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拟南芥GAI基因转化小桐子的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-24页
   ·小桐子的生物学特征第9页
   ·小桐子的主要应用价值第9-11页
     ·提炼生物柴油第9-10页
     ·药用价值第10页
     ·生态价值第10-11页
     ·促进"三农"经济发展的价值第11页
   ·小桐子组织培养研究进展第11-12页
   ·小桐子遗传转化研究进展第12-15页
     ·选择标记基因及报告基因第13-14页
     ·转化方法第14-15页
       ·基因枪法第14页
       ·农杆菌介导法第14-15页
   ·GAI基因的研究进展第15-19页
     ·GAI研究进展第15-16页
     ·GAI的基本特征第16页
     ·GAI在分子生物学研究中的应用第16-19页
   ·农杆菌的研究进展第19-20页
     ·农杆菌的转化机制第19-20页
     ·植物对转化的影响第20页
     ·农杆菌转化植物的步骤第20页
     ·培养方法对转化的影响第20页
   ·研究的目的和意义第20-22页
   ·技术路线第22-24页
2 材料与方法第24-36页
   ·小桐子的组织培养第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·研究方法第24-26页
       ·组织培养过程第24页
         ·材料处理及消毒第24页
         ·培养方法第24页
         ·培养条件第24页
       ·培养基第24-26页
   ·农杆菌法和基因枪法遗传转化小桐子第26-30页
     ·材料第26-28页
       ·质粒与农杆菌菌株第26-27页
       ·受体材料第27页
       ·农杆菌培养基第27页
       ·重要试剂、酶、试剂盒及仪器设备第27-28页
     ·农杆菌法遗传转化小桐子树第28-29页
       ·卡那霉素(Kanamycin)压力筛选第28页
       ·头孢霉素(Cefalexin)对再生的影响第28页
       ·农杆菌侵染液的制备第28页
       ·农杆菌转化步骤第28页
       ·转化材料的选择第28-29页
       ·农杆菌侵染时间对材料的影响第29页
       ·农杆菌侵染后共培养时间不同对抑菌的影响第29页
       ·共培养温度不同对抑菌影响第29页
       ·乙酰丁香酮AS浓度对转化的影响第29页
     ·基因枪法遗传转化小桐子树第29-30页
       ·基因枪法转化步骤第29-30页
         ·金粉的处理第29页
         ·DNA包裹金粉第29-30页
         ·轰击第30页
   ·转化植株的检测第30-36页
     ·植物总DNA提取(CTAB法)第30-31页
     ·PCR扩增第31页
     ·转基因小桐子植株的Southern Blot检测第31-36页
       ·GAI目的基因的制备第31-32页
       ·探针的制备第32页
       ·基因组酶切第32页
       ·DNA转膜第32-34页
       ·杂交步骤第34页
       ·免疫学检测第34-36页
3 结果与分析第36-47页
   ·小桐子再生体系的优化第36-39页
     ·愈伤组织的诱导第36-37页
     ·愈伤组织的出芽诱导第37页
     ·生根第37-39页
   ·小桐子遗传转化的研究第39-47页
     ·选择压浓度的确定第39页
       ·Kan浓度对叶脉愈伤组织的影响第39页
       ·Cef对愈伤组织存活率的影响第39页
     ·农杆菌法遗传转化小桐子第39-45页
       ·转化材料的选择第39-40页
       ·农杆菌侵染时间对材料的影响第40页
       ·侵染后不同共培养时间对抑菌的影响第40-41页
       ·侵染后不同共培养温度对抑菌的影响第41页
       ·乙酰丁香酮(AS)对转化的影响第41页
       ·转基因材料的获得与检测第41-45页
         ·转基因小桐子的获得第41-42页
         ·转基因小桐子的PCR检测及扩繁第42-43页
         ·转基因小桐子的Southern检测第43-45页
     ·基因枪法遗传转化小桐子第45-47页
       ·基因枪轰击叶脉愈伤组织第45页
       ·轰击距离对基因枪法转化小桐子的影响第45页
       ·抗性苗的获得第45-46页
       ·抗性愈伤组织的PCR检测第46-47页
4 讨论第47-49页
   ·小桐子树遗传转化体系建立第47-48页
     ·外植体的选择第47页
     ·不同激素配比的影响第47-48页
   ·将矮化基因导入小桐子树第48页
     ·农杆菌介导转化法第48页
     ·基因枪转化法第48页
   ·后续工作展望第48-49页
5 结论第49-50页
缩写词及其英汉对照第50-51页
附图第51-53页
参考文献第53-57页
致谢第57页

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