摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-16页 |
1.1 嗜盐蛋白质和蛋白质适盐与进化 | 第10页 |
1.2 氨基酸与蛋白质适盐与进化 | 第10-12页 |
1.2.1 各种标准氨基酸在蛋白质适盐与进化中的角色 | 第10-11页 |
1.2.2 表面和内部氨基酸与蛋白质适盐与折叠 | 第11-12页 |
1.3 泛素和类泛素蛋白的适盐性 | 第12-14页 |
1.3.1 嗜盐类泛素蛋白Samp2及非嗜盐Samp2-D31G | 第12-13页 |
1.3.2 其它泛素及类泛素蛋白的适盐性 | 第13-14页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第14页 |
1.5 研究内容与技术路线 | 第14-16页 |
第二章 氨基酸类型与Samp2适盐性的关系 | 第16-37页 |
2.1 实验材料 | 第16-20页 |
2.1.1 材料 | 第16-17页 |
2.1.2 仪器 | 第17页 |
2.1.3 溶液的配置 | 第17-19页 |
2.1.4 琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶的配置 | 第19页 |
2.1.5 E.coli BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-26页 |
2.2.1 Samp2第31位点突变体的构建 | 第20-22页 |
2.2.2 Samp2第31位点突变体的表达及纯化 | 第22-23页 |
2.2.3 Samp2及第31位点突变体的适盐性测定 | 第23-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-35页 |
2.3.1 Samp2第31位点突变体的构建 | 第26-27页 |
2.3.2 Samp2第31位点突变体的表达及纯化 | 第27-29页 |
2.3.3 Samp2及第31位点突变体的适盐性 | 第29-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
第三章 氨基酸位置与Samp2适盐性的关系 | 第37-50页 |
3.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.1 材料 | 第37页 |
3.1.2 仪器 | 第37页 |
3.1.3 溶液的配置 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-41页 |
3.2.1 Samp2突变体的构建 | 第37-40页 |
3.2.3 Samp2突变体的表达及纯化 | 第40页 |
3.2.4 Samp2突变体的适盐性测定 | 第40-41页 |
3.3 实验结果 | 第41-49页 |
3.3.1 Samp2突变体的构建 | 第41-43页 |
3.3.2 Samp2突变体的表达及纯化 | 第43-45页 |
3.3.3 Samp2突变体的适盐性 | 第45-49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
第四章 Tb泛素和类泛素蛋白适盐性的理性改造 | 第50-66页 |
4.1 实验材料 | 第50页 |
4.1.1 材料 | 第50页 |
4.1.2 仪器 | 第50页 |
4.1.3 溶液的配置 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-55页 |
4.2.1 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体重组表达克隆的构建 | 第51-52页 |
4.2.2 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体的表达和纯化 | 第52-53页 |
4.2.3 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体的适盐性测定 | 第53-55页 |
4.3 实验结果 | 第55-64页 |
4.3.1 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体重组表达克隆的构建 | 第55-56页 |
4.3.2 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体的表达和纯化 | 第56-59页 |
4.3.3 Tb-UB、Tb-Nedd8和Tb-SUMO及其突变体的适盐性 | 第59-64页 |
4.4 讨论 | 第64-66页 |
第五章 结论与展望 | 第66-68页 |
5.1 结论 | 第66页 |
5.2 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第75页 |