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犬肾细胞感染犬细小病毒后全基因组表达谱差异的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
英文缩略词表第8-11页
前言第11-13页
第一章 文献综述第13-26页
 第一节 犬细小病毒的研究进展第13-20页
  1. 犬细小病毒简介第13-14页
  2. 分子生物学特性第14-17页
  3. 临床症状和致病性蕌第17-19页
   ·临床症状第17-18页
   ·病理学第18-19页
  4. 犬细小病毒的致病机理第19-20页
 第二节 表达谱基因芯片技术及其在兽医学研究上的应用第20-26页
  1. 基因芯片的概念第20-22页
   ·表达谱基因芯片的应用原理第21页
   ·表达谱基因芯片的技术流程第21-22页
   ·基因芯片的优越性第22页
  2. 表达谱基因芯片在兽医学中的应用第22-25页
   ·基因功能的研究第22-23页
   ·动物发病机制的研究第23-24页
   ·病原体感染后细胞生物学通路研究第24-25页
  3. 小结与展望第25-26页
第二章 持续感染CPV细胞模型的建立及CPV分子生物学背景研究第26-40页
 1. 材料第26-27页
   ·临床病料与处理第26页
   ·材料与试剂第26页
   ·主要仪器第26-27页
 2. 方法第27-32页
   ·持续感染细胞系的建立第27页
   ·持续感染细胞系中病毒的检测第27-28页
   ·病毒一步生长曲线绘制第28页
   ·病毒半数组织感染量测定第28-29页
   ·编码区的扩增和测序第29-30页
   ·两端发卡结构的扩增、克隆和测序第30-32页
   ·序列拼接及全编码区进化树的构建第32页
 3. 结果第32-37页
   ·持续感染细胞系建立第32-34页
   ·病毒TCID_(50)测定第34-35页
   ·病毒一步生长曲线绘制第35-36页
   ·重叠片段的扩增和测序第36页
   ·病毒全长序列拼接第36-37页
   ·同源性及进化树分析第37页
 4. 讨论第37-39页
 5. 结论第39-40页
第三章 表达潜基因芯片技术分析MDCK细胞感染CPV后全基因组差异表达谱第40-56页
 1. 材料第40页
   ·材料和试剂第40页
   ·主要仪器第40页
 2. 方法第40-47页
   ·RNA提取第40-42页
   ·cDNA的合成和纯化第42-43页
   ·aRNA合成及标记第43-44页
   ·aRNA片段化并检测第44页
   ·基因芯片杂交第44-45页
   ·芯片洗脱、染色和扫描第45页
   ·数据分析第45-46页
   ·荧光定量PCR进行基因水平验证第46-47页
 3. 结果第47-53页
   ·样本RNA抽提和质检第47-48页
   ·aRNA的定量和检测第48-50页
   ·片段化cRNA的检测第50页
   ·基因芯片扫描图像第50页
   ·基因芯片数据分析第50-52页
   ·Real Time PCR验证第52-53页
 4. 讨论第53-56页
全文结论第56-57页
参考文献第57-61页
致谢第61-62页
附录一 CPV-LZ1全序列第62-64页
附录二 基因芯片检测显示的差异基因第64-77页
攻读学位期间发表的学术论文目录第77页

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