中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
第一章 基因表达和酵母表达系统 | 第9-24页 |
1.1 基因表达 | 第9-15页 |
1.1.1 基因工程的诞生 | 第9页 |
1.1.2 基因工程的定义 | 第9页 |
1.1.3 基因工程的内容和步骤 | 第9-10页 |
1.1.4 基因工程菌的质粒稳定性 | 第10-12页 |
1.1.5 影响外源基因表达的因素 | 第12-13页 |
1.1.6 基因工程的应用 | 第13-15页 |
1.2 酵母基因表达系统 | 第15-22页 |
1.2.1 酵母基因表达系统的概况 | 第15页 |
1.2.2 酵母表达系统中载体的种类 | 第15-16页 |
1.2.3 酵母载体的基本结构 | 第16-17页 |
1.2.4 酵母菌基因表达系统的宿主 | 第17-19页 |
1.2.5 酵母高表达外源基因 | 第19-21页 |
1.2.6 提高表达外源产物的质量 | 第21页 |
1.2.7 酵母表达系统的应用 | 第21-22页 |
1.3 α-淀粉酶的性质和应用及研究进展 | 第22-24页 |
1.3.1 α-淀粉酶的性质和应用 | 第22页 |
1.3.2 产α-淀粉酶的基因工程菌研究进展 | 第22-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-31页 |
2.1 酵母和质粒 | 第24页 |
2.2 培养基 | 第24-25页 |
2.3 仪器和试剂 | 第25-26页 |
2.3.1 化学和生物试剂 | 第25页 |
2.3.2 实验仪器 | 第25-26页 |
2.4 培养方法 | 第26-27页 |
2.5 分析方法 | 第27-31页 |
2.5.1 葡萄糖浓度测定 | 第27页 |
2.5.2 质粒稳定性测定 | 第27-28页 |
2.5.3 小鼠α-淀粉酶活力测定 | 第28-30页 |
2.5.4 菌体密度测定 | 第30页 |
2.5.5 pH值测定 | 第30页 |
2.5.6 溶氧测定 | 第30-31页 |
第三章 重组酵母质粒稳定性及生产外源α-淀粉酶发酵条件的初步研究 | 第31-42页 |
3.1 重组酵母质粒稳定性考察及测定方法选择 | 第31-33页 |
3.2 选择性压力对稳定质粒的效果 | 第33-36页 |
3.3 摇瓶分批培养中的培养基组成优化 | 第36-38页 |
3.4 诱导阶段培养条件对外源基因表达水平的影响 | 第38-42页 |
3.4.1 诱导阶段温度的影响 | 第38-39页 |
3.4.2 诱导阶段溶氧的影响 | 第39-40页 |
3.4.3 诱导阶段pH的影响 | 第40-42页 |
第四章 发酵培养策略对重组质粒稳定性的影响 | 第42-49页 |
4.1 培养过程中质粒不稳定性分析 | 第42-47页 |
4.1.1 菌体增殖和诱导生产分开的两阶段培养过程 | 第42-44页 |
4.1.2 诱导生长期恒流量流加营养物的培养过程 | 第44页 |
4.1.3 营养物震荡稳定质粒的效果 | 第44-47页 |
4.2 营养物震荡高密度培养 | 第47-49页 |
第五章 重组酵母发酵动力学研究 | 第49-57页 |
5.1 重组酵母发酵过程的特点 | 第49页 |
5.2 动力学研究的重要性 | 第49-50页 |
5.3 重组酵母生长动力学的描述方法和分类 | 第50-51页 |
5.4 酵母工程菌S.cerevisiae 20B-12(pNA3)的发酵动力学模拟 | 第51-57页 |
5.4.1 模型的建立 | 第51-53页 |
5.4.2 重组酵母发酵动力学参数估计 | 第53-56页 |
5.4.3 重组酵母发酵动力学模拟 | 第56-57页 |
第六章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
附录1 | 第63-64页 |
附录2 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |