| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-44页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第12-27页 |
| 1 猪瘟的研究进展 | 第12-18页 |
| ·猪瘟概述 | 第12-13页 |
| ·猪瘟的流行和分布 | 第13-14页 |
| ·猪瘟的临床症状和致病机理 | 第14-16页 |
| ·猪瘟的诊断 | 第16-17页 |
| ·猪瘟的防治 | 第17-18页 |
| ·猪瘟的传统疫苗 | 第18页 |
| 2 猪瘟病毒的病原学特征及研究进展 | 第18-21页 |
| ·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第18-19页 |
| ·猪瘟病毒的基因组结构及研究进展 | 第19-21页 |
| 3 猪瘟病毒的增殖及细胞培养 | 第21-27页 |
| ·CSFV 的入侵及增殖 | 第21-22页 |
| ·猪瘟病毒对宿主细胞的致病机理 | 第22-23页 |
| ·猪瘟病毒的细胞培养 | 第23-27页 |
| 第二章 瘟病毒蛋白结构和功能的研究进展 | 第27-34页 |
| 1 结构蛋白的结构和功能 | 第27-29页 |
| ·核衣壳蛋白C | 第27页 |
| ·Erns | 第27-28页 |
| ·囊膜糖蛋白E1 | 第28页 |
| ·囊膜糖蛋白E2 | 第28-29页 |
| 2 非结构蛋白的结构和功能 | 第29-33页 |
| ·Npro 蛋白 | 第29-30页 |
| ·p7 蛋白 | 第30-31页 |
| ·NS2-3、NS2 和NS3 蛋白 | 第31-32页 |
| ·NS4A 和NS4B 蛋白 | 第32页 |
| ·NS5A 蛋白 | 第32页 |
| ·NS5B 蛋白 | 第32-33页 |
| 3 小结和展望 | 第33-34页 |
| 第三章 猪瘟标记疫苗的研究进展 | 第34-39页 |
| 1 猪瘟疫苗研究的历史回顾 | 第34页 |
| 2 猪瘟标记疫苗研制的意义 | 第34-35页 |
| 3 猪瘟标记疫苗的研究 | 第35-39页 |
| ·猪瘟亚单位标记疫苗的研究 | 第35-37页 |
| ·亚单位疫苗的研究 | 第35-36页 |
| ·猪瘟E2 亚单位疫苗的研究 | 第36-37页 |
| ·猪瘟重组标记疫苗的研究 | 第37-39页 |
| 第四章 动物致病性正链RNA 病毒逆向遗传学研究进展 | 第39-44页 |
| 1 研究动物正链RNA 病毒感染性cDNA 的意义 | 第39页 |
| 2 逆向遗传学研究的理想系统及影响cDNA 感染性的因素 | 第39-41页 |
| ·构建感染性cDNA 的理想系统 | 第39页 |
| ·影响感染性的因素 | 第39-41页 |
| ·非完整基因组与完整基因组的比例 | 第39-40页 |
| ·扩增和克隆增殖过程中的突变 | 第40页 |
| ·基因组5’末端碱基冗余或缺失 | 第40页 |
| ·基因组3’末端碱基冗余 | 第40-41页 |
| ·基因组中帽子结构 | 第41页 |
| 3 动物正链RNA 病毒基因组克隆应用概况 | 第41-44页 |
| ·进一步揭示病毒的分子特征 | 第41-42页 |
| ·研究新型疫苗 | 第42页 |
| ·开发新的基因工程载体 | 第42页 |
| ·研究重构病毒可以代替实验动物模型 | 第42页 |
| 4 小结 | 第42-44页 |
| 试验研究 | 第44-65页 |
| 第五章 猪瘟病毒C-株兔脾毒在SK-6 细胞中的增殖培养及其鉴定 | 第44-49页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·种毒 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·病毒的提取 | 第44-45页 |
| ·SK-6 细胞的复苏和培养 | 第45页 |
| ·细胞接毒和样品采集 | 第45页 |
| ·病毒的检测 | 第45-46页 |
| ·毒抗原的直接荧光抗体检测 | 第45页 |
| ·病毒抗原的夹心ELISA 检测 | 第45页 |
| ·病毒RNA 的RT-PCR 检测 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-47页 |
| ·直接荧光抗体染色结果 | 第46页 |
| ·病毒抗原的夹心ELISA 检测结果 | 第46-47页 |
| ·病毒RNA 的RT-PCR 检测结果 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第六章 猪瘟病毒C-株(脾淋毒)全长CDNA 分子几个突变位点的重组改造 | 第49-58页 |
| 1 材料与方法 | 第49页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·待改造CSFV C-株(脾淋毒) | 第49-50页 |
| ·试剂与引物 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·RT-PCR 及3 个待替换cDNA 片段的亚克隆 | 第50页 |
| ·全长cDNA 的改造 | 第50-51页 |
| ·5’半长cDNA 中F1 片段的替换改造 | 第50-51页 |
| ·5’半长(NF1)中F3 片段的替换改造 | 第51页 |
| ·3’半长cDNA 中F51 片段的替换改造 | 第51页 |
| ·全长cDNA 的重新连接 | 第51页 |
| ·感染性的初步鉴定 | 第51-52页 |
| ·模板DNA 的线性化 | 第51页 |
| ·体外转录及纯化处理 | 第51页 |
| ·转录产物的电泳鉴定 | 第51页 |
| ·转染SK-6 细胞 | 第51页 |
| ·病毒抗原和核酸序列的鉴定 | 第51-52页 |
| 2 结果 | 第52页 |
| ·cDNA 合成及PCR | 第52页 |
| ·PCR 产物的克隆及序列测定 | 第52-53页 |
| ·全长cDNA 的改造及鉴定 | 第53-55页 |
| ·5’半长cDNA 和3’半长cDNA 的改造 | 第53-55页 |
| ·全长cDNA 的重新连接和鉴定 | 第55页 |
| ·感染性的鉴定 | 第55-56页 |
| ·病毒抗原的夹心ELISA 检测结果 | 第55-56页 |
| ·病毒RNA 的RT-PCR 检测结果 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 第七章 猪瘟病毒C-株重组标记疫苗的构建 | 第58-65页 |
| 1 材料与方法 | 第58页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·重组质粒 | 第58页 |
| ·试剂与引物 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·GP5 基因的插入和pGEM-5zf(+)/NFL/GP5 克隆的构建 | 第58-60页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5 基因的PCR 扩增 | 第58-59页 |
| ·F11 和F12 的PCR 扩增 | 第59页 |
| ·pMD-18T/F1/GP5 重组质粒的构建及其阳性克隆的鉴定 | 第59页 |
| ·pGEM-5zf(+)/N5’/GP5 重组质粒的构建及其鉴定 | 第59-60页 |
| ·pGEM-5zf(+)/NFL/GP5 的构建及其鉴定 | 第60页 |
| ·重组病毒复制及病毒抗原的检测 | 第60页 |
| ·重组病毒核酸序列的RT-PCR 检测 | 第60页 |
| ·重组病毒猪瘟抗原的夹心ELISA 检测 | 第60页 |
| 2 结果 | 第60页 |
| ·GP5 基因的插入和全长pGEM-5zf(+)/NFL/GP5 克隆的构建 | 第60-62页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5 基因的PCR 扩增 | 第60-61页 |
| ·F11 和F12 的PCR 扩增 | 第61页 |
| ·pMD-18T/F1/GP5 重组质粒的构建及其阳性克隆的鉴定 | 第61-62页 |
| ·pGEM-5zf(+)/N5’/GP5 重组质粒的构建及其鉴定 | 第62页 |
| ·pGEM-5zf(+)/NFL/GP5 的构建及其鉴定 | 第62页 |
| ·重组病毒复制及病毒抗原的检测 | 第62-63页 |
| ·重组病毒核酸序列的RT-PCR 检测 | 第62-63页 |
| ·重组病毒猪瘟抗原的夹心ELISA 检测 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
