| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一节 犬细小病毒的研究进展 | 第13-20页 |
| 1. 犬细小病毒简介 | 第13-14页 |
| 2. 分子生物学特性 | 第14-17页 |
| 3. 临床症状和致病性蕌 | 第17-19页 |
| ·临床症状 | 第17-18页 |
| ·病理学 | 第18-19页 |
| 4. 犬细小病毒的致病机理 | 第19-20页 |
| 第二节 表达谱基因芯片技术及其在兽医学研究上的应用 | 第20-26页 |
| 1. 基因芯片的概念 | 第20-22页 |
| ·表达谱基因芯片的应用原理 | 第21页 |
| ·表达谱基因芯片的技术流程 | 第21-22页 |
| ·基因芯片的优越性 | 第22页 |
| 2. 表达谱基因芯片在兽医学中的应用 | 第22-25页 |
| ·基因功能的研究 | 第22-23页 |
| ·动物发病机制的研究 | 第23-24页 |
| ·病原体感染后细胞生物学通路研究 | 第24-25页 |
| 3. 小结与展望 | 第25-26页 |
| 第二章 持续感染CPV细胞模型的建立及CPV分子生物学背景研究 | 第26-40页 |
| 1. 材料 | 第26-27页 |
| ·临床病料与处理 | 第26页 |
| ·材料与试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| 2. 方法 | 第27-32页 |
| ·持续感染细胞系的建立 | 第27页 |
| ·持续感染细胞系中病毒的检测 | 第27-28页 |
| ·病毒一步生长曲线绘制 | 第28页 |
| ·病毒半数组织感染量测定 | 第28-29页 |
| ·编码区的扩增和测序 | 第29-30页 |
| ·两端发卡结构的扩增、克隆和测序 | 第30-32页 |
| ·序列拼接及全编码区进化树的构建 | 第32页 |
| 3. 结果 | 第32-37页 |
| ·持续感染细胞系建立 | 第32-34页 |
| ·病毒TCID_(50)测定 | 第34-35页 |
| ·病毒一步生长曲线绘制 | 第35-36页 |
| ·重叠片段的扩增和测序 | 第36页 |
| ·病毒全长序列拼接 | 第36-37页 |
| ·同源性及进化树分析 | 第37页 |
| 4. 讨论 | 第37-39页 |
| 5. 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 表达潜基因芯片技术分析MDCK细胞感染CPV后全基因组差异表达谱 | 第40-56页 |
| 1. 材料 | 第40页 |
| ·材料和试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| 2. 方法 | 第40-47页 |
| ·RNA提取 | 第40-42页 |
| ·cDNA的合成和纯化 | 第42-43页 |
| ·aRNA合成及标记 | 第43-44页 |
| ·aRNA片段化并检测 | 第44页 |
| ·基因芯片杂交 | 第44-45页 |
| ·芯片洗脱、染色和扫描 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45-46页 |
| ·荧光定量PCR进行基因水平验证 | 第46-47页 |
| 3. 结果 | 第47-53页 |
| ·样本RNA抽提和质检 | 第47-48页 |
| ·aRNA的定量和检测 | 第48-50页 |
| ·片段化cRNA的检测 | 第50页 |
| ·基因芯片扫描图像 | 第50页 |
| ·基因芯片数据分析 | 第50-52页 |
| ·Real Time PCR验证 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-56页 |
| 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录一 CPV-LZ1全序列 | 第62-64页 |
| 附录二 基因芯片检测显示的差异基因 | 第64-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第77页 |