| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·动物细胞表达系统 | 第10-11页 |
| ·CHO细胞培养 | 第11-15页 |
| ·细胞培养环境控制 | 第11-13页 |
| ·体外培养动物细胞的代谢和控制策略 | 第13-14页 |
| ·无血清培养基 | 第14-15页 |
| ·流加培养 | 第15-17页 |
| ·流加培养的优势 | 第15-16页 |
| ·初始培养基 | 第16页 |
| ·流加培养基的优化 | 第16-17页 |
| ·流加培养工艺的优化 | 第17页 |
| ·本课题的研究背景和意义 | 第17-18页 |
| 第2章 重组CHO细胞无血清培养基的建立 | 第18-30页 |
| ·前言 | 第18页 |
| ·实验材料和方法 | 第18-20页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·有血清细胞培养 | 第18-19页 |
| ·无血清驯化和悬浮培养 | 第19页 |
| ·CHO悬浮细胞冻存和复苏 | 第19页 |
| ·CHO悬浮细胞冻存 | 第19页 |
| ·CHO悬浮细胞复苏 | 第19页 |
| ·分析方法 | 第19-20页 |
| ·细胞计数 | 第19-20页 |
| ·结果与讨论 | 第20-29页 |
| ·CHO细胞的无血清驯化 | 第20页 |
| ·无动物源、无蛋白培养基PF-1的建立 | 第20-27页 |
| ·铁盐替代牛转铁蛋白 | 第21-22页 |
| ·锌盐替代牛胰岛素 | 第22-23页 |
| ·非动物源蛋白水解物替代动物组织水解物 | 第23-24页 |
| ·无动物源、无蛋白培养基PF-1 | 第24-27页 |
| ·无动物源、无蛋白、化学成份确定的培养基CDM-1的建立 | 第27-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 第3章 重组CHO细胞在无血清培养基中的代谢 | 第30-37页 |
| ·前言 | 第30页 |
| ·材料和方法 | 第30-31页 |
| ·细胞株和培养方法 | 第30页 |
| ·计算方法 | 第30页 |
| ·AAFP蛋白浓度测定 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·CHO-AAFP细胞株在各无血清培养基中的生长情况 | 第31-32页 |
| ·CHO-AAFP细胞在各无血清培养条件下葡萄糖的代谢 | 第32-35页 |
| ·CHO-AAFP细胞在各无血清培养条件下氨的生成情况 | 第35页 |
| ·CHO-AAFP细胞在各无血清培养基中蛋白表达情况 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第4章 利用PF-1培养基在生物反应器中无血清悬浮流加培养CHO-AAFP细胞 | 第37-46页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·实验材料和方法 | 第37-39页 |
| ·实验材料与设备 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·细胞培养 | 第38页 |
| ·分析和计算方法 | 第38页 |
| ·流加策略 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-45页 |
| ·PF-1培养基中分批培养CHO-AAFP细胞 | 第39-41页 |
| ·使用流加培养基F-1流加培养CHO-AAFP细胞 | 第41-43页 |
| ·使用流加培养基F-2流加培养CHO-AAFP细胞 | 第43-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第5章 利用商业化培养基在生物反应器中无血清悬浮流加培养CHO-AAFP细胞 | 第46-52页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·实验材料与设备 | 第46页 |
| ·实验材料与设备 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·细胞培养 | 第46页 |
| ·分析和计算方法 | 第46页 |
| ·流加策略 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·使用流加培养基F-1流加培养基CHO-AAFP细胞 | 第46-49页 |
| ·使用流加培养基F-3流加培养CHO-AAFP细胞 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第6章 结论与展望 | 第52-53页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 发表论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
