中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一部分 文献综述 白细胞介素4的研究进展 | 第6-19页 |
1.白细胞介素家族简介 | 第7-8页 |
2.IL-4的产生、结构和功能 | 第8-10页 |
3.IL4-受体复合物和信号转导机制 | 第10-13页 |
4.IL-4与Th2型免疫 | 第13-15页 |
参考文献 | 第15-19页 |
第二部分 实验研究 鱼类白细胞介素4的基因克隆和表达分析 | 第19-49页 |
引言 | 第19-21页 |
第一章 河豚IL-4的基因预测和基因克隆 | 第21-36页 |
1.材料与方法 | 第21-25页 |
·实验材料和实验器材 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-25页 |
·基因预测 | 第21页 |
·基因克隆 | 第21-25页 |
·设计PCR引物 | 第21-22页 |
·头肾总RNA提取 | 第22页 |
·RT-PCR扩增 | 第22-24页 |
·电泳与回收 | 第24页 |
·T-A克隆 | 第24-25页 |
·多序列比对和系统进化树构建 | 第25页 |
2.结果与讨论 | 第25-36页 |
·基因预测 | 第25-27页 |
·基因克隆 | 第27-31页 |
·多序列比对和进化树构建 | 第31-36页 |
第二章 河豚IL-4的组织特异性表达 | 第36-40页 |
1.材料与方法 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-37页 |
·IL-4的组织特异性表达 | 第36-37页 |
·组织准备 | 第36页 |
·RNA提取和cDNA制备 | 第36-37页 |
·数据统计与分析 | 第37页 |
2.结果与讨论 | 第37-40页 |
·组织特异性分布和统计分析 | 第37-40页 |
第三章 河豚IL-4蛋白的毕赤酵母表达 | 第40-49页 |
1.材料与方法 | 第40-44页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-44页 |
·河豚IL-4毕赤酵母表达重组子的构建 | 第40-43页 |
·pPIC9k-IL4质粒构建 | 第40-41页 |
·毕赤酵母重组子的转化 | 第41-43页 |
·毕赤酵母重组子的筛选和鉴定 | 第43页 |
·毕赤酵母对河豚IL-4的表达 | 第43-44页 |
·重组毕赤酵母的诱导表达 | 第43页 |
·蛋白质凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-44页 |
2.结果与讨论 | 第44-49页 |
·pPIC9k-IL4质粒构建 | 第44-45页 |
·毕赤酵母重组子的筛选 | 第45-47页 |
·毕赤酵母表达IL-4蛋白 | 第47-49页 |
结语 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-58页 |
致谢 | 第58页 |