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FBB18调控纤毛运动的机制及解聚纤毛蛋白质组的研究

摘要第3-4页
abstract第4-5页
第1章 前言第10-39页
    1.1 纤毛与纤毛疾病第10-19页
        1.1.1 纤毛第10-11页
        1.1.2 纤毛的组织结构和分类第11-13页
        1.1.3 纤毛的功能与分布第13-16页
        1.1.4 纤毛相关疾病第16-19页
        1.1.5 纤毛蛋白质组学研究第19页
    1.2 纤毛内运输(IFT)与纤毛的组装和解聚第19-25页
        1.2.1 纤毛内运输(IFT)第19-22页
        1.2.2 纤毛的组装和解聚第22-25页
    1.3 纤毛的运动第25-35页
        1.3.1 纤毛的运动形式第25-26页
        1.3.2 纤毛运动相关结构第26-28页
        1.3.3 纤毛外动力臂(ODAs)第28-32页
        1.3.4 纤毛内动力臂(IDAs)第32-35页
    1.4 模式生物——衣藻第35-36页
    1.5 本论文的研究内容和意义第36-38页
    1.6 论文结构第38-39页
第2章 实验材料与方法第39-56页
    2.1 实验材料第39-41页
        2.1.1 实验用衣藻藻株第39页
        2.1.2 实验用菌株第39页
        2.1.3 实验用质粒载体第39页
        2.1.4 实验用抗体、试剂和试剂盒第39-41页
        2.1.5 实验室常用溶液及配制方法第41页
    2.2 实验仪器第41-42页
    2.3 实验方法第42-56页
        2.3.1 衣藻细胞培养第42页
        2.3.2 衣藻细胞计数第42页
        2.3.3 衣藻细胞电击转化方法第42-43页
        2.3.4 衣藻鞭毛突变体的筛选第43页
        2.3.5 衣藻细胞基因组的提取第43-44页
        2.3.6 RESDAPCR克隆第44-46页
        2.3.7 衣藻细胞去鞭毛与鞭毛再生第46页
        2.3.8 衣藻细胞鞭毛缩短处理第46页
        2.3.9 衣藻细胞、鞭毛成像及鞭毛长度测量第46-47页
        2.3.10 衣藻细胞鞭毛蛋白的提取与分离第47页
        2.3.11 衣藻鞭毛组分的分离第47-48页
        2.3.12 衣藻细胞免疫荧光第48-49页
        2.3.13 免疫共沉淀实验第49-50页
        2.3.14 衣藻细胞透射电镜样品制备与观察第50页
        2.3.15 衣藻细胞(鞭毛)运动拍摄及速率的计算第50-51页
        2.3.16 细胞壁溶解酶(Lysin)的制备第51页
        2.3.17 蛋白质免疫印迹与考马斯亮蓝染色第51-53页
        2.3.18 质粒的提取及核酸片段的纯化第53页
        2.3.19 大肠杆菌的转化第53页
        2.3.20 菌落PCR第53-54页
        2.3.21 酵母双杂交第54-56页
第3章 FBB18参与纤毛运动的调控第56-79页
    3.1 本章背景第56-57页
    3.2 本章结果和分析第57-77页
        3.2.1 FBB18蛋白在具有运动纤毛的物种中高度保守第57-59页
        3.2.2 fbb18突变体的分离第59-60页
        3.2.3 fbb18突变体的性状分析第60-64页
        3.2.4 FBB18蛋白的定位分析第64-66页
        3.2.5 fbb18轴丝动力臂减少或丢失第66-68页
        3.2.6 fbb18纤毛中DHC?发生特异性的缺失第68-69页
        3.2.7 FBB18参与动力臂在细胞体中的组装第69-72页
        3.2.8 FBB18调控动力臂组装机制初探第72-77页
    3.3 本章总结和讨论第77-79页
第4章 解聚纤毛的比较蛋白质组学研究第79-95页
    4.1 本章背景第79-80页
    4.2 本章结果和分析第80-94页
        4.2.1 纤毛蛋白样品收集、处理和质谱鉴定第80-83页
        4.2.2 质谱鉴定结果的比较分析第83-87页
        4.2.3 质谱鉴定结果的验证分析第87-89页
        4.2.4 解聚纤毛中纤毛内运输(IFT)的调控第89-91页
        4.2.5 纤毛解聚相关的候选因子第91-94页
    4.3 本章总结和讨论第94-95页
第5章 总结与展望第95-102页
    5.1 论文总结与讨论第95-96页
    5.2 论文展望第96-102页
        5.2.1 FBB18蛋白与轴丝动力臂的预组装第96-97页
        5.2.2 FBB18与DHC?和dyneinb的关系第97页
        5.2.3 组装因子对动力臂预组装的调控分析第97-98页
        5.2.4 动力臂的运输的探究第98-99页
        5.2.5 内外动力臂与纤毛轴丝稳定性的思考第99页
        5.2.6 FBB18在纤毛中的功能的探讨第99-100页
        5.2.7 C21orf2与纤毛的关系的分析第100页
        5.2.8 CDC48在纤毛组装和解聚中的功能分析第100-102页
参考文献第102-117页
致谢第117-119页
附录A 常用溶液配制方法第119-124页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第124页

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