| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-11页 |
| ·四氢生物蝶呤（BH4） | 第8-10页 |
| ·BH4 的生物合成途径 | 第8-9页 |
| ·BH4 缺乏的原因 | 第9页 |
| ·BH4 缺乏引起的相关的疾病 | 第9-10页 |
| ·墨蝶呤还原酶（SPR） | 第10页 |
| ·SPR催化的反应 | 第10页 |
| ·家蚕SPR（BmSPR） | 第10页 |
| ·二氢叶酸还原酶（DHFR） | 第10-11页 |
| 2 引言 | 第11-13页 |
| ·研究的目的及意义 | 第11页 |
| ·主要研究内容 | 第11-12页 |
| ·BmSPR的原核表达分析 | 第11页 |
| ·BmDHFR基因的克隆 | 第11-12页 |
| ·BmDhfr基因的表达分析 | 第12页 |
| ·BmSPR 和 BmDHFR 的酶活性分析 | 第12页 |
| ·技术路线 | 第12-13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-25页 |
| ·实验材料 | 第13页 |
| ·仪器与试剂 | 第13-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第13页 |
| ·主要生化试剂 | 第13-14页 |
| ·常用溶液的配置 | 第14-16页 |
| ·实验方法 | 第16-25页 |
| ·BmSPR的原核表达与检测 | 第16-18页 |
| ·BmDhfr基因的克隆 | 第18-20页 |
| ·BmDhfr基因在不同组织中的表达 | 第20-21页 |
| ·重组蛋白BmDHFR的原核表达分析 | 第21-22页 |
| ·蛋白定量分析 | 第22-23页 |
| ·酶活性分析 | 第23-25页 |
| 4 结果 | 第25-33页 |
| ·BmSPR的原核表达与检测 | 第25-27页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第25-26页 |
| ·BmSPR的诱导表达 | 第26页 |
| ·BmSPR 纯化及 Western blotting 检测 | 第26-27页 |
| ·BmDhfr基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·BmDhfr基因的原核表达分析 | 第28-30页 |
| ·家蚕p50 总RNA的检测 | 第28页 |
| ·第一链cDNA浓度的测定 | 第28页 |
| ·BmDhfr基因在不同组织中的表达 | 第28-29页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·BmDHFR的诱导表达、纯化及 Western blot 检测 | 第30页 |
| ·酶活性分析 | 第30-33页 |
| ·BmSPR活性分析 | 第30-31页 |
| ·BmDHFR活性分析 | 第31-33页 |
| 5 讨论 | 第33-35页 |
| ·BmSPR的原核表达 | 第33-34页 |
| ·BmDhfr基因的克隆 | 第34页 |
| ·BmDHFR的表达分析 | 第34页 |
| ·重组BmSPR和BmDHFR的酶活性分析 | 第34-35页 |
| 6 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 个人简介 | 第44-45页 |
| 读研期间的研究成果 | 第45页 |