摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
前言 | 第7-9页 |
第一章 综述 | 第9-19页 |
第一节 大肠杆菌二硫键氧化还原酶 | 第9-14页 |
·周质空间氧化性的维持:DsbA 和DsbB | 第9-11页 |
·二硫键异构酶途径:DsbC 和DsbG | 第11-12页 |
·二硫键异构酶还原性的维持:DsbD | 第12-13页 |
·特化的二硫键氧化还原酶:CcmG/DsbE 和CcmH | 第13-14页 |
第二节 细胞色素C形成途径 | 第14-19页 |
·系统Ⅰ途径 | 第15-17页 |
·系统Ⅱ途径 | 第17页 |
·系统Ⅲ途径 | 第17-19页 |
第二章 CCMH 拓扑结构研究 | 第19-33页 |
·实验方法 | 第20-24页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·主要溶液和试剂的配置 | 第21页 |
·CcmH 定点突变 | 第21-23页 |
·定点突变CcmH 的表达和原位标记 | 第23-24页 |
·Western Blot 检测标记结果 | 第24页 |
·结果和讨论 | 第24-32页 |
·CcmH 氧化还原结构域位于周质空间 | 第24-26页 |
·CcmH 羧基端也位于周质空间 | 第26-27页 |
·CcmH 含有五个跨膜区 | 第27-32页 |
·小结 | 第32-33页 |
第三章CCMH 氧化还原结构域氧化还原电位的确定 | 第33-41页 |
·材料和方法 | 第33-36页 |
·试剂准备 | 第33页 |
·CcmH19-99 134W 克隆,表达和纯化 | 第33-34页 |
·氧化还原反应 | 第34-35页 |
·测定荧光发射值Fobs | 第35页 |
·氧化还原电位的计算 | 第35-36页 |
·结果和讨论 | 第36-40页 |
·CcmH19-99 pET-226(+)克隆 | 第36页 |
·CcmH19-99 134W pET-226(+)克隆 | 第36-37页 |
·CcmH19-99 134W 的表达和纯化 | 第37-38页 |
·CcmH19-99 134W 氧化态和还原态的荧光差异 | 第38-39页 |
·氧化还原电位的确定 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
附录一 测序图谱 | 第49-50页 |
附录二 载体图谱 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
详细摘要 | 第53-54页 |