微电极芯片系统中高产表面活性剂酵母细胞融合及筛选研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-10页 |
| 1 绪论 | 第10-24页 |
| ·生物表面活性剂应用 | 第10-13页 |
| ·在石油工业中的应用 | 第12页 |
| ·环境工程修复 | 第12页 |
| ·在医药中的应用 | 第12-13页 |
| ·在食品和精细化工中的应用 | 第13页 |
| ·在农业方面的应用 | 第13页 |
| ·菌种选育方法 | 第13-15页 |
| ·传统育种方法 | 第13-14页 |
| ·原生质体融合技术 | 第14-15页 |
| ·细胞融合发展史 | 第15-18页 |
| ·病毒介导的细胞融合 | 第15-16页 |
| ·化学法 | 第16页 |
| ·电融合 | 第16页 |
| ·激光融合技术 | 第16-17页 |
| ·空间融合技术 | 第17页 |
| ·离子束融合技术 | 第17页 |
| ·基于微流控芯片的细胞融合技术 | 第17-18页 |
| ·自制微电极融合系统的研制 | 第18-19页 |
| ·融合子筛选方法 | 第19-22页 |
| ·双亲对碳源利用不同筛选融合子的方法 | 第20页 |
| ·利用营养缺陷型标记筛选融合子 | 第20页 |
| ·利用灭活原生质体标记筛选融合子 | 第20-21页 |
| ·利用荧光染色法筛选融合子 | 第21页 |
| ·融合子的其它筛选方法 | 第21页 |
| ·利用抗药性标记筛选融合子 | 第21-22页 |
| ·论文研究内容 | 第22-24页 |
| ·问题提出 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-24页 |
| 2 电融合中细胞膜电穿孔基础理论分析 | 第24-33页 |
| ·电穿孔现象 | 第24-25页 |
| ·细胞膜结构 | 第24页 |
| ·电穿孔现象 | 第24-25页 |
| ·电穿孔机制 | 第25-28页 |
| ·电穿孔发生过程 | 第28-30页 |
| ·电穿孔的形成条件 | 第28-29页 |
| ·电穿孔的形成过程 | 第29-30页 |
| ·电穿孔的物理模型 | 第30-33页 |
| 3 电融合中电穿孔的实验研究 | 第33-42页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·仪器设备 | 第33页 |
| ·化学试剂 | 第33-34页 |
| ·试剂及培养基配方 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-35页 |
| ·酵母原生质体制备 | 第34-35页 |
| ·台盼蓝染色 | 第35页 |
| ·芯片电穿孔实验 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·脉冲电压对酵母原生质体穿孔率的影响 | 第35-36页 |
| ·脉冲持续时间对酵母原生质体穿孔率的影响 | 第36-37页 |
| ·脉冲个数对酵母原生质体穿孔率的影响 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·脉冲电压与穿孔率的关系 | 第39-40页 |
| ·脉冲持续时间与穿孔率的关系 | 第40页 |
| ·脉冲个数与穿孔率的关系 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 4 酵母电融合条件优化及荧光染色观察 | 第42-58页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·细胞来源 | 第42页 |
| ·仪器设备 | 第42-43页 |
| ·化学试剂 | 第43页 |
| ·试剂及培养基配方 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44页 |
| ·接种培养 | 第44页 |
| ·原生质体的制备 | 第44页 |
| ·原生质体电融合 | 第44页 |
| ·荧光染色 | 第44页 |
| ·荧光显微镜下观察细胞融合情况 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-55页 |
| ·不同离子浓度下电场因素对融合率的影响 | 第44-53页 |
| ·荧光染色观察融合 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·电场因素对原生质体融合的影响 | 第55-56页 |
| ·离子因素对原生质体融合率的影响 | 第56-57页 |
| ·荧光染料对原生质体的影响 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 5 抗性筛选融合子 | 第58-72页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·细胞来源 | 第59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·化学试剂 | 第59-60页 |
| ·培养基 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·菌悬液制备 | 第60页 |
| ·紫外诱变 | 第60-61页 |
| ·梯度平板法筛选抗药性突变株 | 第61页 |
| ·诱变对菌株性能影响 | 第61页 |
| ·融合 | 第61页 |
| ·融合子性能检测 | 第61页 |
| ·实验结果 | 第61-69页 |
| ·抗性菌株筛选 | 第61-63页 |
| ·紫外诱变对再生率的影响 | 第63页 |
| ·紫外诱变对排油圈的影响 | 第63-64页 |
| ·紫外诱变对表面张力的影响 | 第64-65页 |
| ·紫外诱变对乳化能力的影响 | 第65-66页 |
| ·融合子筛选 | 第66-67页 |
| ·融合子排油圈测定 | 第67-68页 |
| ·融合子乳化力测定 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·紫外诱变对再生率的影响 | 第69-70页 |
| ·紫外诱变对酵母产表面活性剂性能的影响 | 第70页 |
| ·融合对菌株表明活性的影响 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 6 总结与展望 | 第72-74页 |
| ·课题总结 | 第72页 |
| ·展望 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 附录 | 第80页 |
