| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一部分 植酸酶基因的克隆及其在Pichiapastoris中表达的研究 | 第11-63页 |
| 1.前言 | 第11-30页 |
| ·植酸及其特性 | 第11-17页 |
| ·植酸的发现 | 第11页 |
| ·植酸的应用 | 第11-12页 |
| ·植酸的结构 | 第12-13页 |
| ·植酸的理化特性 | 第13页 |
| ·植酸的分布 | 第13-14页 |
| ·植物性饲料原料中植酸磷占总磷的含量 | 第14-15页 |
| ·植酸的抗营养作用及对环境的影响 | 第15-17页 |
| ·植酸酶的来源、种类及其生物学特性 | 第17-27页 |
| ·植酸酶的来源 | 第17-18页 |
| ·植酸酶的种类 | 第18页 |
| ·植酸酶分子结构与空间构象 | 第18-19页 |
| ·植酸酶的特性 | 第19-20页 |
| ·植酸酶的作用 | 第20-23页 |
| ·植酸酶的作用机理 | 第23页 |
| ·植酸酶基因工程的研究进展 | 第23-27页 |
| ·植酸酶基因工程的一个新突破点 | 第27页 |
| ·本研究的主要目的及内容 | 第27-29页 |
| ·本研究采用的技术路线 | 第29-30页 |
| 2.材料与方法 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第30-34页 |
| ·方法 | 第34-43页 |
| 3.结果与分析 | 第43-59页 |
| ·米曲霉总DNA的提取 | 第43页 |
| ·植酸酶基因的PCR扩增及测序 | 第43-52页 |
| ·pPIC9K-phyA表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·pPIC9K-phyA转化Pichia pastoris及转化子的检测 | 第54-56页 |
| ·表达载体pPIC9K-phyA转化Pichia pastoris(GS115) | 第56页 |
| ·多拷贝转化子的筛选 | 第56-57页 |
| ·植酸酶基因的诱导表达 | 第57-58页 |
| ·酶活性测定 | 第58-59页 |
| 4.讨论 | 第59-63页 |
| 第二部分 植酸酶基因转化玉米的研究 | 第63-112页 |
| 1.前言 | 第63-70页 |
| ·粮食问题面临的严峻形势 | 第63-64页 |
| ·作物转基因育种的意义 | 第64-65页 |
| ·玉米转基因研究进展 | 第65-67页 |
| ·农杆菌介导玉米遗传转化问题与分析 | 第67-69页 |
| ·研究目的与内容 | 第69-70页 |
| 2.材料与方法 | 第70-84页 |
| ·材料 | 第70-76页 |
| ·方法 | 第76-84页 |
| 3.结果与分析 | 第84-105页 |
| ·引物的设计及植酸酶基因的克隆 | 第84-85页 |
| ·植物表达载体pCambia1301-35SN-phyA的构建 | 第85-87页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第87-88页 |
| ·农杆菌介导玉米遗传转化 | 第88-92页 |
| ·农杆菌介导玉米愈伤组织的转化 | 第92-105页 |
| 4.讨论与结论 | 第105-112页 |
| ·植酸酶基因 | 第105-106页 |
| ·遗传转化的受体系统 | 第106-107页 |
| ·农杆菌 | 第107-108页 |
| ·载体系统 | 第108页 |
| ·启动子 | 第108-109页 |
| ·选择标记 | 第109-110页 |
| ·抑菌性抗生素 | 第110页 |
| ·影响农杆菌转化的因素 | 第110页 |
| ·受体细胞的生理状态 | 第110页 |
| ·干燥处理 | 第110-111页 |
| ·抗性植株 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 致谢 | 第126页 |