摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
英文缩略词表 | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
第一节 犬细小病毒的研究进展 | 第13-20页 |
1. 犬细小病毒简介 | 第13-14页 |
2. 分子生物学特性 | 第14-17页 |
3. 临床症状和致病性蕌 | 第17-19页 |
·临床症状 | 第17-18页 |
·病理学 | 第18-19页 |
4. 犬细小病毒的致病机理 | 第19-20页 |
第二节 表达谱基因芯片技术及其在兽医学研究上的应用 | 第20-26页 |
1. 基因芯片的概念 | 第20-22页 |
·表达谱基因芯片的应用原理 | 第21页 |
·表达谱基因芯片的技术流程 | 第21-22页 |
·基因芯片的优越性 | 第22页 |
2. 表达谱基因芯片在兽医学中的应用 | 第22-25页 |
·基因功能的研究 | 第22-23页 |
·动物发病机制的研究 | 第23-24页 |
·病原体感染后细胞生物学通路研究 | 第24-25页 |
3. 小结与展望 | 第25-26页 |
第二章 持续感染CPV细胞模型的建立及CPV分子生物学背景研究 | 第26-40页 |
1. 材料 | 第26-27页 |
·临床病料与处理 | 第26页 |
·材料与试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
2. 方法 | 第27-32页 |
·持续感染细胞系的建立 | 第27页 |
·持续感染细胞系中病毒的检测 | 第27-28页 |
·病毒一步生长曲线绘制 | 第28页 |
·病毒半数组织感染量测定 | 第28-29页 |
·编码区的扩增和测序 | 第29-30页 |
·两端发卡结构的扩增、克隆和测序 | 第30-32页 |
·序列拼接及全编码区进化树的构建 | 第32页 |
3. 结果 | 第32-37页 |
·持续感染细胞系建立 | 第32-34页 |
·病毒TCID_(50)测定 | 第34-35页 |
·病毒一步生长曲线绘制 | 第35-36页 |
·重叠片段的扩增和测序 | 第36页 |
·病毒全长序列拼接 | 第36-37页 |
·同源性及进化树分析 | 第37页 |
4. 讨论 | 第37-39页 |
5. 结论 | 第39-40页 |
第三章 表达潜基因芯片技术分析MDCK细胞感染CPV后全基因组差异表达谱 | 第40-56页 |
1. 材料 | 第40页 |
·材料和试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
2. 方法 | 第40-47页 |
·RNA提取 | 第40-42页 |
·cDNA的合成和纯化 | 第42-43页 |
·aRNA合成及标记 | 第43-44页 |
·aRNA片段化并检测 | 第44页 |
·基因芯片杂交 | 第44-45页 |
·芯片洗脱、染色和扫描 | 第45页 |
·数据分析 | 第45-46页 |
·荧光定量PCR进行基因水平验证 | 第46-47页 |
3. 结果 | 第47-53页 |
·样本RNA抽提和质检 | 第47-48页 |
·aRNA的定量和检测 | 第48-50页 |
·片段化cRNA的检测 | 第50页 |
·基因芯片扫描图像 | 第50页 |
·基因芯片数据分析 | 第50-52页 |
·Real Time PCR验证 | 第52-53页 |
4. 讨论 | 第53-56页 |
全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录一 CPV-LZ1全序列 | 第62-64页 |
附录二 基因芯片检测显示的差异基因 | 第64-77页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77页 |