| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 家蚕二分浓核病毒的研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2 家蚕二分浓核病毒基因组VD1的结构特点 | 第14-15页 |
| 1.3 多聚腺苷酸化的研究 | 第15-18页 |
| 1.3.1 多聚腺苷酸化的形成过程 | 第16-17页 |
| 1.3.2 多聚腺苷酸化的调控机制 | 第17页 |
| 1.3.3 多聚腺苷酸化的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.4 多聚腺苷酸化信号的应用 | 第18-20页 |
| 1.5 立题依据及意义 | 第20-21页 |
| 1.6 主要研究内容及技术路线 | 第21-24页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第21-23页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 BDVpA对可视化蛋白表达的影响 | 第24-40页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第24-27页 |
| 2.1.1 菌株、质粒及细胞系 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第24-27页 |
| 2.1.3 实验中所用的仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 BDVpA序列分析与实验构思 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-36页 |
| 2.3.1 外源gfp瞬时质粒的构建及鉴定 | 第28-32页 |
| 2.3.2 感受态的制备及转化 | 第32-33页 |
| 2.3.3 昆虫细胞的培养 | 第33-34页 |
| 2.3.4 昆虫细胞的转染与观察 | 第34-36页 |
| 2.4 结果及分析 | 第36-38页 |
| 2.4.1 外源gfp瞬时表达质粒 | 第36-37页 |
| 2.4.2 BDVpA对GFP表达的影响 | 第37-38页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第38-40页 |
| 第三章 BDVpA对荧光素酶表达的影响 | 第40-51页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.1 菌株、质粒及细胞系 | 第40页 |
| 3.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第40-41页 |
| 3.1.3 实验中所用的仪器设备 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.2.1 荧光素报告质粒的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| 3.2.2 昆虫细胞的共转染 | 第43-44页 |
| 3.2.3 双荧光素酶活性的检测 | 第44-45页 |
| 3.3 结果及分析 | 第45-49页 |
| 3.3.1 评估BDVpA活性的报告质粒 | 第45-46页 |
| 3.3.2 BDVpA在不同启动子调控下的活性 | 第46-49页 |
| 3.3.3 BDVpA在不同细胞系中的活性 | 第49页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第49-51页 |
| 第四章 BDVpA对转录水平的调控 | 第51-61页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第51-52页 |
| 4.1.1 菌株、质粒及细胞系 | 第51页 |
| 4.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第51-52页 |
| 4.1.3 实验中所用的仪器设备 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 4.2.1 荧光定量PCR引物的设计及合成 | 第52-53页 |
| 4.2.2 昆虫细胞的转染 | 第53页 |
| 4.2.3 转染细胞总RNA的提取 | 第53-54页 |
| 4.2.4 转染细胞cDNA的合成 | 第54-55页 |
| 4.2.5 cDNA的real-timeqPCR反应 | 第55-56页 |
| 4.3 结果及分析 | 第56-60页 |
| 4.3.1 转染细胞总RNA的鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3.2 不同细胞系中BDVpA对转录水平的影响 | 第57-59页 |
| 4.3.3 不同启动子调控下BDVpA对转录水平的影响 | 第59-60页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第60-61页 |
| 第五章 BDVpA核心功能区域的鉴定 | 第61-70页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第61页 |
| 5.1.1 菌株、质粒及细胞系 | 第61页 |
| 5.1.2 主要试剂和溶液的配制 | 第61页 |
| 5.1.3 实验中所用的仪器设备 | 第61页 |
| 5.2 实验方法 | 第61-63页 |
| 5.2.1 不同长度BDVpA报告质粒的构建及鉴定 | 第61-62页 |
| 5.2.2 昆虫细胞的共转染 | 第62-63页 |
| 5.2.3 双荧光素酶活性的检测 | 第63页 |
| 5.3 结果及分析 | 第63-68页 |
| 5.3.1 包含特征性序列且长度不同的BDVpA报告质粒 | 第63-64页 |
| 5.3.2 不同长度的BDVpA在不同细胞系中的活性 | 第64-68页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第68-70页 |
| 第六章 总结与展望 | 第70-73页 |
| 6.1 主要总结 | 第70-71页 |
| 6.2 工作展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第83页 |
| 参与的研究项目 | 第83页 |
