中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-43页 |
第一章 猪圆环病毒2型研究进展 | 第15-34页 |
1 一般生物学特征 | 第15-16页 |
2 基因结构与功能 | 第16-18页 |
3 致病机理(包含免疫学进展内容) | 第18-23页 |
4 PCV2检测方法 | 第23-25页 |
5 PCV2与其它病原的关系及疾病模型的复制 | 第25-27页 |
6 PCV2免疫防制进展 | 第27-29页 |
参考文献 | 第29-34页 |
第二章 疫苗免疫佐剂的研究进展 | 第34-43页 |
1 抗原微粒化佐剂 | 第34-35页 |
2 微生物佐剂 | 第35-36页 |
3 分子佐剂 | 第36-39页 |
4 植物提取物佐剂 | 第39-40页 |
5 结语 | 第40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
第二部分 实验研究 | 第43-109页 |
第三章 猪圆环病毒2型的PCR检测及其ORF2序列分析 | 第44-64页 |
1 材料与仪器 | 第45页 |
·材料与仪器 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·材料 | 第45页 |
2 方法 | 第45-50页 |
·PCR鉴定方法的建立和应用 | 第45-47页 |
·ORF2基因的克隆与序列分析 | 第47-48页 |
·ORF2基因的表达 | 第48-50页 |
3 结果 | 第50-58页 |
·PCR鉴定 | 第50-51页 |
·序列分析 | 第51-56页 |
·主要抗原基因的表达 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
·PCR检测方法 | 第58-59页 |
·序列分析 | 第59-61页 |
·原核表达 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
第四章 猪圆环病毒2型与猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征混合感染的诊断 | 第64-73页 |
1 材料与仪器 | 第65-66页 |
·仪器设备 | 第65-66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·病料 | 第66页 |
2 方法 | 第66-68页 |
·引物设计和合成 | 第66页 |
·肺市脏中RNA的提取 | 第66-67页 |
·淋巴结和脾脏中病毒DNA的提取 | 第67页 |
·PRSV的RT-PCR检测 | 第67页 |
·PCV-2的PCR检测 | 第67页 |
·PR野毒检测 | 第67页 |
·猪瘟抗原检测 | 第67-68页 |
·猪瘟抗体检测 | 第68页 |
·细菌培养 | 第68页 |
3 结果 | 第68-69页 |
·临床症状 | 第68页 |
·剖检病变 | 第68页 |
·PRRS的RT-PCR检测 | 第68页 |
·PCV-2 PCR检测 | 第68-69页 |
·CSF抗原检测结果 | 第69页 |
·细菌培养结果 | 第69页 |
·猪瘟抗体检测 | 第69页 |
·PR检测 | 第69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-73页 |
第五章 猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光定量PCR检测 | 第73-89页 |
1 材料与试剂 | 第74-75页 |
·材料 | 第74页 |
·试剂 | 第74-75页 |
2 方法 | 第75-77页 |
·引物设计 | 第75页 |
·PCV2 DNA的提取 | 第75页 |
·PRRSV RNA提取 | 第75页 |
·cDNA合成 | 第75-76页 |
·SYBR荧光定量参考质粒的构建 | 第76页 |
·实时定量PCR方法的建立 | 第76-77页 |
·数据分析 | 第77页 |
3 结果 | 第77-83页 |
·引物、探针浓度及循环条件的优化 | 第77-80页 |
·荧光定量方法的检测限 | 第80页 |
·荧光定量方法的特异性和重复性 | 第80-81页 |
·临床样品的定量PCR检测 | 第81页 |
·与常规PCR的比较 | 第81-83页 |
4 讨论 | 第83-85页 |
·荧光定量PCR检测PCV2 | 第83-84页 |
·PRRSV的荧光定量PCR检测 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-89页 |
第六章 皂苷类化合物对猪圆环病毒2型核酸疫苗的免疫佐剂作用 | 第89-109页 |
1 材料与方法 | 第90页 |
·主要试剂 | 第90页 |
·实验动物 | 第90页 |
2 方法 | 第90-97页 |
·核酸疫苗构建 | 第90-92页 |
·核酸疫苗的体外表达 | 第92页 |
·作为核酸疫苗的质粒提取 | 第92-95页 |
·佐剂与核酸疫苗的联合免疫 | 第95页 |
·抗体检测 | 第95页 |
·细胞因子mRNA的定量分析 | 第95-97页 |
3 结果 | 第97-103页 |
·核酸疫苗的鉴定 | 第97-98页 |
·目的基因在HeLa细胞中的表达 | 第98页 |
·佐剂对免疫小鼠血清中特异性抗体水平的影响 | 第98-101页 |
·佐剂对细胞因子mRNA转录水平的影响 | 第101-103页 |
4 讨论 | 第103-106页 |
·DNA疫苗 | 第103-105页 |
·佐剂对DNA疫苗的促进作用 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-109页 |
结论与展望 | 第109-110页 |
缩略词表 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
攻读博士学位期间发表的论文和参加的研究项目 | 第112-113页 |