| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一部分 综述 | 第9-22页 |
| 一.骨髓间充质干细胞的多向分化潜能 | 第9-12页 |
| (一) 骨髓间充质干细胞的跨胚层分化潜能 | 第9页 |
| (二) 骨髓间充质干细胞向骨细胞分化的潜能 | 第9-12页 |
| 1.向软骨细胞分化 | 第10页 |
| 2.向成骨细胞分化 | 第10-11页 |
| 3.向破骨细胞分化 | 第11-12页 |
| 二.软骨细胞的生长发育过程 | 第12-19页 |
| (一) 软骨的结构及成分 | 第12-13页 |
| (二) 软骨细胞的分化发育过程 | 第13页 |
| (三) 软骨细胞分化发育的调控 | 第13-19页 |
| 1.细胞因子在软骨分化发育中的调控作用 | 第13-15页 |
| ·骨形态发生蛋白(BMP) | 第13-14页 |
| ·转移生长因子-β(TGF-β) | 第14页 |
| ·成纤维生长因子(FGF) | 第14-15页 |
| ·其他生长因子 | 第15页 |
| 2.转录因子对软骨生成的调节 | 第15-17页 |
| ·Sox家族对软骨生成的调节 | 第15-16页 |
| ·T-盒子(T-box)转录因子Brachyury对软骨生成的调节 | 第16页 |
| ·Runx-2对软骨细胞分化的调控 | 第16-17页 |
| 3.化学物质对软骨分化发育的作用 | 第17页 |
| 4.物理因素对软骨分化发育的影响 | 第17-19页 |
| ·三维支架 | 第17-18页 |
| ·机械用力 | 第18-19页 |
| 三.软骨工程的研究现状及医疗前景 | 第19-22页 |
| 1.胚胎干细胞 | 第19-20页 |
| 2.骨髓间充质干细胞 | 第20-21页 |
| 3.脂肪干细胞 | 第21-22页 |
| 第二部分 实验研究 | 第22-45页 |
| 第一章 HDAC抑制剂诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究 | 第22-38页 |
| 一.引言 | 第22-23页 |
| 二.材料和方法 | 第23-29页 |
| 1.材料和试剂 | 第23-24页 |
| (1) 实验动物 | 第23页 |
| (2) 培养试剂 | 第23页 |
| (3) 检测试剂 | 第23页 |
| (4) 实验仪器 | 第23页 |
| (5) 引物序列 | 第23-24页 |
| 2.实验方法 | 第24-29页 |
| ·骨髓间充质干细胞细胞的分离及培养 | 第24页 |
| ·细胞活性测定 | 第24-25页 |
| ·软骨细胞分化诱导方法 | 第25页 |
| ·分化细胞的鉴定 | 第25-29页 |
| ·形态学鉴定 | 第25页 |
| ·结构染色鉴定 | 第25-26页 |
| ·HE染色 | 第25-26页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第26页 |
| ·免疫细胞化学 | 第26-27页 |
| ·基因检测 | 第27-29页 |
| ·细胞总RNA抽提 | 第27-28页 |
| ·RNA含量测定 | 第28页 |
| ·RNA电泳 | 第28页 |
| ·RT-PCR反应 | 第28-29页 |
| ·PCR反应 | 第29页 |
| ·结果观察 | 第29页 |
| 三.实验结果 | 第29-36页 |
| 1.不同VPA浓度对骨髓间充质干细胞活性和分化的影响 | 第29-30页 |
| 2.VPA诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化 | 第30-36页 |
| ·光镜细胞形态观察 | 第30-31页 |
| ·软骨样细胞核质及蛋白多糖的染色 | 第31-33页 |
| ·HE染色 | 第31-32页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第32-33页 |
| ·软骨样细胞基因表达分析 | 第33-34页 |
| ·软骨样细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达 | 第34-36页 |
| 四.讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 HDAC抑制剂诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化机制的初步研究 | 第38-45页 |
| 一.前言 | 第38页 |
| 二.实验材料及方法 | 第38-39页 |
| 1.实验材料 | 第38页 |
| 2.实验方法 | 第38-39页 |
| ·诱导方法 | 第38页 |
| ·细胞形态观察 | 第38-39页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第39页 |
| ·基因表达分析 | 第39页 |
| ·细胞周期分析 | 第39页 |
| 三.实验结果 | 第39-43页 |
| 1.不同诱导剂对MSCs向软骨细胞分化的诱导效果 | 第39-42页 |
| ·细胞形态观察 | 第39-40页 |
| ·甲苯胺蓝染色 | 第40-41页 |
| ·基因表达分析 | 第41-42页 |
| 2.VPA对细胞周期的影响 | 第42-43页 |
| 四.讨论 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
