| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·植物光周期研究现状 | 第9-14页 |
| ·植物雄性不育概述 | 第14-15页 |
| ·光敏雄性不育水稻NK58S生理生化研究 | 第15-16页 |
| ·光周期敏感雄性核不育基因的定位 | 第16-17页 |
| ·基因表达研究方法简介 | 第17-19页 |
| 2 本研究的意义及目标 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-28页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第20页 |
| ·田间材料 | 第20-21页 |
| ·NK58S部分叶片遮光处理条件与方法 | 第21-22页 |
| ·抽穗期考察、花粉镜检与结实率统计 | 第22页 |
| ·转基因植株基因型及拷贝数检测 | 第22-24页 |
| ·基因型检测 | 第22-23页 |
| ·叶片DNA少量快速抽提 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增及PCR产物酶切 | 第23页 |
| ·电泳检测 | 第23页 |
| ·Southern Blot | 第23-24页 |
| ·高质量叶片DNA抽提 | 第23页 |
| ·DNA浓度调节、酶切转膜 | 第23-24页 |
| ·探针制备及Southern杂交 | 第24页 |
| ·HB614转化植株侧翼序列分离 | 第24页 |
| ·pms3候选基因表达检测 | 第24-28页 |
| ·RNA材料取样及抽提、逆转录 | 第24-25页 |
| ·使用RT-PCR和Real-time PCR对样品进行检测 | 第25页 |
| ·利用拟南芥原生质体进行候选基因亚细胞定位 | 第25-28页 |
| ·转化载体构建与纯化 | 第25-26页 |
| ·拟南芥原生质体制备 | 第26-27页 |
| ·目标基因原生质体瞬时表达及激光共聚焦观察 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-42页 |
| ·NK58S部分叶片短日处理 | 第28-31页 |
| ·NK58S上部两片叶决定育性转换 | 第28-29页 |
| ·光照处理决定育性转换的确切部位 | 第29-31页 |
| ·心叶在育性转换中的作用 | 第31页 |
| ·部分叶片遮光对抽穗期的影响 | 第31页 |
| ·光敏核不育基因pms3鉴定 | 第31-36页 |
| ·转基因T2代群体基因型鉴定 | 第31-34页 |
| ·花粉育性与结实率考察 | 第34-35页 |
| ·HB614侧翼序列分离 | 第35-36页 |
| ·pms3候选基因表达分析 | 第36-42页 |
| ·Gene M与Gene SNP的全生育期表达谱 | 第36-39页 |
| ·Gene M与Gene SNP的48h表达谱 | 第39-40页 |
| ·Gene M和Gene SNP ORF表达蛋白亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| ·NK58S育性转换敏感部位的确定及其机理推测 | 第42-43页 |
| ·pms3候选基因作用模式分析 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 试剂配方 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |