致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第14-56页 |
1.1 引言 | 第14-15页 |
1.2 等温扩增技术 | 第15-19页 |
1.2.1 单一聚合酶的等温扩增技术 | 第15-16页 |
1.2.2 切刻酶辅助的等温扩增技术 | 第16-19页 |
1.2.3 依赖其他功能酶的等温扩增技术 | 第19页 |
1.3 功能核酸分子 | 第19-23页 |
1.3.1 核酸适配体 | 第20页 |
1.3.2 DNAzyme | 第20-23页 |
1.4 生化分析中的信号检测技术 | 第23-32页 |
1.4.1 电化学检测方法 | 第23-27页 |
1.4.2 光学检测法 | 第27-32页 |
1.5 等温扩增技术在生化分析中的应用 | 第32-46页 |
1.5.1 DNA检测 | 第33-37页 |
1.5.2 MicroRNA检测 | 第37-41页 |
1.5.3 金属离子检测 | 第41-45页 |
1.5.4 其他分析物检测 | 第45-46页 |
1.6 本论文的研究思路和研究内容 | 第46-48页 |
1.7 参考文献 | 第48-56页 |
第二章 切刻酶辅助的串联等温扩增用于基因组DNA检测 | 第56-77页 |
2.1 引言 | 第56-57页 |
2.2 实验部分 | 第57-61页 |
2.2.1 实验试剂及材料 | 第57-60页 |
2.2.2 实验仪器 | 第60页 |
2.2.3 链置换扩增产生单链DNA | 第60页 |
2.2.4 环形探针的合成 | 第60页 |
2.2.5 一步法等温扩增反应 | 第60页 |
2.2.6 凝胶电泳分析 | 第60-61页 |
2.2.7 化学镀金法制备金电极 | 第61页 |
2.2.8 金电极表面的杂交捕获和电化学测试 | 第61页 |
2.2.9 细胞培养和基因组DNA提取 | 第61页 |
2.3 结果与讨论 | 第61-73页 |
2.3.1 SIA一步法扩增的原理 | 第62-63页 |
2.3.2 可行性验证 | 第63-67页 |
2.3.3 HPV基因分型 | 第67-68页 |
2.3.4 HPV定量检测灵敏度分析 | 第68-72页 |
2.3.5 Hela细胞系中HPV18的检测 | 第72-73页 |
2.4 结论 | 第73页 |
2.5 参考文献 | 第73-77页 |
第三章 基于功能磁珠和滚环扩增的miRNAs一体化检测技术 | 第77-102页 |
3.1 引言 | 第77-78页 |
3.2 实验部分 | 第78-82页 |
3.2.1 实验试剂及材料 | 第78-79页 |
3.2.2 实验仪器 | 第79页 |
3.2.3 基于智能手机的荧光成像装置 | 第79-80页 |
3.2.4 环形探针的合成 | 第80-81页 |
3.2.5 鱼钩式探针的固定 | 第81页 |
3.2.6 基于FP-RCA试验的miR-21检测 | 第81页 |
3.2.7 均相滚环扩增反应用于miR-21检测 | 第81页 |
3.2.8 凝胶电泳分析 | 第81-82页 |
3.2.9 细胞裂解液中miR-21的检测 | 第82页 |
3.2.10 数据处理 | 第82页 |
3.3 结果与讨论 | 第82-97页 |
3.3.1 FP-RCA的原理 | 第82-85页 |
3.3.2 基于智能手机的荧光成像及定量分析 | 第85-86页 |
3.3.3 可行性验证 | 第86-87页 |
3.3.4 实验条件的优化 | 第87-90页 |
3.3.5 特异性分析 | 第90-92页 |
3.3.6 灵敏度分析 | 第92-96页 |
3.3.7 实际样本检测 | 第96-97页 |
3.4 结论 | 第97页 |
3.5 参考文献 | 第97-102页 |
第四章 基于DNAzyme和滚环扩增反应的均相荧光分析法用于铅离子检测 | 第102-131页 |
4.1 引言 | 第102-103页 |
4.2 实验部分 | 第103-106页 |
4.2.1 实验试剂及材料 | 第103-105页 |
4.2.2 实验仪器 | 第105页 |
4.2.3 基于DNAzyme切割环形模板的信号降低型Pb~(2+)检测 | 第105页 |
4.2.4 铅离子辅助的DNAzyme切割荧光标记底物链 | 第105页 |
4.2.5 环形探针的合成 | 第105页 |
4.2.6 凝胶电泳分析 | 第105-106页 |
4.2.7 基于DNAzyme-RCA信号增强型荧光分析法的Pb~(2+)检测 | 第106页 |
4.2.8 基于智能手机的荧光采集和定量分析 | 第106页 |
4.3 结果与讨论 | 第106-127页 |
4.3.1 实验方案的设计 | 第106-113页 |
4.3.2 基于DNAzyme和RCA的信号增强型荧光分析法检测铅离子的原理 | 第113-114页 |
4.3.3 可行性验证 | 第114-116页 |
4.3.4 实验条件的优化 | 第116-120页 |
4.3.5 特异性分析 | 第120-121页 |
4.3.6 灵敏度分析 | 第121-123页 |
4.3.7 基体干扰分析 | 第123-127页 |
4.4 结论 | 第127页 |
4.5 参考文献 | 第127-131页 |
第五章 总结与展望 | 第131-133页 |
附录 | 第133页 |