中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
·研究的目的和意义 | 第9-10页 |
·本研究的主要内容 | 第10页 |
·文献综述 | 第10-20页 |
·大豆在生活中的价值 | 第10-11页 |
·大豆组织培养的研究进展 | 第11-13页 |
·大豆遗传改良的研究进展 | 第13-14页 |
·DDRT-PCR 技术的研究进展 | 第14-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
·材料 | 第20-22页 |
·植物材料 | 第20页 |
·载体、菌株与抗生素 | 第20页 |
·试剂、工具酶 | 第20页 |
·引物 | 第20-21页 |
·实验仪器 | 第21页 |
·缓冲液及主要试剂配制 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-34页 |
·实验材料的准备 | 第22页 |
·总 RNA 提取 | 第22-23页 |
·检测所抽提的 RNA 质量 | 第23页 |
·DNAase 处理 RNA | 第23-24页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第24-25页 |
·DDRT-PCR | 第25页 |
·聚丙烯酰胺凝胶(PAG)电泳 | 第25-26页 |
·核酸银染 | 第26-27页 |
·聚丙烯酰胺凝胶中差异cDNA 片段的切割回收 | 第27-28页 |
·二次 PCR 产物回收 | 第28页 |
·目的基因片段与载体连接 | 第28页 |
·CaCL_2法制备感受态细胞 | 第28页 |
·连接产物的转化 | 第28-29页 |
·质粒的提取 | 第29-30页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第30-32页 |
·测序 | 第32页 |
·反向 Northern 点杂交 | 第32-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-41页 |
·总 RNA 的提取 | 第34页 |
·差异显示 | 第34-36页 |
·回收片段 PCR 再扩增正确性检测 | 第36-38页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第38页 |
·反向 Northern Blot 检测阳性差别 cDNA 片段 | 第38-39页 |
·序列测定 | 第39页 |
·进行测序的片段所用引物情况 | 第39-40页 |
·比对结果 | 第40-41页 |
第四章 讨论 | 第41-43页 |
·选材对实验结果的影响 | 第41页 |
·总 RNA 提取问题 | 第41页 |
·差异显示方法 | 第41-42页 |
·假阳性问题的探讨 | 第42页 |
·关于后续工作 | 第42-43页 |
附图 | 第43-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
攻读硕士学位期间出版或发表的论著、论文 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |