| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-17页 |
| 第一章 课题提出与研究进展 | 第17-46页 |
| ·课题提出 | 第17-18页 |
| ·柑橘遗传育种研究进展 | 第18-23页 |
| ·柑橘育种目标和成果 | 第18-19页 |
| ·柑橘生物技术育种 | 第19-23页 |
| ·组织培养育种 | 第19页 |
| ·体细胞杂交育种 | 第19-20页 |
| ·分子标记辅助育种 | 第20-21页 |
| ·柑橘遗传转化育种 | 第21-23页 |
| ·植物类胡萝卜素代谢研究进展 | 第23-41页 |
| ·植物类胡萝卜素的代谢途径 | 第23-26页 |
| ·异戊二烯焦磷酸(IPP)生物合成 | 第24页 |
| ·八氢番茄红素(Phytoene)生物合成 | 第24页 |
| ·番茄红素(Lycopene)生物合成 | 第24页 |
| ·胡萝卜素(Carotene)生物合成 | 第24页 |
| ·含氧类胡萝卜素(Xanthophylls)生物合成 | 第24-26页 |
| ·类胡萝卜素氧化裂解化合物(Apocarotenoid) | 第26页 |
| ·植物类胡萝卜素代谢的主要酶及基因 | 第26-32页 |
| ·IPP异构酶(IPPI) | 第26-27页 |
| ·GGPP合成酶(GGPS) | 第27页 |
| ·八氢番茄红素合成酶(PSY) | 第27-28页 |
| ·八氢番茄红素脱氢酶(PDS)和ζ-类胡萝卜素脱氢酶(ZDS) | 第28-29页 |
| ·类胡萝卜素异构酶(CRTISO) | 第29-30页 |
| ·番茄红素环化酶(LCYB、LCYE) | 第30-31页 |
| ·胡萝卜素羟化酶(BCH、ECH) | 第31页 |
| ·玉米黄质环氧酶(ZEP)和堇菜黄质脱环氧酶(VDE) | 第31-32页 |
| ·新黄质合成酶(NXS) | 第32页 |
| ·类胡萝卜素裂解双氧合酶(NCED和CCD) | 第32页 |
| ·植物类胡萝卜素代谢调控 | 第32-35页 |
| ·转录调控 | 第32-34页 |
| ·转录后调控 | 第34页 |
| ·调节因子调控 | 第34页 |
| ·储存结构调控 | 第34-35页 |
| ·植物类胡萝卜素代谢工程 | 第35-41页 |
| ·改良作物营养品质 | 第35-36页 |
| ·生产特殊类胡萝卜素 | 第36-37页 |
| ·提高作物抗逆性 | 第37-38页 |
| ·调节蛋白和附属蛋白 | 第38-41页 |
| ·柑橘果实类胡萝卜素代谢研究进展 | 第41-44页 |
| ·柑橘果实类胡萝卜素组分和含量 | 第41-42页 |
| ·柑橘果实类胡萝卜素代谢相关酶及基因 | 第42-43页 |
| ·柑橘类胡萝卜素着色突变体的研究 | 第43-44页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第44-46页 |
| 第二章 红肉脐橙CsPSY和CsLCYb功能分析 | 第46-89页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-57页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·菌株、质粒、载体及试剂 | 第47页 |
| ·菌株、质粒和载体 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·CsPSY功能特性研究 | 第47-54页 |
| ·CsPSY生物信息学分析 | 第47-48页 |
| ·CsPSY表达分析 | 第48页 |
| ·原核表达载体pET-CsPSY构建 | 第48页 |
| ·pET-CsPSY表达产物SDS-PAGE检测 | 第48-49页 |
| ·pET-CsPSY表达产物功能分析 | 第49页 |
| ·植物表达载体pBI-CsPSY构建 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导CsPSY转化柑橘 | 第50页 |
| ·CsPSY转基因植株分子鉴定 | 第50-53页 |
| ·CsPSY转基因山金柑类胡萝卜素含量分析 | 第53页 |
| ·CsPSY转基因山金柑果实类胡萝卜素合成基因表达分析 | 第53-54页 |
| ·CsLCYb功能特性研究 | 第54-57页 |
| ·CsLCYb生物信息学分析 | 第54页 |
| ·CsLCYb表达分析 | 第54页 |
| ·原核表达载体pET-CsLCYbs构建 | 第54-55页 |
| ·pET-CsLCYbs表达产物SDS-PAGE检测 | 第55页 |
| ·pET-CsLCYbs表达产物功能分析 | 第55页 |
| ·植物表达载体pBI-CsLCYbs构建 | 第55-56页 |
| ·农杆菌介导CsLCYb1和CsLCYb2转化番茄 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-83页 |
| ·红肉脐橙CsPSY功能特性分析 | 第57-73页 |
| ·CsPSY cDNA序列分析 | 第57-58页 |
| ·CsPSY蛋白系统进化分析 | 第58-59页 |
| ·CsPSY蛋白二级结构分析 | 第59-60页 |
| ·CsPSY表达分析 | 第60-61页 |
| ·CsPSY原核表达载体构建及重组蛋白表达分析 | 第61-63页 |
| ·CsPSY在大肠杆菌中功能分析 | 第63-64页 |
| ·CsPSY植物表达载体构建 | 第64页 |
| ·CsPSY转化山金柑 | 第64-68页 |
| ·CsPSY转化早实枳和葡萄柚 | 第68-73页 |
| ·红肉脐橙CsLCYb功能特性分析 | 第73-83页 |
| ·CsLCYb cDNAs序列分析 | 第73-74页 |
| ·CsLCYbs蛋白系统进化分析 | 第74-75页 |
| ·CsLCYbs蛋白二级结构分析 | 第75-77页 |
| ·CsLCYbs表达分析 | 第77-78页 |
| ·CsLCYbs原核表达载体构建及重组蛋白表达分析 | 第78-79页 |
| ·CsLCYb1和CsLCYb2在大肠杆菌中功能分析 | 第79-81页 |
| ·农杆菌介导CsLCYb1和CsLCYb2转化番茄 | 第81-83页 |
| ·讨论 | 第83-89页 |
| ·CsPSY和CsLCYbs蛋白结构特征 | 第83页 |
| ·CsPSY和CsLCYbs基因在大肠杆菌中功能表达 | 第83-84页 |
| ·CsPSY和CsLCYbs基因表达与红肉脐橙果实特征性色素积累的关系 | 第84-86页 |
| ·CsPSY在山金柑中过量表达提高类胡萝卜素含量 | 第86-87页 |
| ·短童期柑橘种质资源在柑橘功能基因组研究中的应用潜力 | 第87-89页 |
| 第三章 欧文细菌八氢番茄红素合成酶基因crtB转化番茄和柑橘的研究 | 第89-127页 |
| ·引言 | 第89-90页 |
| ·材料与方法 | 第90-99页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·菌株、质粒及试剂 | 第90页 |
| ·crtB植物表达载体的构建 | 第90-91页 |
| ·crtB对番茄的遗传转化 | 第91-94页 |
| ·农杆菌介导crtB转化番茄 | 第91-92页 |
| ·crtB转基因番茄植株的分子检测 | 第92-93页 |
| ·crtB在番茄转化再生植株中的表达分析 | 第93-94页 |
| ·crtB转基因番茄果实类胡萝卜素含量分析 | 第94页 |
| ·crtB转基因番茄果实内源类胡萝卜素合成相关基因表达分析 | 第94页 |
| ·crtB对柑橘愈伤组织的遗传转化 | 第94-97页 |
| ·农杆菌介导crtB转化柑橘FXC和GWZ愈伤组织 | 第94-95页 |
| ·crtB转基因柑橘FXC和GWZ愈伤组织和胚状体分子检测 | 第95-96页 |
| ·crtB在柑橘愈伤组织和胚状体中的表达分析 | 第96页 |
| ·crtB转基因柑橘FXC和GWZ愈伤组织或胚状体显微观察 | 第96-97页 |
| ·crtB转基因柑橘FXC和GWZ愈伤组织和胚状体类胡萝卜素含量分析 | 第97页 |
| ·crtB转基因柑橘FXC和GWZ愈伤组织和胚状体内源类胡萝卜素合成相关基因表达分析 | 第97页 |
| ·crtB对柑橘上胚轴的遗传转化 | 第97-99页 |
| ·农杆菌介导crtB转化柑橘早实枳和葡萄柚上胚轴 | 第97页 |
| ·crtB转基因柑橘早实枳和葡萄柚的分子鉴定 | 第97-98页 |
| ·crtB转基因柑橘早实枳和葡萄柚叶片类胡萝卜素含量分析 | 第98-99页 |
| ·结果与分析 | 第99-123页 |
| ·crtB植物遗传转化载体的构建 | 第99-100页 |
| ·crtB对番茄遗传转化 | 第100-104页 |
| ·crtB转基因番茄植株获得 | 第100页 |
| ·crtB转基因番茄植株分子鉴定 | 第100-102页 |
| ·crtB转基因番茄果实类胡萝卜素含量分析 | 第102-103页 |
| ·crtB转基因番茄果实类胡萝卜素合成内源基因表达的变化 | 第103-104页 |
| ·crtB基因对柑橘愈伤组织(GWZ、FXC)遗传转化 | 第104-115页 |
| ·crtB转基因抗性愈伤组织和胚状体的获得 | 第104-106页 |
| ·crtB转基因抗性愈伤组织和胚状体PCR鉴定 | 第106页 |
| ·crtB转基因抗性愈伤组织和胚状体RT-PCR分析 | 第106-107页 |
| ·crtB转基因抗性愈伤组织和胚状体光学显微镜观察 | 第107-110页 |
| ·crtB转基因抗性愈伤组织和胚状体透射电镜观察 | 第110-111页 |
| ·crtB转基因GWZ愈伤组织和胚状体类胡萝卜素分析 | 第111-112页 |
| ·crtB转基因FXC愈伤组织和胚状体类胡萝卜素分析 | 第112-113页 |
| ·crtB转基因GWZ愈伤组织和胚状体类胡萝卜素合成内源基因表达分析 | 第113-114页 |
| ·crtB转基因FXC愈伤组织和胚状体类胡萝卜素合成内源基因表达分析 | 第114-115页 |
| ·crtB基因对柑橘上胚轴(葡萄柚、早实枳)遗传转化 | 第115-123页 |
| ·crtB转基因葡萄柚植株的再生与鉴定 | 第115-119页 |
| ·crtB转基因早实枳植株的再生与鉴定 | 第119-123页 |
| ·讨论 | 第123-127页 |
| ·crtB过量表达增加了柑橘愈伤组织和胚状体中类胡萝卜素含量 | 第123-124页 |
| ·crtB转基因柑橘愈伤组织和胚状体中内源类胡萝卜素合成相关基因的表达 | 第124-125页 |
| ·crtB过量表达促进柑橘愈伤组织和胚状体中类胡萝卜素储存结构形成 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-145页 |
| 附录Ⅰ Real-time RT-PCR分析crtB转基因番茄和柑橘类胡萝卜素生物合成基因相对表达所用引物 | 第145-146页 |
| 附录Ⅱ 红肉脐橙和华盛顿脐橙果实图片 | 第146-147页 |
| 附录Ⅲ 红肉脐橙果实类胡萝卜素积累特征图片 | 第147-148页 |
| 附录Ⅳ 博士期间发表及待发表的论文 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
