| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第13-21页 |
| ·酶的分类 | 第13-14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分布 | 第14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的理化性质（酶学性质） | 第14-17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分子量 | 第15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的等电点、最适pH值及pH稳定性 | 第15-16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的最适温度及热稳定性 | 第16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第16-17页 |
| ·金属离子及化合物对β-葡萄糖苷酶的影响 | 第17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶提取与分离纯化方法与活力的测定方法 | 第17-18页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的提取与分离纯化 | 第17-18页 |
| ·β-葡萄糖苷酶活力的测定 | 第18页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的活性中心 | 第18-19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的诱导、分泌和反应机制 | 第19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第19-21页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的国内外研究现状 | 第21页 |
| ·积雪草的研究进展 | 第21-22页 |
| ·本文的研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 青霉属真菌J-9产β-葡萄糖苷酶的发酵工艺研究 | 第24-40页 |
| 引言 | 第24页 |
| ·试剂、材料和仪器 | 第24-26页 |
| ·实验材料和试剂 | 第24-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·pNPG法检测活力方法的建立 | 第26-27页 |
| ·J-9菌孢子悬液制备 | 第27-28页 |
| ·发酵工艺优化 | 第28-30页 |
| ·发酵时间对酶β-葡萄糖苷酶活力影响 | 第28页 |
| ·葡萄糖加入量对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第28页 |
| ·不同小分子碳源对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第28页 |
| ·不同大分子碳源对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第28-29页 |
| ·不同初始pH对活力的影响 | 第29页 |
| ·最佳发酵时间的优选 | 第29页 |
| ·最佳发酵温度的优选 | 第29页 |
| ·底物加入量的优选 | 第29-30页 |
| ·不同底物对酶活的影响 | 第30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-39页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线 | 第30-31页 |
| ·发酵时间的影响 | 第31-32页 |
| ·葡萄糖加入量的影响 | 第32页 |
| ·不同碳源的影响 | 第32-34页 |
| ·培养基初始pH的影响 | 第34-35页 |
| ·确定最佳发酵时间 | 第35-36页 |
| ·发酵温度的影响 | 第36页 |
| ·底物加入量的影响 | 第36-37页 |
| ·不同底物对酶活的影响 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 β-葡萄糖苷酶的提取分离及其酶学性质的初步研究 | 第40-57页 |
| 引言 | 第40页 |
| ·试剂、材料和仪器 | 第40-43页 |
| ·实验材料和试剂 | 第40-42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-49页 |
| ·粗酶液的制备 | 第43页 |
| ·pNPG法检测酶活 | 第43页 |
| ·Bradford法测定蛋白质方法的建立 | 第43-44页 |
| ·粗酶沉淀方法的优化 | 第44-45页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第44页 |
| ·丙酮沉淀 | 第44页 |
| ·乙醇沉淀 | 第44-45页 |
| ·DEAE-52纤维素分离纯化β-葡萄糖苷酶 | 第45-46页 |
| ·DEAE-52纤维素的预处理 | 第45页 |
| ·缓冲液的选择 | 第45页 |
| ·装柱 | 第45-46页 |
| ·平衡 | 第46页 |
| ·上样 | 第46页 |
| ·洗脱 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第46-48页 |
| ·溶液及胶的配制 | 第46-47页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳测定蛋白分子量 | 第48页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第48-49页 |
| ·酶的最适反应pH | 第48页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第48-49页 |
| ·酶的热稳定性试验 | 第49页 |
| ·不同金属离子对β-葡萄糖苷酶活性的影响 | 第49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第49-50页 |
| ·蛋白质沉淀 | 第50页 |
| ·DEAE-52分离纯化β-葡萄糖苷酶 | 第50-52页 |
| ·上样缓冲液的选择 | 第50-51页 |
| ·洗脱缓冲液的选择 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳结果 | 第52-53页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第53-56页 |
| ·酶的最适反应pH | 第53-54页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第54-55页 |
| ·酶的热稳定性试验 | 第55页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第四章 积雪草总苷转化产物中三种单葡萄糖苷的分离纯化及结构鉴定 | 第57-83页 |
| 引言 | 第57页 |
| ·试剂、材料和仪器 | 第57-59页 |
| ·实验材料和试剂 | 第57-58页 |
| ·实验仪器 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-62页 |
| ·底物的生物转化 | 第59页 |
| ·转化产物的提取 | 第59页 |
| ·转化产物的硅胶柱层析分离 | 第59-60页 |
| ·样品胶的制备 | 第59页 |
| ·装柱 | 第59-60页 |
| ·洗脱 | 第60页 |
| ·C_(18)柱层析分离转化产物B、C | 第60-61页 |
| ·装柱 | 第60页 |
| ·洗脱 | 第60页 |
| ·转化产物B和C的结晶 | 第60-61页 |
| ·样品纯度检测 | 第61页 |
| ·结构鉴定 | 第61-62页 |
| ·HPLC分析 | 第61页 |
| ·比旋度的测定 | 第61页 |
| ·质谱分析 | 第61-62页 |
| ·NMR分析 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-82页 |
| ·转化产物A、B、C的分离纯化 | 第62页 |
| ·转化产物A、B的结构鉴定 | 第62-82页 |
| ·HPLC鉴定结果 | 第62-64页 |
| ·样品纯度测定 | 第64-65页 |
| ·比旋度的测定 | 第65页 |
| ·质谱检测 | 第65-68页 |
| ·~(13)C-NMR核磁共振图谱 | 第68-74页 |
| ·~1H-NMR核磁共振图谱 | 第74-79页 |
| ·NMR分析 | 第79-80页 |
| ·结构鉴定结果 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第五章 HPLC法测定积雪草总苷转化产物中积雪草酸B单葡萄糖苷、羟基积雪草酸单葡萄糖苷和积雪草酸单葡萄糖苷的含量 | 第83-94页 |
| 引言 | 第83页 |
| ·实验试剂、材料和仪器 | 第83-85页 |
| ·实验试剂和材料 | 第83-84页 |
| ·实验仪器 | 第84-85页 |
| ·实验方法 | 第85-87页 |
| ·摇瓶发酵培养 | 第85页 |
| ·转化产物的制备 | 第85页 |
| ·溶液制备 | 第85-86页 |
| ·色谱条件和系统适用性试验 | 第86页 |
| ·线性关系考察 | 第86页 |
| ·精密度试验 | 第86页 |
| ·重复性试验 | 第86-87页 |
| ·稳定性试验 | 第87页 |
| ·加样回收率试验 | 第87页 |
| ·样品测定 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-92页 |
| ·系统适应性试验 | 第87-89页 |
| ·线性关系考察 | 第89页 |
| ·精密度试验 | 第89-90页 |
| ·重复性试验 | 第90页 |
| ·稳定性试验 | 第90-91页 |
| ·加样回收率试验 | 第91-92页 |
| ·样品含量测定 | 第92页 |
| ·讨论 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
| 攻读学位期间所开展的科研项目和发表的学术论文 | 第103页 |
