摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 综述 | 第10-27页 |
1 禾本科牧草的组培再生的研究进展 | 第13-16页 |
·影响禾本科牧草再生的因素 | 第13-16页 |
·植物激素对牧草愈伤组织分化的影晌 | 第14-15页 |
·受体材料和外植体来源对牧草愈伤组织再生的影响 | 第15页 |
·继代培养时间对牧草愈伤组织分化能力的影晌 | 第15-16页 |
·其他因素对牧草愈伤组织诱导和再生的影响 | 第16页 |
2 禾本科牧草遗传转化的方法 | 第16-22页 |
·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第16-17页 |
·通过原生质体的遗传转化 | 第17页 |
·脂质体介导转化法 | 第17页 |
·电击穿孔转化法 | 第17-19页 |
·PEG介导转化法 | 第19页 |
·农杆菌共培养转化法 | 第19-20页 |
·基因直接转入组织细胞 | 第20-22页 |
·巨量注射法 | 第20-21页 |
·显微注射法 | 第21页 |
·基因枪法 | 第21-22页 |
·花粉管通道法介导的DNA转化 | 第22页 |
3 影响禾本科牧草的遗传转化的因素 | 第22-25页 |
·农杆菌菌株 | 第23-24页 |
·乙酰丁香酮 | 第24页 |
·单糖 | 第24页 |
·甜菜碱 | 第24页 |
·钙离子 | 第24-25页 |
·共培养时间 | 第25页 |
·渗透处理 | 第25页 |
·外植体的类型和生理状态 | 第25页 |
4 转化细胞的选择培养和高频再生 | 第25-27页 |
·转化细胞的选择 | 第25-26页 |
·高效转化受体的再生 | 第26-27页 |
第二章 披碱草高效再生体系的建立 | 第27-36页 |
一 材料与方法 | 第27-28页 |
·试验材料 | 第27-28页 |
·植物材料 | 第27页 |
·仪器和设备 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28页 |
·外植体的准备 | 第28页 |
·选择诱导培养基 | 第28页 |
·继代培养愈伤组织 | 第28页 |
·选择生根培养基 | 第28页 |
二 结果与分析 | 第28-32页 |
·愈伤组织的诱导 | 第28-30页 |
·愈伤组织的继代培养 | 第30-31页 |
·胚性愈伤组织的分化和再生 | 第31-32页 |
三 讨论 | 第32-36页 |
·愈伤组织诱导中的影响因素 | 第32-33页 |
·植物生长调节剂对披碱草愈伤组织诱导的影响 | 第32-33页 |
·基本培养基对披碱草愈伤组织诱导的影响 | 第33页 |
·继代培养中的影响因素 | 第33-36页 |
第三章 燕麦再生体系的建立 | 第36-42页 |
1. 材料和方法 | 第36-38页 |
·材料 | 第36页 |
·植物材料 | 第36页 |
·仪器和设备 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-38页 |
·外植体培养 | 第36-38页 |
·愈伤组织诱导培养基的筛选 | 第36-38页 |
·愈伤组织分化培养基的筛选 | 第38页 |
3 结果 | 第38-42页 |
·诱导愈伤组织的基本培养基和外植体的筛选 | 第38-39页 |
·不同激素浓度对燕麦出愈和分化的影响 | 第39-40页 |
·不同培养基和继代时间对愈伤组织分化的影响 | 第40-42页 |
第四章 根癌农杆菌介导燕麦愈伤组织遗传转化体系的建立 | 第42-57页 |
1. 材料和方法 | 第42-52页 |
·材料 | 第42-45页 |
·菌株和质粒 | 第42页 |
·菌株、质粒和工具酶 | 第42-43页 |
·自配的主要标准试剂 | 第43-44页 |
·培养基 | 第44-45页 |
·大肠杆菌用培养基 | 第44-45页 |
·农杆菌培养基(YEB) | 第45页 |
·根癌农杆菌遗传转化培养基 | 第45页 |
·根癌农杆菌介导燕麦愈伤组织遗传转化体系的建立 | 第45-49页 |
·质粒DNA的制备 | 第45-47页 |
·农杆菌介导的植物表达载体转化燕麦 | 第47-49页 |
·农杆菌的培养 | 第47-48页 |
·潮霉素(Hn)有效筛选浓度的试验 | 第48页 |
·愈伤组织生理状态与农杆菌侵染 | 第48页 |
·农杆菌处理菌液浓度与其侵染 | 第48页 |
·共培养温度与农杆菌侵染 | 第48页 |
·不同预培养和共培养培养基与农杆菌侵染 | 第48-49页 |
·转化植物的分子检测 | 第49-52页 |
·植物DNA抽提 | 第49-50页 |
·SDS小量法抽提植物总DNA | 第49页 |
·CTAB法大量抽提植物总DNA | 第49-50页 |
·转化植株的PCR分析 | 第50-51页 |
·转基因植株的RT-PCR分析 | 第51-52页 |
2 结果 | 第52-57页 |
·共培养温度和共培养时间对转化的影响 | 第52-53页 |
·最佳潮霉素处理浓度的选择 | 第53页 |
·最适农杆菌处理菌液浓度的选择 | 第53-54页 |
·转化植物的分子检测 | 第54-57页 |
·转化植株的DNA抽提 | 第54页 |
·转基因植株的PCR鉴定 | 第54页 |
·转基因植株的RT-PCR分析 | 第54-57页 |
参考文献 | 第57-70页 |
在读期间发表和即将发表的论文 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |