| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 英文缩略语 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-16页 |
| 1 抗冻蛋白的结构 | 第9-11页 |
| ·鱼类抗冻蛋白的结构特征 | 第9-10页 |
| ·植物抗冻蛋白的结构特征 | 第10页 |
| ·昆虫抗冻蛋白的结构特征 | 第10-11页 |
| 2 抗冻蛋白活性 | 第11-12页 |
| 参考文献 | 第12-16页 |
| 第二部分 实验内容 | 第16-56页 |
| 第一章 戈壁琵琶甲抗冻蛋白（BKAFP972）原核表达产物的纯化及功能检测 | 第16-29页 |
| 1 材料及主要试剂 | 第17页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·其它材料及试剂 | 第17页 |
| 2 方法 | 第17-20页 |
| ·融合抗冻蛋白基因的表达 | 第17-18页 |
| ·融合抗冻蛋白的纯化 | 第18页 |
| ·抗冻蛋白对细菌的低温保护 | 第18页 |
| ·小鼠肌肉的石蜡切片制作 | 第18-20页 |
| 3 结果 | 第20-26页 |
| ·融合抗冻蛋白基因的表达 | 第20-21页 |
| ·融合抗冻蛋白的纯化 | 第21页 |
| ·AFPs 对细菌的低温保护分析 | 第21-25页 |
| ·AFPs 对哺乳动物肌肉组织的低温保护效果 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-29页 |
| 第二章 戈壁琵琶甲与准噶尔小胸鳖甲基因原核表达抗冻蛋白的活性比较 | 第29-45页 |
| 1 材料及主要试剂 | 第29-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·其它材料及试剂 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-32页 |
| ·抗冻蛋白基因的表达 | 第30页 |
| ·抗冻蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·抗冻蛋白的热滞活性测定 | 第31页 |
| ·抗冻蛋白的热稳定性测定 | 第31页 |
| ·抗冻蛋白对细菌的低温保护 | 第31页 |
| ·蛋白溶液的冰晶形态的观察 | 第31-32页 |
| ·MpAFP5 与 BkAFP972 的 THA 比较 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-40页 |
| ·MBP-MpAFP5、GST-MpAFP5、MBP-BkAFP972 和 GST-BkAFP972 的可溶 性表达 | 第32-34页 |
| ·MBP-MpAFP5、GST-MpAFP5、MBP-BkAFP972 和 GST-BkAFP972 的纯化 | 第34-35页 |
| ·融合抗冻蛋白的热滞活性和热稳定性 | 第35-36页 |
| ·AFP 对溶液冰晶形态的影响 | 第36-37页 |
| ·融合AFP 对细菌的低温保护分析 | 第37-38页 |
| ·MpAFP5 与 BkAFP972 THA 的比较 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白结构对功能的影响 | 第45-56页 |
| 1 材料及主要试剂 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| ·引物设计 | 第46-47页 |
| ·突变产物sMpafp5基因的突变与测序 | 第47页 |
| ·构建突变产物sMpafp5基因原核表达载体酶切鉴定 | 第47页 |
| ·突变产物 sMpafp5 基因原核表达产物的 SDS-PAGE 鉴定及纯化 | 第47页 |
| ·异构体融合抗冻蛋白THA 的测定 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| ·抗冻蛋白基因片段的PCR 扩增 | 第48-49页 |
| ·突变测序结果分析 | 第49-50页 |
| ·原核表达重组质粒 pGEX4T-1-sMpafp5、 pMAL-p2x-sMpafp5 的酶切鉴定 | 第50页 |
| ·突变产物 sMpafp5 基因原核表达产物的 SDS-PAGE 鉴定及纯化 | 第50-52页 |
| ·异构体融合抗冻蛋白THA 活性检测 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三部分 结论与展望 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 个人简历 | 第58-59页 |
