| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 拟南芥作为模式植物的优点及其研究策略 | 第10-11页 |
| ·模式植物拟南芥 | 第10页 |
| ·拟南芥的研究策略 | 第10-11页 |
| 2 分子伴侣在植物抗逆中的作用 | 第11-12页 |
| 3 J 蛋白的研究进展 | 第12-14页 |
| ·J 蛋白的定义及分类 | 第12页 |
| ·J 蛋白的生理功能 | 第12-13页 |
| ·拟南芥中J 蛋白的研究 | 第13-14页 |
| 4 植物JA 与ABA 信号途径 | 第14-17页 |
| ·植物的ABA 信号途径 | 第14页 |
| ·植物的JA 信号途径 | 第14-15页 |
| ·JA 与ABA 信号途径存在交叉调控 | 第15-17页 |
| 5 报告基因Gus 基因在转基因植物中的应用 | 第17-18页 |
| ·报告基因Gus 基因 | 第17页 |
| ·Gus 基因的检测分析方法 | 第17-18页 |
| 6 实时荧光定量PCR 技术 | 第18-20页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第20-31页 |
| 1 材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株及载体 | 第20-21页 |
| ·各种酶及试剂 | 第21页 |
| ·各种培养基 | 第21-22页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第22-31页 |
| ·拟南芥的培养 | 第22页 |
| ·拟南芥基因组DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·Trizol 一步法提取拟南芥总RNA | 第23-24页 |
| ·半定量 RT-PCR 方法 | 第24页 |
| ·反转录—第一链cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·PCR 合成第二链 | 第24页 |
| ·Real time PCR 方法 | 第24-25页 |
| ·单链cDNA 的合成 | 第24-25页 |
| ·Real time PCR | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第26页 |
| ·连接反应物对宿主感受态细胞的转化 | 第26-27页 |
| ·重组克隆的PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·重组的质粒载体转化农杆菌感受态细胞 | 第29页 |
| ·重组克隆的PCR 鉴定 | 第29页 |
| ·拟南芥浸花转化 | 第29-30页 |
| ·转基因阳性植株的筛选 | 第30页 |
| ·DAB 染色 | 第30页 |
| ·GUS 基因的表达检测方法 | 第30-31页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第31-52页 |
| 1 突变体的表型分析 | 第31-35页 |
| ·突变体在萌发阶段对ABA 敏感 | 第31-32页 |
| ·突变体在萌发阶段对盐敏感性分析 | 第32-34页 |
| ·各种植物激素对突变体萌发及生长的影响 | 第34页 |
| ·突变体对核盘菌具有抗性 | 第34-35页 |
| 2 突变体对JA/ABA 敏感表型的分子机制探讨 | 第35-37页 |
| 3 ALP1 基因在高低温胁迫中的表达调控模式探讨 | 第37-39页 |
| 4 GUS 组织定位法揭示ALP1 基因的表达模式 | 第39-43页 |
| ·ALP1 启动子区域元件分析 | 第39-40页 |
| ·ALP1promoter::GUS 表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·利用GUS 染色分析ALP1 基因在拟南芥中的表达模式 | 第41-43页 |
| 5 ALP1 同源基因的研究 | 第43-48页 |
| ·利用数据库信息分析ALP1 同源基因在不同阶段及不同组织的表达情况 | 第43-44页 |
| ·利用数据库分析各基因在不同逆境下的表达情况 | 第44-46页 |
| ·同源基因过表达突变体的获得 | 第46-48页 |
| 6 讨论与分析 | 第48-50页 |
| ·alp1 突变体对外源ABA/JA 敏感的原因探讨 | 第48-49页 |
| ·突变体对核盘菌抗性的探讨 | 第49-50页 |
| 7 下一步工作安排 | 第50-51页 |
| 8 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
