| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-31页 |
| ·水稻基因工程 | 第15-18页 |
| ·目的基因的构建 | 第15-16页 |
| ·水稻遗传转化中常用的选择标记基因 | 第16页 |
| ·水稻遗传转化方法 | 第16-18页 |
| ·PEG 介导的转化法 | 第16页 |
| ·花粉管通道法 | 第16页 |
| ·基因枪法 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第17-18页 |
| ·鉴定方法 | 第18页 |
| ·水稻抗病转基因研究 | 第18-21页 |
| ·抗水稻真菌性病害转基因 | 第18-19页 |
| ·抗水稻细菌性病害转基因 | 第19-20页 |
| ·水稻病毒性病害转基因 | 第20-21页 |
| ·抗水稻线虫病害转基因 | 第21页 |
| ·水稻抗虫转基因 | 第21-23页 |
| ·水稻抗除草剂转基因 | 第23-24页 |
| ·水稻抗逆转基因 | 第24页 |
| ·转基因的表达与沉默 | 第24-25页 |
| ·转基因水稻的遗传分析 | 第25-27页 |
| ·外源基因在同源染色体上同一位点的整合概率 | 第25-26页 |
| ·外源基因在作物基因组中的整合位置 | 第26页 |
| ·外源基因整合进细胞核基因组 | 第26页 |
| ·外源基因整合进细胞质基因组 | 第26页 |
| ·外源基因在转基因工程植株中的遗传特性 | 第26-27页 |
| ·本研究的立论依据和主要研究内容 | 第27-31页 |
| ·本研究的立论依据 | 第27-30页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-44页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·质粒 | 第31页 |
| ·供试的白叶枯菌系 | 第31页 |
| ·试剂及仪器 | 第31-32页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-44页 |
| ·杂交后代的培育 | 第32-33页 |
| ·水稻种子的发芽和催芽 | 第32页 |
| ·水稻杂交 | 第32-33页 |
| ·GUS 活性的组织化学染色 | 第33页 |
| ·X-Gluc 染色液配制 | 第33页 |
| ·染色方法 | 第33页 |
| ·除草剂 Basta 抗性检测 | 第33页 |
| ·转基因植株的白叶枯病抗性鉴定 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的抗虫性鉴定 | 第34页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第34-36页 |
| ·质粒 ＤＮＡ 的微量提取(煮沸法) | 第34页 |
| ·质粒 ＤＮＡ 的大量提取(碱裂解法) | 第34-36页 |
| ·水稻基因组总 ＤＮＡ 的提取(ＳＤＳ 法) | 第36-37页 |
| ·ＤＮＡ 提取缓冲液的配制 | 第36页 |
| ·总 ＤＮＡ 提取及纯化步骤 | 第36-37页 |
| ·ＰＣＲ 检测 | 第37-38页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·植物总 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·PCR 扩增反应的引物 | 第37页 |
| ·检测 Xa21 基因的 PCR 反应引物 | 第37页 |
| ·检测 cryIA(b)基因的 PCR 反应引物 | 第37页 |
| ·PCR 扩增反应的体系和条件 | 第37-38页 |
| ·电泳检测扩增结果 | 第38页 |
| ·转基因植株的 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交分析 | 第38-43页 |
| ·DNA 凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·转膜(采用 DNA 碱转移法) | 第39-40页 |
| ·探针的制备 | 第40-41页 |
| ·DNA 片段的提取 | 第40-41页 |
| ·Xa21 基因探针的制备 | 第40页 |
| ·cryIA(b)基因探针的制备 | 第40页 |
| ·电泳 | 第40页 |
| ·回收 DNA 片段 | 第40-41页 |
| ·准备模板 | 第41页 |
| ·探针合成反应 | 第41页 |
| ·杂交 | 第41-43页 |
| ·(预)杂交液溶液配制 | 第41-42页 |
| ·杂交步骤 | 第42-43页 |
| ·田间种植及性状考察 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-61页 |
| ·双抗转基因新品系的选育和 cryIA(b)基因及 Xa21 基因在转基因后代植株中的遗传分离规律 | 第44-46页 |
| ·cryIA(b)基因和 Xa21 基因在转基因水稻中的遗传稳定性 | 第46-56页 |
| ·水稻总 DNA 的提取 | 第46-47页 |
| ·PCR 检测 | 第47-49页 |
| ·选择标记基因与目的基因的连锁遗传 | 第49-51页 |
| ·选择标记基因 bar 与目的基因 cryIA(b)的紧密连锁遗传 | 第49-50页 |
| ·选择标记基因 gus 与目的基因 Xa21 的紧密连锁遗传 | 第50-51页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第51-56页 |
| ·Southern 杂交分析检测 Xa21 基因的遗传稳定性 | 第51-54页 |
| ·Southern 杂交分析检测 cryIA(b)基因的遗传稳定性 | 第54-56页 |
| ·双抗转基因水稻新品系的病虫抗性鉴定 | 第56-59页 |
| ·双抗转基因水稻对稻纵卷叶螟的抗性鉴定 | 第56页 |
| ·双抗转基因水稻对二化螟的田间抗性鉴定 | 第56-58页 |
| ·双抗转基因水稻对白叶枯病的抗性鉴定 | 第58-59页 |
| ·双抗转基因水稻的重要农艺性状及产量表现 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-66页 |
| ·外源基因在植物体中的遗传稳定性和抗性稳定性 | 第61页 |
| ·两种选择标记基因的应用 | 第61-62页 |
| ·抗性基因聚合育种技术 | 第62页 |
| ·转基因作物的农艺性状表现 | 第62-63页 |
| ·外源基因的整合与抗性表现 | 第63-64页 |
| ·水稻转基因研究中存在的问题与对策 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-68页 |
| ·双抗(抗螟虫、白叶枯病)转基因水稻新品系的获得 | 第66页 |
| ·Xa21 基因及 cryIA(b)基因在转基因后代中的遗传分离规律 | 第66页 |
| ·Xa21 基因和 cryIA(b)基因在转基因水稻后代中的遗传稳定性 | 第66页 |
| ·选择标记基因与目的基因的连锁遗传 | 第66-67页 |
| ·Xa21 基因和 cryIA(b)基因在转基因水稻后代中的抗性稳定性 | 第67页 |
| ·双抗转基因水稻的重要农艺性状及产量表现 | 第67页 |
| ·理论意义 | 第67-68页 |
| 6 参考文献 | 第68-78页 |
| 7 附录 | 第78-88页 |
| 附录A 常用缓冲液及培养基的配制 | 第78-83页 |
| 附录B 常用仪器 | 第83-84页 |
| 附录C 常用有机试剂的配制 | 第84-88页 |
| 8 致谢 | 第88-90页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第90页 |
