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甘蓝型油菜硼转运子基因的克隆、表达和分子进化

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略语表第12-14页
1 前言第14-28页
   ·引言第14页
   ·文献综述第14-28页
     ·土壤和植物中的硼第15-16页
       ·土壤中硼的分布和分类第15页
       ·我国土壤中硼的现状第15-16页
       ·硼在植物中的分布第16页
     ·硼在植物中的生理功能第16-20页
       ·硼与细胞壁第17-18页
       ·硼与细胞膜第18页
       ·硼与碳水化合物第18-19页
       ·硼与激素第19页
       ·硼与酚类第19-20页
       ·硼与生殖发育第20页
     ·硼在植物体中的转运第20-25页
       ·硼的被动吸收第20-21页
       ·硼与糖的共运输第21-22页
       ·水通道介导的硼转运第22-23页
       ·转运子介导的硼转运第23-25页
     ·植物硼营养高效的研究第25-28页
       ·植物硼营养效率的基因型差异第25页
       ·植物硼营养高效的机制第25-26页
       ·甘蓝型油菜硼高效的研究第26-28页
2 本研究的目的和意义第28-30页
   ·研究意义第28页
   ·研究内容第28-29页
   ·研究目标第29页
   ·技术路线第29-30页
3 硼高、低效品种的性状考察第30-37页
   ·材料与方法第30-31页
     ·植物材料和培养方法第30页
     ·营养液培养试验的设计第30-31页
     ·生理指标和硼浓度的测定方法第31页
     ·数据处理和统计分析第31页
   ·结果与分析第31-36页
     ·硼对甘蓝型油菜硼高、低效品种干重和根长的影响第31-34页
     ·不同硼水平下,甘蓝型油菜硼高、低效硼累积和转运能力的差异第34-36页
   ·讨论第36-37页
4 甘蓝型油菜BnBOR1基因的克隆和分子进化第37-95页
   ·材料和试剂第37-40页
     ·植物材料第37页
     ·菌株第37页
     ·试剂和试剂盒第37-40页
       ·核酸提取以及检测试剂第37-38页
       ·基因克隆试剂及试剂盒第38-39页
       ·Southern杂交试剂及试剂盒第39-40页
   ·实验方法和步骤第40-63页
     ·植物材料的处理第40页
     ·核酸的提取第40-44页
       ·基因组DNA的提取第40-41页
       ·基因克隆的总RNA的提取第41-42页
       ·总RNA中DNA的去除第42页
       ·DNA和RNA浓度的测定和质量检验第42-44页
     ·基因克隆第44-54页
       ·逆转录RACE第一链cDNA合成第44-45页
       ·5'-和3'-RACE第45-47页
       ·甘蓝型油菜BOR基因全长的分离第47-48页
       ·BnBOR1-1a上游序列的分离第48-50页
       ·甘蓝型油菜BOR基因PCR产物的连接转化和测序第50-54页
     ·分子进化分析第54-63页
       ·甘蓝型油菜BOR家族的Southern杂交分析第54-58页
       ·核酸和蛋白质序列结构和功能的生物信息学分析第58-63页
   ·结果与分析第63-90页
     ·总DNA和RNA的提取第63-64页
     ·甘蓝型油菜硼转运子基因的克隆第64-68页
       ·RNA逆转录成cDNA第64页
       ·甘蓝型油菜BOR基因3'-和5'-RACE末端克隆第64-66页
       ·甘蓝型油菜BOR基因全长cDNA和基因组序列的克隆第66-67页
       ·BnBOR1;1a上游序列的克隆第67-68页
     ·分子进化分析第68-90页
       ·Southern杂交鉴定甘蓝型油菜BOR基因数目第68-70页
       ·芸薹族BOR1基因核酸序列的特点第70-73页
       ·BnBOR1基因蛋白质序列的分析第73-82页
       ·芸薹族BOR1基因的分子进化特征第82-90页
   ·讨论第90-95页
     ·基因家族成员的一些结构特征第90-91页
     ·密码子和进化特征第91-92页
     ·基因家族的进化关系第92-95页
5 甘蓝型油菜硼转运子基因的表达和定位第95-113页
   ·材料和方法第95-105页
     ·材料和试剂第95-96页
       ·植物材料第95页
       ·试剂和试剂盒第95-96页
     ·实验方法和步骤第96-105页
       ·植物材料的处理第96页
       ·核酸的提取第96-98页
       ·BnBOR1的表达分析第98-102页
       ·硼转运子基因的定位第102-105页
   ·结果与分析第105-111页
     ·RNA的质量第105页
     ·表达分析第105-107页
       ·苗期缺硼诱导表达第105-106页
       ·组织特异性表达第106-107页
     ·硼转运子基因在遗传连锁图谱上的定位第107-111页
       ·硼转运子基因定位第107-108页
       ·硼转运子基因与硼相关QTLs第108-111页
   ·讨论第111-113页
6 总结与展望第113-117页
   ·总结第113-114页
   ·本研究的主要创新点第114-115页
   ·本研究的不足之处第115-116页
   ·下一步的工作第116-117页
参考文献第117-129页
致谢第129-130页
附录第130页

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