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水稻条纹病毒(RSV)免疫检测试剂盒研制与应用

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
1 前言第11-35页
   ·、水稻条纹病毒(RSV)引起的水稻条纹叶枯病第11-20页
     ·水稻条纹叶枯病的症状及寄主第11-12页
     ·RSV的病原学第12-16页
       ·依赖RNA的RNA聚合酶第12页
       ·外壳蛋白、病害特异性蛋白功能分析第12-13页
       ·可能编码运动蛋白的基因片段第13页
       ·RSV编码的其它蛋白可能的功能分析第13-14页
       ·病毒基因组的复制与转录机制第14-15页
       ·病毒分子检测第15页
       ·RSV分子群体遗传学第15-16页
     ·RSV传播介体灰飞虱第16-19页
       ·灰飞虱的获毒能力第16页
       ·灰飞虱的传毒能力及其卵传第16-17页
       ·灰飞虱周年生活史第17页
       ·灰飞虱带毒率检测第17-19页
     ·水稻条纹叶枯病的流行第19页
     ·水稻条纹叶枯病的防治第19-20页
       ·治虫防病第19页
       ·抗病品种第19-20页
       ·基因工程第20页
   ·、单克隆抗体及植物病毒免疫学检测第20-32页
     ·单克隆抗体技术第21-24页
       ·杂交瘤技术的基本原理第21-23页
       ·杂交瘤技术的基本流程第23页
       ·单克隆抗体的制备第23-24页
       ·单克隆抗体和多克隆抗体的比较第24页
     ·单克隆抗体在植物病毒中的应用第24-29页
       ·病害诊断和检测第26页
       ·病毒分类与株系鉴定第26-27页
       ·病毒蛋白抗原结构分析第27-28页
       ·作为探针分析病毒基因产物的功能第28-29页
     ·植物病毒学中常用的免疫检测技术第29-32页
       ·沉淀法第29页
       ·酶联免疫吸附测定法(ELISA)第29-30页
       ·免疫印迹检测第30-31页
       ·免疫胶体金技术第31-32页
       ·免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)第32页
   ·、论文研究的目的意义及思路第32-35页
     ·论文研究目的意义第32-34页
     ·论文研究思路第34-35页
2 材料与方法第35-41页
   ·、常用缓冲液配方第35-36页
   ·、常用试剂第36页
     ·RSV单克隆抗体第36页
     ·羊抗鼠二抗第36页
     ·其他试剂第36页
   ·、RSV检测方法与条件优化第36-38页
     ·37℃条件下DIBA方法优化第37-38页
       ·样品稀释度第37页
       ·单抗浓度第37页
       ·二抗浓度第37页
       ·抗体孵育时间第37-38页
     ·酶标板间接ELISA实验步骤第38页
   ·、免疫检测试剂盒的研制第38-39页
     ·不同温度下实验条件优化第39页
     ·试剂盒的存放温度及有效期第39页
   ·、试剂盒的应用第39-41页
     ·灰飞虱亲和性群体筛选第39页
     ·灰飞虱携带和传递RSV的特性第39-40页
     ·试剂盒应用及田间病害流行预测第40-41页
       ·2003年江苏各地病害流行预测第40页
       ·2004年与2005年江苏各地病害流行预测第40-41页
3 结果与分析第41-64页
   ·、实验室条件DIBA法和酶标板间接ELISA法第41-46页
     ·DIBA实验方法及实验条件的优化第41-45页
       ·样品稀释度第41页
       ·单抗工作浓度第41-42页
       ·二抗工作浓度第42-43页
       ·抗体孵育时间第43-44页
       ·37℃条件下灰飞虱体内RSV检测步骤(试剂盒说明书)第44-45页
     ·RSV酶标板间接ELISA法检测第45-46页
   ·、25℃(非实验室)条件下DIBA法条件优化及试剂盒研制第46-50页
     ·不同温度下抗体孵育时间第46-47页
     ·试剂盒有效期第47-49页
     ·25℃(非实验室)条件下灰飞虱体内RSV检测步骤(试剂盒说明书)第49-50页
     ·25℃(非实验室)条件下植物组织中RSV检测步骤(试剂盒说明书)第50页
   ·、免疫检测试剂盒的应用第50-64页
     ·灰飞虱亲和性群体筛选第51-54页
       ·温室内灰飞虱饲养规则第51页
       ·亲和性群体筛选过程第51页
       ·灰飞虱无毒家系及高带毒亲和性家系第51-52页
       ·不同带毒能力灰飞虱在自然种群中的分布第52-53页
       ·亲和性群体在总群体及带毒群体中所占的比例第53-54页
     ·灰飞虱携带和传递RSV特性第54-59页
       ·不同地区灰飞虱的带毒率比较第54页
       ·不同发病田块灰飞虱的带毒率比较第54-55页
       ·不同世代灰飞虱的带毒率比较第55-56页
       ·不同龄次灰飞虱的带毒浓度比较第56-57页
       ·灰飞虱卵传特性第57-59页
     ·灰飞虱带毒率与病害流行预测第59-64页
       ·2003年江苏省病害流行预测第59-61页
       ·2004年江苏省病害流行预测第61-62页
       ·2005年各地病害流行预测第62-64页
4 讨论第64-70页
   ·、DIBA法与酶标板间接ELISA法第64-67页
     ·DIBA法与酶标板间接ELISA法比较第64-65页
     ·实验过程中应该注意的问题第65-67页
   ·、试剂盒研制第67-68页
     ·试剂盒的使用方法第67页
     ·试剂盒适用对象第67页
     ·试剂盒研究的意义与价值第67-68页
   ·、试剂盒应用第68-70页
     ·灰飞虱亲和性群体筛选第68页
     ·灰飞虱带毒特性第68-69页
       ·灰飞虱与水稻条纹病毒亲和性互作关系第68页
       ·灰飞虱携带和传递RSV特性对病害流行的影响第68-69页
     ·灰飞虱带毒率与病害流行预测第69-70页
参考文献第70-78页
附录第78-79页
致谢第79页

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