| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| ·病毒诱导基因沉默现象的发现与VIGS的提出 | 第10-11页 |
| ·VIGS技术的原理和机制 | 第11-15页 |
| ·VIGS沉默机制 | 第11-13页 |
| ·VIGS的技术原理 | 第13-15页 |
| ·植物基因功能基因组VIGS技术常用病毒载体系统及其特点 | 第15-17页 |
| ·RNA病毒载体 | 第15-17页 |
| ·DNA病毒载体 | 第17页 |
| ·卫星病毒载体 | 第17页 |
| ·VIGS应用于植物功能基因研究的进展 | 第17-19页 |
| ·VIGS技术的优点和不足 | 第17-19页 |
| ·VIGS技术的优点 | 第17-18页 |
| ·VIGS技术的不足 | 第18-19页 |
| ·应用实例 | 第19页 |
| ·本课题的提出及研究意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·植物材料 | 第21-22页 |
| ·晚疫病原菌 | 第22页 |
| ·选取基因 | 第22-25页 |
| ·菌株和质粒及分子生物学相关试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·碱裂解法制备质粒DNA | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第27页 |
| ·大肠杆菌重组子的酶切和连接 | 第27-28页 |
| ·农杆菌阳性克隆的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·农杆菌侵染马铃薯植株 | 第29页 |
| ·病毒、病原菌接种 | 第29-30页 |
| ·Trizol法小量提取马铃薯叶片的RNA | 第30页 |
| ·反转录PCR反应(Reverse Transcription-PCR,RT-PCR) | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·烟草PDS基因沉默植株的表型及VIGS体系的建立 | 第31-32页 |
| ·马铃薯基因型的筛选 | 第32-33页 |
| ·基因沉默瞬时表达体系的优化 | 第33-36页 |
| ·接种方法对基因沉默效率的影响 | 第33-34页 |
| ·植株的生长状态对基因沉默效果的影响 | 第34页 |
| ·试管苗、实生苗材料对基因沉默的效率的影响 | 第34-35页 |
| ·温度和湿度对基因沉默效率的影响 | 第35-36页 |
| ·利用VIGS研究马铃薯部分基因功能 | 第36-41页 |
| ·病毒载体的构建 | 第36-38页 |
| ·大肠杆菌重组子的质粒提取、纯化及酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组病毒载体的农杆菌的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·部分基因沉默叶片目的基因沉默效果分析 | 第38-39页 |
| ·基因沉默株系叶片晚疫病抗性分析 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·马铃薯不同基因型对VIGS的影响 | 第41页 |
| ·温度与湿度 | 第41-42页 |
| ·植株生长状态 | 第42页 |
| ·试管苗与实生苗 | 第42-43页 |
| ·接种方法 | 第43页 |
| ·基因沉默的效率 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-53页 |
| 附录 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
