| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第12-16页 |
| ·细胞株 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-13页 |
| ·主要试剂配制 | 第13-14页 |
| ·仪器 | 第14-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-24页 |
| ·MTT 法检测细胞增殖率 | 第16页 |
| ·Hoechst 33342/PI 染色观察细胞核型改变 | 第16-17页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| ·逆转录聚合酶链反应（RT-PCR） | 第17-20页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第17-18页 |
| ·细胞总 RNA 定量及电泳鉴定 | 第18页 |
| ·逆转录合成 cDNA 第一链 | 第18页 |
| ·PCR 反应 | 第18-20页 |
| ·薄层层析法测定 SMS 活性 | 第20页 |
| ·N-SMase 活性测定 | 第20-21页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第20页 |
| ·细胞总蛋白定量 | 第20-21页 |
| ·N-SMase 活性测定 | 第21页 |
| ·高内涵活细胞成像系统测线粒体膜电位 | 第21页 |
| ·Western blotting 检测凋亡相关蛋白 | 第21-23页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第21-22页 |
| ·转膜和封闭 | 第22页 |
| ·免疫印记 | 第22-23页 |
| ·统计学分析 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-36页 |
| ·酒精对 PC12 细胞增殖的抑制作用 | 第24-25页 |
| ·Hoechst 33342/PI 染色观察 PC1 2 细胞凋亡形态学变化 | 第25页 |
| ·DNA 电泳检测凋亡细胞 DNA 梯状条带 | 第25-26页 |
| ·酒精对 PC12 细胞 SMS1、SMS2 和 N-SMase mRNA 表达的影响 | 第26-29页 |
| ·酒精对 PC12 细胞 SMS1 mRNA 的表达影响 | 第26-27页 |
| ·酒精对 PC12 细胞 SMS2 mRNA 表达的影响 | 第27-28页 |
| ·酒精对 PC12 细胞 N-SMase mRNA 表达的影响 | 第28-29页 |
| ·酒精对于 PC12 细胞总 SMS 活性的影响 | 第29-30页 |
| ·PC12 细胞中 N-SMase 酶活性在酒精处理后的变化 | 第30-31页 |
| ·酒精对 PC12 细胞线粒体膜电位的影响 | 第31-32页 |
| ·酒精对 PC12 细胞 Caspase-3，Caspase-9 蛋白表达的影响 | 第32-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 文献综述 | 第42-58页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
