| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-32页 |
| ·病毒的分类 | 第13-14页 |
| ·病毒的命名 | 第13页 |
| ·疱疹病毒和α-疱疹病毒 | 第13-14页 |
| ·PRV的分子生物学 | 第14-23页 |
| ·病毒粒子的结构 | 第14页 |
| ·基因组和基因产物 | 第14-15页 |
| ·衣壳蛋白 | 第15-16页 |
| ·间质蛋白 | 第16页 |
| ·囊膜蛋白 | 第16-19页 |
| ·在PRV感染过程中宿主转录的改变 | 第19-20页 |
| ·在潜伏期的基因表达 | 第20页 |
| ·DNA复制 | 第20-21页 |
| ·核酸代谢 | 第21-22页 |
| ·衣壳的形成 | 第22-23页 |
| ·环氧化酶和衣壳装配 | 第23页 |
| ·DNA衣壳化 | 第23页 |
| ·PRV作为一种模式病毒 | 第23-24页 |
| ·伪狂犬病对家畜的影响 | 第24-28页 |
| ·历史上的发现 | 第24页 |
| ·在非自然宿主中伪狂犬病感染的致死性 | 第24页 |
| ·PRV对猪的急性感染 | 第24-25页 |
| ·PRV在猪体内的潜伏 | 第25-26页 |
| ·修饰的活疫苗 | 第26-27页 |
| ·DNA疫苗 | 第27页 |
| ·PRV的诊断试验 | 第27-28页 |
| ·伪狂犬病的世界分布 | 第28页 |
| ·哺乳动物双杂交的研究进展 | 第28-30页 |
| ·哺乳动物双杂交的原理 | 第28页 |
| ·杂交新的发展 | 第28-29页 |
| ·杂交技术新的应用 | 第29-30页 |
| ·杆状病毒简介 | 第30-32页 |
| ·杆状病毒表达系统的研究 | 第30页 |
| ·杆状病毒作为哺乳动物细胞表达载体的研究 | 第30-32页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 第3章 材料与方法 | 第33-51页 |
| ·实验材料 | 第33-40页 |
| ·病毒、细胞和菌株 | 第33页 |
| ·载体与质粒 | 第33-36页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第36-37页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第37-38页 |
| ·缓冲液 | 第38-40页 |
| ·实验方法 | 第40-51页 |
| ·PRV的增殖 | 第40页 |
| ·PRV基因组DNA提取 | 第40页 |
| ·PRV衣壳基因的PCR扩增 | 第40-42页 |
| ·PCR或酶切产物的回收与纯化 | 第42页 |
| ·线性质粒DNA末端去磷酸化 | 第42页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第42-43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第43页 |
| ·连接产物的转化 | 第43页 |
| ·质粒的小量制备 | 第43-44页 |
| ·质粒的大量制备 | 第44页 |
| ·质粒DNA的定量 | 第44-45页 |
| ·重组质粒(阳性质粒)的鉴定 | 第45页 |
| ·诱导表达 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第45页 |
| ·Western blotting | 第45-46页 |
| ·脂质体介导的共转染 | 第46页 |
| ·双荧光素酶检测转染基因的相互基因 | 第46-47页 |
| ·统计方法 | 第47页 |
| ·GST Pull-Down | 第47-48页 |
| ·免疫共沉淀 | 第48-49页 |
| ·重组杆状病毒的构建流程 | 第49-51页 |
| 第4章 结果与分析 | 第51-77页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白基因的克隆与序列分析 | 第51-55页 |
| ·PRV Ea株UL19基因的克隆与序列分析 | 第51-52页 |
| ·PRV Ea株UL6基因的克隆与序列分析 | 第52页 |
| ·PRV Ea株UL18基因的克隆与序列分析 | 第52-53页 |
| ·PRV Ea株UL25基因的克隆与序列分析 | 第53页 |
| ·PRV Ea株UL26基因的克隆与序列分析 | 第53-54页 |
| ·PRV Ea株UL26.5基因的克隆与序列分析 | 第54页 |
| ·PRV Ea株UL35基因的克隆与序列分析 | 第54-55页 |
| ·PRV Ea株UL38基因的克隆与序列分析 | 第55页 |
| ·PRV Ea株主要衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达与检测 | 第55-61页 |
| ·PRV Ea株主要衣壳蛋白原核表达质粒的构建 | 第55-57页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达与检测 | 第57-61页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白在HeLa细胞中的表达与定位分析 | 第61-65页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白真核表达质粒的构建 | 第61-64页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白真核表达质粒在HeLa细胞中的表达 | 第64-65页 |
| ·哺乳动物双杂交检测PRV Ea株衣壳蛋白的相互作用 | 第65-72页 |
| ·哺乳动物双杂交表达质粒的构建 | 第65-71页 |
| ·哺乳动物双杂交表达质粒转染细胞后双荧光检测 | 第71-72页 |
| ·GST Pull-Down验证衣壳蛋白UL19与UL26.5之间的相互作用 | 第72-75页 |
| ·原核表达质粒pGEX-UL26.5的构建与鉴定 | 第72-73页 |
| ·UL26.5基因在大肠杆菌中的表达 | 第73页 |
| ·转作质粒pFastBac HT-UL19与重组杆状病毒rBacmid-UL19的构建 | 第73-74页 |
| ·重组杆状病毒rBacUL19表达产物的SDS-PAGE检测 | 第74页 |
| ·UL26.5与UL19相互作用的检测 | 第74-75页 |
| ·免疫共沉淀验证衣壳蛋白之间的相互作用 | 第75-77页 |
| ·哺乳动物表达质粒的构建 | 第75页 |
| ·免疫共沉淀 | 第75-77页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第77-80页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·PRV Ea株主要衣壳蛋白基因的克隆 | 第77-78页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白基因的表达以及在HeLa细胞中的定位 | 第78页 |
| ·伪狂犬病毒衣壳的装配 | 第78页 |
| ·哺乳动物双杂交体系的选择 | 第78-79页 |
| ·PRV Ea株衣壳蛋白的相互作用 | 第79页 |
| ·结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
