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基于等温扩增和DNAzyme的生化分析新方法的研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 绪论第14-56页
    1.1 引言第14-15页
    1.2 等温扩增技术第15-19页
        1.2.1 单一聚合酶的等温扩增技术第15-16页
        1.2.2 切刻酶辅助的等温扩增技术第16-19页
        1.2.3 依赖其他功能酶的等温扩增技术第19页
    1.3 功能核酸分子第19-23页
        1.3.1 核酸适配体第20页
        1.3.2 DNAzyme第20-23页
    1.4 生化分析中的信号检测技术第23-32页
        1.4.1 电化学检测方法第23-27页
        1.4.2 光学检测法第27-32页
    1.5 等温扩增技术在生化分析中的应用第32-46页
        1.5.1 DNA检测第33-37页
        1.5.2 MicroRNA检测第37-41页
        1.5.3 金属离子检测第41-45页
        1.5.4 其他分析物检测第45-46页
    1.6 本论文的研究思路和研究内容第46-48页
    1.7 参考文献第48-56页
第二章 切刻酶辅助的串联等温扩增用于基因组DNA检测第56-77页
    2.1 引言第56-57页
    2.2 实验部分第57-61页
        2.2.1 实验试剂及材料第57-60页
        2.2.2 实验仪器第60页
        2.2.3 链置换扩增产生单链DNA第60页
        2.2.4 环形探针的合成第60页
        2.2.5 一步法等温扩增反应第60页
        2.2.6 凝胶电泳分析第60-61页
        2.2.7 化学镀金法制备金电极第61页
        2.2.8 金电极表面的杂交捕获和电化学测试第61页
        2.2.9 细胞培养和基因组DNA提取第61页
    2.3 结果与讨论第61-73页
        2.3.1 SIA一步法扩增的原理第62-63页
        2.3.2 可行性验证第63-67页
        2.3.3 HPV基因分型第67-68页
        2.3.4 HPV定量检测灵敏度分析第68-72页
        2.3.5 Hela细胞系中HPV18的检测第72-73页
    2.4 结论第73页
    2.5 参考文献第73-77页
第三章 基于功能磁珠和滚环扩增的miRNAs一体化检测技术第77-102页
    3.1 引言第77-78页
    3.2 实验部分第78-82页
        3.2.1 实验试剂及材料第78-79页
        3.2.2 实验仪器第79页
        3.2.3 基于智能手机的荧光成像装置第79-80页
        3.2.4 环形探针的合成第80-81页
        3.2.5 鱼钩式探针的固定第81页
        3.2.6 基于FP-RCA试验的miR-21检测第81页
        3.2.7 均相滚环扩增反应用于miR-21检测第81页
        3.2.8 凝胶电泳分析第81-82页
        3.2.9 细胞裂解液中miR-21的检测第82页
        3.2.10 数据处理第82页
    3.3 结果与讨论第82-97页
        3.3.1 FP-RCA的原理第82-85页
        3.3.2 基于智能手机的荧光成像及定量分析第85-86页
        3.3.3 可行性验证第86-87页
        3.3.4 实验条件的优化第87-90页
        3.3.5 特异性分析第90-92页
        3.3.6 灵敏度分析第92-96页
        3.3.7 实际样本检测第96-97页
    3.4 结论第97页
    3.5 参考文献第97-102页
第四章 基于DNAzyme和滚环扩增反应的均相荧光分析法用于铅离子检测第102-131页
    4.1 引言第102-103页
    4.2 实验部分第103-106页
        4.2.1 实验试剂及材料第103-105页
        4.2.2 实验仪器第105页
        4.2.3 基于DNAzyme切割环形模板的信号降低型Pb~(2+)检测第105页
        4.2.4 铅离子辅助的DNAzyme切割荧光标记底物链第105页
        4.2.5 环形探针的合成第105页
        4.2.6 凝胶电泳分析第105-106页
        4.2.7 基于DNAzyme-RCA信号增强型荧光分析法的Pb~(2+)检测第106页
        4.2.8 基于智能手机的荧光采集和定量分析第106页
    4.3 结果与讨论第106-127页
        4.3.1 实验方案的设计第106-113页
        4.3.2 基于DNAzyme和RCA的信号增强型荧光分析法检测铅离子的原理第113-114页
        4.3.3 可行性验证第114-116页
        4.3.4 实验条件的优化第116-120页
        4.3.5 特异性分析第120-121页
        4.3.6 灵敏度分析第121-123页
        4.3.7 基体干扰分析第123-127页
    4.4 结论第127页
    4.5 参考文献第127-131页
第五章 总结与展望第131-133页
附录第133页

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