用 | 第84页 |
| ·NTZ 和 PRM 对 C. baileyi 鸡胚培养模型中发育影响 | 第84页 |
| ·NTZ 和 PRM 对 C.bailey 在鸡胚培养模型中增殖影响 | 第84-85页 |
| ·NTZ 和 PRM 对鸡胚培养模型和气管环培养模型中 C . b a i ley i 作用比较 | 第85页 |
| ·结论 | 第85-86页 |
| 结论与创新点 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-104页 |
| 英文摘要 | 第104-110页 |
| 附录 | 第110-113页 |
| 附录 A 攻读博士期间科研工作 | 第110-112页 |
| 附录 B 缩略词表 | 第112-113页 |
