| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-17页 |
| 文献综述 | 第17-38页 |
| 第一章 P53 蛋白的研究进展 | 第17-24页 |
| 1 P53 上游的调控网络 | 第17-19页 |
| 2 P53 的中游调控网络 | 第19-21页 |
| ·MDM2 与p53 | 第20页 |
| ·p14ARF 与p53 | 第20-21页 |
| ·其它蛋白质的相互作用对p53 的调控 | 第21页 |
| 3 P53 的下游功能网络 | 第21-22页 |
| ·p53 促进细胞凋亡 | 第22页 |
| ·p53 介导的细胞周期阻滞 | 第22页 |
| ·p53 参与DNA 损伤的修复，维持基因组的完整性 | 第22页 |
| 4 小结 | 第22-24页 |
| 第二章 原癌基因C-MYC、E2F1、RAS 与肿瘤关系的研究进展 | 第24-30页 |
| 1 原癌基因C-MYC 基因的研究 | 第24-26页 |
| ·c-MYC 癌基因的结构 | 第24页 |
| ·c-MYC 基因表达产物的结构与功能 | 第24-25页 |
| ·c-MYC 癌基因激活机制 | 第25页 |
| ·c-MYC 癌基因与细胞周期及细胞凋亡的关系 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26页 |
| 2. 原癌基因E2F1 基因的研究 | 第26-27页 |
| ·E2F 转录因子家族成员 | 第26页 |
| ·E2F 与肿瘤的关系 | 第26-27页 |
| ·E2F1 与细胞增殖的关系 | 第27页 |
| ·E2F 与细胞凋亡 | 第27页 |
| ·小结 | 第27页 |
| 3 原癌基因RAS 的研究 | 第27-30页 |
| ·Ras 基因的结构 | 第27-28页 |
| ·Ras 蛋白的功能 | 第28页 |
| ·Ras 与肿瘤的关系 | 第28-29页 |
| ·Ras 基因与细胞凋亡的关系 | 第29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 第三章 P14ARF 的研究进展 | 第30-35页 |
| 1 P14ARF 基因的结构 | 第30页 |
| 2 P14ARF 的生化功能 | 第30-34页 |
| ·p14ARF-HDM2-p53 通路的研究 | 第30-31页 |
| ·p14ARF-ARF-BP1-p53 通路的研究 | 第31页 |
| ·p14ARF 非依赖于p53 通路的研究 | 第31-32页 |
| ·p14ARF 与蛋白酶体作用研究 | 第32页 |
| ·p14ARF 对其它蛋白的调控 | 第32-34页 |
| 3 小结 | 第34-35页 |
| 第四章 泛素-蛋白酶体介导的蛋白质降解机制的研究进展 | 第35-38页 |
| 1 泛素-蛋白酶体途径（UPP） | 第35-37页 |
| ·泛素（ubiquitin） | 第35页 |
| ·蛋白酶体 | 第35-36页 |
| ·泛素-蛋白酶体系统的作用机制 | 第36页 |
| ·去泛素化酶系统 | 第36-37页 |
| 2 UPP 与疾病 | 第37页 |
| 3 小结 | 第37-38页 |
| 实验研究 | 第38-91页 |
| 第五章 原癌基因激活对APAK 功能的调控及其分子机制 | 第38-75页 |
| 第一节 原癌基因激活对APAK 转录抑制功能的影响 | 第38-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| 2 结果 | 第41-44页 |
| ·Ras 及Ras-G12V 表达载体构建 | 第41页 |
| ·多种癌基因信号刺激下，Apak 抑制p53 转录因子活性的变化 | 第41-42页 |
| ·多种癌基因信号刺激下，Apak 与p53 结合的变化 | 第42-43页 |
| ·Apak 568A 突变不能阻断癌基因激活下Apak 和p53 的解离 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第二节 P14ARF 对APAK 功能的调控 | 第46-50页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| 2 结果 | 第47-49页 |
| ·p14ARF 敲低可阻断癌基因激活对Apak 转录抑制功能的负调控同时导致癌基因激活不能诱导Apak-p53 解离 | 第47-48页 |
| ·p14ARF 的N 端能够拮抗Apak 对p53 的转录抑制活性 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49页 |
| 4 小结 | 第49-50页 |
| 第三节 APAK 与P14ARF 的相互作用 | 第50-59页 |
| 1 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·GST-p14ARF、GST-p14ARF-N64、GST-p14ARF-ΔN64 质粒的构建 | 第53页 |
| ·p14ARF 和Apak 的体外相互作用 | 第53-54页 |
| ·p14ARF 的N 端46-64 aa 区域决定了其与Apak 的结合 | 第54-55页 |
| ·Apak 的C 端锌指结构决定了其与p14ARF 的结合 | 第55-56页 |
| ·p53 与p14ARF 竞争性的结合Apak | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第四节 癌基因应激上调APAK 的蛋白稳定性且依赖于P14ARF | 第59-64页 |
| 1 材料与方法 | 第59-60页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-62页 |
| ·癌基因c-MYC、E2F1、Ras-G12V 上调外源Apak 的表达 | 第60页 |
| ·癌基因调控Apak 的蛋白水平依赖p14ARF | 第60-61页 |
| ·p14ARF 可以增强Apak 的蛋白稳定性 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62页 |
| 4 小结 | 第62-64页 |
| 第五节 泛素连接酶HDM2 对APAK 稳定性的调控 | 第64-71页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| 2 结果 | 第65-69页 |
| ·p14ARF 抑制蛋白酶体介导的Apak 降解 | 第65-66页 |
| ·HDM2 通过蛋白酶体途径对Apak 的蛋白水平进行下调 | 第66-67页 |
| ·HDM2 与Apak 的相互作用 | 第67-68页 |
| ·p14ARF 与HDM2 竞争性的结合Apak | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 第六节 泛素连接酶ARF-BP1 对APAK 稳定性的调控 | 第71-75页 |
| 1 材料与方法 | 第71页 |
| ·材料 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-73页 |
| ·ARF 调控Apak 稳定性依赖ARF-BP1 和HDM2 两种E3 的存在 | 第71-72页 |
| ·原癌基因调控Apak 稳定性也依赖ARF-BP1 和HDM2 两种E3 的存在 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-74页 |
| 4 小结 | 第74-75页 |
| 第六章 不同类型的DNA 损伤信号对APAK 的调控及机制 | 第75-88页 |
| 第一节 多种DNA 损伤信号对APAK 转录抑制功能的影响 | 第76-82页 |
| 1 材料与方法 | 第76页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·方法 | 第76页 |
| 2 结果 | 第76-80页 |
| ·p 53 激活信号的选择 | 第76-77页 |
| ·DNA 损伤药物处理后，Apak 抑制p53 转录活性的变化 | 第77-78页 |
| ·DNA 损伤处理后，Apak 磷酸化水平及p53 凋亡靶基因的变化 | 第78-79页 |
| ·D NA 损伤处理后，Apak 磷酸化水平的时相变化 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-81页 |
| 4 小结 | 第81-82页 |
| 第二节 多种DNA 损伤信号处理下APAK 与P53 的结合变化 | 第82-84页 |
| 1 材料与方法 | 第82页 |
| ·材料 | 第82页 |
| ·方法 | 第82页 |
| 2 结果 | 第82-83页 |
| ·DNA 损伤因素处理后，Apak 与p53 结合的变化 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第三节 多种DNA 损伤信号处理下APAK 与ATM 的相互作用变化 | 第84-88页 |
| 1 材料与方法 | 第84页 |
| ·材料 | 第84页 |
| ·方法 | 第84页 |
| 2 结果 | 第84-86页 |
| ·ATM 与Apak 可以在体内结合，并在doxorubicin、etoposide、camptothecin、cisplatin 处理后解离 | 第84-85页 |
| ·DNA 损伤诱导的Apak-p53 解离依赖ATM 激酶 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-87页 |
| 4 小结 | 第87-88页 |
| 第七章 结论与创新点 | 第88-91页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 1 原癌基因激活对APAK 功能的调控及其分子机制 | 第88-89页 |
| ·原癌基因激活对Apak 转录抑制功能的影响 | 第88页 |
| ·p14ARF 对Apak 功能的调控 | 第88页 |
| ·Apak 与p14ARF 的相互作用 | 第88页 |
| ·癌基因应激上调Apak 的蛋白稳定性且依赖于p14ARF | 第88-89页 |
| ·泛素连接酶HDM2 对Apak 稳定性的调控 | 第89页 |
| ·泛素连接酶ARF-BP1 对Apak 稳定性的调控 | 第89页 |
| 2 不同类型的DNA 损伤信号对APAK 的调控及机制 | 第89-90页 |
| ·多种DNA 损伤信号对Apak 转录抑制功能的影响 | 第89页 |
| ·多种DNA 损伤信号处理下Apak 与p53 的结合变化 | 第89页 |
| ·多种DNA 损伤信号处理下Apak 与ATM 的相互作用变化 | 第89-90页 |
| 创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 主要仪器设备和常用试剂的配制 | 第101-103页 |
| 英文缩写词 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 作者简介 | 第106页 |
