| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 昆虫的免疫和发育 | 第12-13页 |
| 1.2 昆虫Hemolin蛋白 | 第13-15页 |
| 1.3 昆虫酚氧化酶 | 第15-16页 |
| 1.4 Hemolin和PO的关系 | 第16-18页 |
| 1.5 研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
| 第二章 PO1和PO2的多克隆抗体制备 | 第20-37页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 实验相关试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.3 仪器 | 第23-24页 |
| 2.4 实验方法和步骤 | 第24-30页 |
| 2.4.1 家蚕血淋巴组织总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 RNA的反转录 | 第25页 |
| 2.4.3 po1和po2基因的扩增 | 第25-27页 |
| 2.4.4 构建重组表达载体 | 第27-28页 |
| 2.4.5 重组蛋白在大肠杆菌中的原核表达 | 第28-29页 |
| 2.4.6 多克隆抗血清的制备 | 第29页 |
| 2.4.7 提取蛹总蛋白 | 第29-30页 |
| 2.4.8 WesternBlot分析 | 第30页 |
| 2.5 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.5.1 po1和po2基因的扩增结果 | 第30-31页 |
| 2.5.2 重组质粒po1-pET-30a、po2-pET-30a的验证 | 第31-33页 |
| 2.5.3 重组蛋白的原核表达 | 第33-34页 |
| 2.5.4 多克隆抗血清制备结果 | 第34-35页 |
| 2.5.5 PO1和PO2多克隆抗体的特异性检测 | 第35-36页 |
| 2.6 讨论与小结 | 第36-37页 |
| 第三章 Hemolin和PO的定位 | 第37-47页 |
| 3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 实验相关试剂的配制 | 第37-38页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第38页 |
| 3.2 实验方法和步骤 | 第38-41页 |
| 3.2.1 切片涂片的制备 | 第38-39页 |
| 3.2.2 石蜡切片脱蜡水化和抗原修复 | 第39-40页 |
| 3.2.3 双重免疫组化 | 第40-41页 |
| 3.3 结果和分析 | 第41-45页 |
| 3.3.1 Hemolin和PO1的定位 | 第41-43页 |
| 3.3.2 Hemolin和PO2的共定位 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第45-47页 |
| 第四章 PO和Hemolin的表达转录 | 第47-67页 |
| 4.1 实验材料、试剂和仪器 | 第47-48页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第47-48页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第48页 |
| 4.2 实验方法和步骤 | 第48-52页 |
| 4.2.1 家蚕感染大肠杆菌 | 第48-49页 |
| 4.2.2 po和hemolin在不同感染时间段不同组织的转录 | 第49-50页 |
| 4.2.3 PO和Hemolin在不同感染时间段不同组织的蛋白表达 | 第50-52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-65页 |
| 4.3.1 po和hemolin在不同感染时间段不同组织的转录分析 | 第52-57页 |
| 4.3.2 PO和Hemolin在不同感染时间段不同组织的蛋白表达分析 | 第57-62页 |
| 4.3.3 不同组织中三种基因的转录趋势分布 | 第62-64页 |
| 4.3.4 不同组织中三种蛋白的表达趋势分布 | 第64-65页 |
| 4.4 讨论和小结 | 第65-67页 |
| 第五章 po1基因的多样性 | 第67-74页 |
| 5.1 实验试剂及材料 | 第67页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第67页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第67页 |
| 5.2 实验方法和步骤 | 第67-69页 |
| 5.2.1 不同品系家蚕血淋巴的RNA提取和反转录 | 第67-68页 |
| 5.2.2 不同品系家蚕po1基因扩增 | 第68页 |
| 5.2.3 构建重组表达载体 | 第68-69页 |
| 5.3 结果与分析 | 第69-72页 |
| 5.3.1 不同品系家蚕po1基因扩增结果 | 第69页 |
| 5.3.2 重组质粒po1-Tvector的验证 | 第69-70页 |
| 5.3.3 不同品系家蚕重组基因的测序结果 | 第70-72页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第72-74页 |
| 第六章 Hemolin蛋白的修饰 | 第74-79页 |
| 6.1 实验材料、试剂和仪器 | 第74-75页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第74页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第74页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第74-75页 |
| 6.2 实验方法和步骤 | 第75页 |
| 6.2.1 不同时期以及感染后家蚕总蛋白提取 | 第75页 |
| 6.2.2 亲和层析 | 第75页 |
| 6.3 结果和分析 | 第75-77页 |
| 6.4 讨论和小结 | 第77-79页 |
| 第七章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 7.1 总结 | 第79-80页 |
| 7.2 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 在学期间发表的论文及参加的课题 | 第89页 |
