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树鼩和猕猴精子冷冻保存工艺的创建和优化的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
插图和附表清单第12-13页
缩略词第13-14页
第一章 绪论第14-23页
   ·树鼩生殖生物学的基础研究第14页
   ·猕猴生殖生物学的基础研究第14-15页
   ·精子冷冻保存技术第15-21页
     ·精子采集的方法第16页
       ·活体采精第16页
       ·附睾离体取精第16页
     ·冷冻前精液的预处理方法第16-17页
       ·精子的优选第16-17页
       ·预冷处理第17页
     ·冷冻液和防冻剂第17-18页
       ·冷冻稀释液的类型和作用第17页
       ·防冻剂的类型第17-18页
       ·防冻剂的加入与去除方式第18页
     ·冷冻与解冻方法第18-20页
       ·快速冷冻法第18-19页
       ·慢速冷冻法第19页
       ·玻璃化冷冻法第19页
       ·定向结冰精子冷冻法第19页
       ·干燥冷冻法第19-20页
     ·精液品质的评定第20-21页
       ·结构完整性检测第20页
       ·功能检测第20-21页
   ·本文研究的目的和意义第21-23页
第二章 卵黄浓度、冷冻降温速率和冷冻稀释液对树鼩精子冷冻的影响第23-40页
   ·引言第23-24页
   ·材料与方法第24-30页
     ·实验动物第24页
     ·实验器材第24-25页
     ·精子冷冻液和洗涤液的配制第25页
     ·精子采集第25-27页
     ·实验设计第27-29页
       ·实验一:卵黄对不同温度下树鼩精子储存的的保护作用第27页
       ·实验二:不同卵黄浓度对树鼩精子预冷处理的影响第27页
       ·实验三:比较不同卵黄浓度和降温速率对树鼩精子冷冻存活率的影响第27页
       ·实验四:不同冷冻降温平衡时间对树鼩精子冷冻存活率的影响第27-28页
       ·实验五:比较TTE和TEST对精子冷冻保存的影响第28页
       ·实验六:评估冷冻精子的受精能力第28-29页
     ·冷冻过程中降温速率的检测第29页
     ·精子功能检测第29-30页
       ·精子总数和运动度的检测第29页
       ·顶体完整率检测第29-30页
     ·统计分析第30页
   ·结果第30-37页
     ·实验一:卵黄对不同温度下精子储存时间的影响第30页
     ·实验二:不同卵黄浓度对精子预处理的影响第30-31页
     ·实验三:不同卵黄浓度和降温速率对精子冷冻的影响第31-35页
     ·实验四:不同冷冻降温平衡时间对树鼩精子冷冻存活率的影响第35页
     ·比较TTE和TEST对精子冷冻效果的影响第35-37页
     ·冷冻精子的受精能力第37页
   ·讨论第37-40页
第三章 渗透性防冻剂对树鼩精子冷冻保存的影响第40-49页
   ·引言第40页
   ·实验材料和方法第40-42页
     ·实验动物第40页
     ·实验器材第40页
     ·精子冷冻稀释液和洗涤液的配制第40-41页
     ·精子采集第41页
     ·实验设计第41-42页
       ·实验一:防冻剂的低温毒性实验第41页
       ·实验二:渗透性防冻剂对树鼩精子冷冻存活率的影响第41-42页
       ·实验三:评估冷冻精子的受精能力第42页
     ·精子功能检测第42页
       ·精子总数和运动度的检测第42页
       ·顶体完整率检测第42页
     ·统计分析第42页
   ·实验结果第42-46页
     ·实验一:防冻剂的毒性实验第42-43页
     ·实验二:渗透性防冻剂对树鼩精子冷冻存活率的影响第43-46页
     ·实验三:评估冷冻精子的受精能力第46页
   ·讨论第46-49页
第四章 树鼩精子的超微结构第49-60页
   ·引言第49页
   ·材料和方法第49-51页
     ·实验动物第49页
     ·实验器材第49-50页
     ·试剂第50页
     ·精子采集第50页
     ·精子冷冻与解冻第50页
     ·精子质量的评估第50-51页
     ·扫描电镜观察样品的处理第51页
     ·透射电镜观察样品的处理第51页
   ·实验结果第51-58页
     ·树鼩睾丸相关参数的测定和精液特性第51-52页
     ·正常树鼩精子的超微结构第52-55页
     ·冷冻/解冻后树鼩精子形态结构的变化第55-58页
   ·讨论第58-60页
第五章 乙二醇浓度、冷冻降温速率和平衡时间对猕猴精子冷冻存活率的影响第60-72页
   ·引言第60-61页
   ·材料与方法第61-65页
     ·实验动物第61页
     ·实验器材仪器设备及耗材第61页
     ·精子冷冻液和洗涤液及其配制第61页
     ·精液采集第61-62页
     ·精子功能性评价第62-63页
       ·精子运动度第62页
       ·顶体完整率第62-63页
       ·体外受精第63页
     ·精液冷冻及其实验设计第63-64页
       ·实验一:乙二醇浓度对猕猴精子冷冻存活率的影响第63-64页
       ·实验二:冷冻降温速率对猕猴精子冷冻存活率的影响第64页
       ·实验三:冷冻降温平衡时间对猕猴精子冷冻存活率的影响第64页
       ·实验四:比较EG和Gly冷冻精子的受精能力第64页
     ·统计分析第64-65页
   ·实验结果第65-70页
     ·实验一:乙二醇浓度对猕猴精子冷冻存活率的影响第65-67页
     ·实验二:降温速率对猕猴精子冷冻存活率的影响第67-68页
     ·实验三:冷冻降温平衡时间对精子冷冻保存的影响第68页
     ·实验四:比较EG和Gly冷冻精子的受精能力第68-70页
   ·讨论第70-72页
第六章 精浆对猕猴精子冷冻保存的影响第72-83页
   ·引言第72页
   ·实验材料和方法第72-75页
     ·实验动物第72页
     ·实验仪器第72页
     ·精子洗涤液和冷冻液及其配制第72-73页
     ·精液采集第73页
     ·精子功能性评价第73页
       ·精子密度和运动度第73页
       ·精子顶体完整率第73页
     ·实验设计第73-74页
       ·实验一:精浆对猕猴精子抗冷休克的影响第73-74页
       ·实验二:精浆对猕猴精子冷冻存活率的影响第74页
       ·实验三:耐冻猕猴精液中精浆对不耐冻精液中的冷冻保存的影响第74页
     ·统计分析第74-75页
   ·实验结果第75-80页
     ·实验一:精浆对猕猴精子抗冷休克的影响第75-76页
     ·实验二:精浆对猕猴精子冷冻存活率的影响第76-79页
     ·实验三:添加来自于耐冻猕猴精液中的精浆到不耐冻精液中的冷冻保护作用第79-80页
   ·讨论第80-83页
第七章 结论第83-86页
致谢第86-88页
参考文献第88-102页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第102页

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