水稻广谱抗性相关基因OsMOS3的克隆及功能研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1.文献综述 | 第9-16页 |
| ·概述 | 第9页 |
| ·植物的免疫系统 | 第9-10页 |
| ·植物的初级免疫反应 | 第9页 |
| ·植物的次级免疫反应 | 第9-10页 |
| ·R 基因的研究 | 第10-12页 |
| ·R基因的结构 | 第10-11页 |
| ·R基因作用机制 | 第11-12页 |
| ·植物病程相关蛋白 | 第12页 |
| ·植物抗病反应中的信号分子 | 第12-13页 |
| ·水杨酸介导的抗病信号途径 | 第13页 |
| ·乙烯介导的抗病信号途径 | 第13页 |
| ·茉莉酸介导的抗病信号途径 | 第13页 |
| ·广谱抗病基因研究现状 | 第13-15页 |
| ·生物信息学在功能基因研究中的作用 | 第15-16页 |
| 2. 引言 | 第16-18页 |
| ·研究的内容 | 第16页 |
| ·研究的意义 | 第16-17页 |
| ·实验技术路线 | 第17-18页 |
| 3．材料和方法 | 第18-37页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·载体材料 | 第18页 |
| ·实验试剂及器材 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第18页 |
| ·农杆菌培养基 | 第18页 |
| ·水稻组织培养基 | 第18-19页 |
| ·白叶枯病培养基 | 第19页 |
| ·OsMOS3扩增 | 第19-25页 |
| ·PCR引物设计 | 第19-20页 |
| ·Trizol法提取RNA | 第20-21页 |
| ·反转录 | 第21页 |
| ·重叠PCR扩增OsMOS3基因 | 第21-23页 |
| ·干涉片段mir的扩增 | 第23页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第23-24页 |
| ·连入pEASY-T1克隆载体 | 第24页 |
| ·质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·OsMOS3生物信息学分析 | 第25页 |
| ·OsMOS3蛋白组成分析 | 第25页 |
| ·OsMOS3蛋白结构域分析 | 第25页 |
| ·OsMOS3蛋白与其同源序列进化树分析 | 第25页 |
| ·OsMOS3表达载体的构建 | 第25-32页 |
| ·过表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·CBP-2F干涉载体的构建 | 第26-29页 |
| ·GFP融合表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·OsMOS3的亚细胞定位 | 第32-33页 |
| ·根癌农杆菌EHA105的转化 | 第33页 |
| ·感受态的制取 | 第33页 |
| ·转化 | 第33页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第33页 |
| ·水稻遗传转化 | 第33-34页 |
| ·诱导 | 第33-34页 |
| ·侵染 | 第34页 |
| ·选择 | 第34页 |
| ·分化 | 第34页 |
| ·生根 | 第34页 |
| ·炼苗及大田移栽 | 第34页 |
| ·转基因水稻的阳性检测 | 第34-36页 |
| ·CTAB法提取基因组 | 第34-35页 |
| ·筛选标记潮霉素的PCR检测 | 第35页 |
| ·转基因植株OsMOS3半定量分析 | 第35-36页 |
| ·转基因水稻的抗病性检测 | 第36-37页 |
| ·白叶枯病活体接种鉴定 | 第36页 |
| ·FreeSA含量的测定 | 第36-37页 |
| 4.结果与分析 | 第37-46页 |
| ·目的基因的克隆 | 第37-39页 |
| ·日本晴总RNA的提取 | 第37页 |
| ·OsMOS3基因全长的扩增 | 第37-38页 |
| ·干涉片段mir的扩增 | 第38-39页 |
| ·OsMOS3生物信息学分析 | 第39-40页 |
| ·OsMOS3表达载体的构建 | 第40-42页 |
| ·OsMOS3过表达载体的构建 | 第40页 |
| ·OsMOS3干涉载体的构建 | 第40-41页 |
| ·OsMOS3融合表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·OsMOS3的亚细胞定位 | 第42页 |
| ·水稻遗传转化 | 第42-43页 |
| ·筛选标记的PCR检测 | 第43页 |
| ·OsMOS3半定量分析 | 第43-44页 |
| ·转基因水稻抗病性检测 | 第44-46页 |
| ·白叶枯病抗性鉴定 | 第44-45页 |
| ·FreeSA的HPLC测定 | 第45-46页 |
| 5. 讨论 | 第46-48页 |
| ·OsMOS3的进化 | 第46页 |
| ·OsMOS3的抗病途径 | 第46页 |
| ·OsMOS3在水稻抗病育种上应用及意义 | 第46-48页 |
| 6. 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录A：中英文缩写与注释 | 第55-56页 |
| 附录B：OsMOS3测序结果拼接图 | 第56-57页 |
| 附录C：OsMOS3蛋白比对图 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59-60页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第60页 |
