番茄脂肪氧化酶基因TomloxD的毕赤酵母表达及遗传转化研究
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| ·植物脂肪氧化酶研究进展 | 第11-16页 |
| ·脂肪氧化酶的细胞定位 | 第11页 |
| ·脂肪氧化酶的分类 | 第11-12页 |
| ·脂肪氧化酶的功能 | 第12-16页 |
| ·脂肪氧化酶活性测定 | 第16-17页 |
| ·氧电极法 | 第16页 |
| ·分光光度法 | 第16-17页 |
| ·量压法 | 第17页 |
| ·KI-淀粉法 | 第17页 |
| ·植物RNAi 干扰研究 | 第17-20页 |
| ·RNA 干扰机制 | 第17-19页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第19页 |
| ·RNA 干扰技术的应用 | 第19-20页 |
| ·课题研究的目的与内容 | 第20-24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| ·研究的主要内容与技术路线 | 第21-24页 |
| 2 番茄 TomloxD 基因表达模式研究 | 第24-30页 |
| ·试验材料 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·常用试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·番茄材料收集 | 第24-25页 |
| ·番茄总RNA 提取 | 第25页 |
| ·反转录RT-PCR | 第25页 |
| ·TomloxD 基因保守序列片段扩增 | 第25-26页 |
| ·机械损伤处理 | 第26页 |
| ·分光光度法分析脂肪氧化酶活性 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-30页 |
| ·番茄总RNA 提取 | 第27页 |
| ·番茄TomloxD 基因在不同组织中表达情况 | 第27-28页 |
| ·机械损伤对TomloxD 基因表达的影响 | 第28页 |
| ·损伤处理番茄叶片后LOX 活性测定 | 第28-30页 |
| 3 TomloxD 基因在毕赤酵母中转化与表达 | 第30-39页 |
| ·材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·质粒与菌株 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·线性化质粒的制备 | 第31页 |
| ·毕赤酵母感受态细胞的制备（电转化） | 第31-32页 |
| ·线性化质粒电转化毕赤酵母 | 第32页 |
| ·重组转化子验证 | 第32页 |
| ·甲醇诱导蛋白表达 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测蛋白表达 | 第33-34页 |
| ·Western-Blot 检测 | 第34-35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·TomloxD 基因毕赤酵母表达载体构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的线性化并转化毕赤酵母 | 第36-37页 |
| ·阳性转化子的诱导蛋白表达 | 第37页 |
| ·蛋白活性测定 | 第37-39页 |
| 4 番茄 TomloxD 基因载体构建及遗传转化 | 第39-57页 |
| ·材料与试剂 | 第39-41页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株与质粒载体 | 第39页 |
| ·常用试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·试剂配制 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-46页 |
| ·TomloxD 基因全长及保守序列扩增 | 第41-45页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-57页 |
| ·TomloxD 基因序列扩增 | 第46-47页 |
| ·TomloxD 基因RNAi 沉默载体构建 | 第47-51页 |
| ·TomloxD 基因超表达载体构建 | 第51-54页 |
| ·重组载体转化番茄 | 第54-57页 |
| 5 结论与展望 | 第57-58页 |
| ·主要结论 | 第57页 |
| ·展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65页 |
| A：作者在攻读硕士学位期间的论文目录 | 第65页 |
| B：作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第65页 |
