| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 一.前言 | 第11-17页 |
| 1 丙酮酸脱氢酶的研究进展 | 第11-15页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体的概述 | 第11-14页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体的组成及分布 | 第12页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体的催化机理 | 第12-13页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体的调控 | 第13-14页 |
| ·丙酮酸脱氢酶的结构组成 | 第14-15页 |
| ·丙酮酸脱氢酶的特性 | 第15页 |
| 2 丙酮酸脱氢酶系活性测定方法现状 | 第15-16页 |
| 3 丙酮酸脱氢酶测活方法研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 二.材料和方法 | 第17-23页 |
| 1 试剂及仪器 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·溶液的配置 | 第17页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-23页 |
| ·酶的制备或预处理 | 第18页 |
| ·酶的预处理 | 第18页 |
| ·粗酶液的制备 | 第18页 |
| ·活性测定 | 第18-21页 |
| ·测定丙酮酸脱氢酶复合体活性的方法 | 第19页 |
| ·测定丙酮酸脱氢酶复合体中E1活性的方法 | 第19-21页 |
| ·两种主要方法标准曲线的制作 | 第21-22页 |
| ·新方法标准曲线的制作 | 第21-22页 |
| ·2,6-DCPIP标准曲线的制作 | 第22页 |
| ·重要影响因子β-巯基乙醇对新方法和2,6-DCPIP两种方法的影响测定 | 第22-23页 |
| 三.结果与分析 | 第23-34页 |
| 1 标准曲线 | 第23-24页 |
| ·MTT的被还原的量与566nm吸光度之间的线性关系 | 第23-24页 |
| ·DCPIP的量与600nm吸光度间的线性关系 | 第24页 |
| 2.测定猪心丙酮酸脱氢酶复合体活性的结果 | 第24-26页 |
| ·利用辅酶A的标准NADH法 | 第24-25页 |
| ·碘硝基四唑紫法 | 第25-26页 |
| 3 测定乳酸菌PDH和猪心PDHc中PDH活性的结果 | 第26-29页 |
| ·2,6-DCPIP法测定乳酸菌PDH和猪心PDHc中PDH活性的结果 | 第26-28页 |
| ·铁氰化钾法测定乳酸菌PDH和猪心PDHc中PDH活性的结果 | 第28页 |
| ·新方法测定乳酸菌PDH和猪心PDHc中PDH活性的结果 | 第28-29页 |
| 4 结果比较 | 第29-31页 |
| ·用新方法和2,6-DCPIP两种方法测定乳酸菌PDH活性的结果 | 第29-30页 |
| ·用新方法和2,6-DCPIP两种方法测定猪心PDHc中PDH的活性结果 | 第30-31页 |
| 5 新方法测定粗酶液的结果 | 第31-33页 |
| ·新方法测定豌豆线粒体丙酮酸脱氢酶粗酶液的结果 | 第31-32页 |
| ·新方法测定大肠杆菌丙酮酸脱氢酶粗酶液的结果 | 第32-33页 |
| 6 重要影响因子β-巯基乙醇对两种方法的影响比较结果 | 第33-34页 |
| 四.讨论 | 第34-39页 |
| 1 酶活力及其测定 | 第34页 |
| 2 原有方法的缺点或局限性 | 第34-36页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体活性测定方法 | 第34-35页 |
| ·通过测定产物的增加反映丙酮酸脱氢酶复合体活性的方法 | 第34-35页 |
| ·通过测定底物减少反映丙酮酸脱氢酶复合体活性的方法 | 第35页 |
| ·丙酮酸脱氢酶活性测定方法 | 第35-36页 |
| 3 新方法 | 第36-39页 |
| ·新方法的可行性 | 第36-37页 |
| ·新方法的优点 | 第37-38页 |
| ·稳定性好 | 第37页 |
| ·灵敏度高 | 第37-38页 |
| ·试剂经济 | 第38页 |
| ·适用性广 | 第38页 |
| ·新方法的不足 | 第38-39页 |
| 五.小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录一 | 第44-45页 |
| 附录二 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
