| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 前言 | 第9-42页 |
| 1.1 纤毛与人类疾病 | 第9-21页 |
| 1.1.1 纤毛分类与结构 | 第10-14页 |
| 1.1.2 纤毛发生(Ciliogenesis) | 第14-16页 |
| 1.1.3 纤毛功能 | 第16-19页 |
| 1.1.4 纤毛相关性疾病 | 第19-21页 |
| 1.2 纤毛内运输机制 | 第21-35页 |
| 1.2.1 纤毛内运输(IFT)机器组成蛋白 | 第23-27页 |
| 1.2.2 鞭毛内运输机制过程详解 | 第27-31页 |
| 1.2.3 IFT蛋白之间的相互作用 | 第31-35页 |
| 1.3 不同IFT蛋白功能研究 | 第35-41页 |
| 1.3.1 IFT-B蛋白功能研究现状 | 第36-38页 |
| 1.3.2 IFT-A蛋白功能研究现状 | 第38-41页 |
| 1.4 本论文的研究内容与意义 | 第41-42页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第42-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第42-45页 |
| 2.1.1 实验使用的藻株、菌种和质粒 | 第42页 |
| 2.1.2 本实验使用的试剂和试剂盒 | 第42-43页 |
| 2.1.3 本实验使用仪器 | 第43-44页 |
| 2.1.4 实验使用的抗体 | 第44-45页 |
| 2.2 实验方法 | 第45-59页 |
| 2.2.1 细菌质粒提取 | 第45页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶DNA回收与PCR产物柱纯化 | 第45-46页 |
| 2.2.3 大肠杆菌热击转化 | 第46页 |
| 2.2.4 衣藻细胞培养 | 第46-47页 |
| 2.2.5 衣藻细胞电击转化与转化子筛选 | 第47-48页 |
| 2.2.6 衣藻基因组DNA提取 | 第48页 |
| 2.2.7 鉴定突变体插入基因 | 第48-50页 |
| 2.2.8 衣藻细胞拍摄与鞭毛长度的测量 | 第50页 |
| 2.2.9 衣藻autolysin的制备 | 第50-51页 |
| 2.2.10 衣藻鞭毛的诱导延长、分离以及再生 | 第51-52页 |
| 2.2.11 衣藻细胞免疫荧光 | 第52-53页 |
| 2.2.12 衣藻透射电镜 | 第53-54页 |
| 2.2.13 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳与免疫印迹 | 第54页 |
| 2.2.14 蛋白质考马斯亮蓝染色以及银染 | 第54-55页 |
| 2.2.15 衣藻蛋白抗体制备 | 第55-56页 |
| 2.2.16 蔗糖密度梯度离心 | 第56-57页 |
| 2.2.17 免疫共沉淀 | 第57页 |
| 2.2.18 酵母双杂交实验 | 第57-58页 |
| 2.2.19 衣藻鞭毛内运输(IFT)活体拍摄 | 第58-59页 |
| 第3章 IFT43调控IFT-A复合物的稳定性 | 第59-77页 |
| 3.1 背景与引论 | 第59-60页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第60-76页 |
| 3.2.1 IFT43基因结构域分析 | 第60-61页 |
| 3.2.2 ift43缺失突变体的筛选、鉴定与性状回补 | 第61-65页 |
| 3.2.3 IFT43基因在衣藻中的定位与运动 | 第65-67页 |
| 3.2.4 IFT43调节IFT-A复合物的稳定性 | 第67-69页 |
| 3.2.5 IFT-A复合物的完整性维持其蛋白的稳态 | 第69-73页 |
| 3.2.6 IFT-A复合物的组织结构 | 第73-75页 |
| 3.2.7 IFT-A复合物与反向马达蛋白dynein2/1b的互作探究 | 第75-76页 |
| 3.3 本章总结 | 第76-77页 |
| 第4章 IFT43调控IFT-A复合物的运输与定位 | 第77-87页 |
| 4.1 背景与引论 | 第77-78页 |
| 4.2 实验结果与分析 | 第78-86页 |
| 4.2.1 IFT43功能依赖于IFT43pfam序列 | 第78-80页 |
| 4.2.2 IFT43C端稳定IFT-A复合物 | 第80-81页 |
| 4.2.3 IFT43调控IFT-A进入鞭毛的量 | 第81-85页 |
| 4.2.4 IFT-A基体定位依赖于IFT-A的完整性 | 第85-86页 |
| 4.3 总结与讨论 | 第86-87页 |
| 第5章 IFT-A参与细胞体中鞭毛前体蛋白的运输 | 第87-95页 |
| 5.1 背景与讨论 | 第87页 |
| 5.2 实验结果与分析 | 第87-94页 |
| 5.2.1 IFT-A突变影响鞭毛组装速率 | 第87-88页 |
| 5.2.2 IFT-A调控胞体中鞭毛前体蛋白的招募 | 第88-90页 |
| 5.2.3 细胞质dynein参与鞭毛前体蛋白的运输 | 第90-92页 |
| 5.2.4 衣藻细胞体内IFT运输拍摄 | 第92-93页 |
| 5.2.5 IFT43互作蛋白的筛选 | 第93-94页 |
| 5.3 总结 | 第94-95页 |
| 第6章 总结与展望 | 第95-105页 |
| 6.1 工作总结与讨论 | 第95-101页 |
| 6.1.1 IFT-A蛋白影响鞭毛发生 | 第95-96页 |
| 6.1.2 IFT43调控IFT-A蛋白进入鞭毛的量 | 第96-98页 |
| 6.1.3 IFT-A复合物对其自身的稳定性和细胞定位的调控 | 第98-99页 |
| 6.1.4 IFT-A蛋白在纤毛发生和胞体中运输鞭毛前体蛋白的功能 | 第99-101页 |
| 6.2 展望 | 第101-105页 |
| 6.2.1 IFT43对IFT-A蛋白稳定性调控 | 第101-102页 |
| 6.2.2 IFT43蛋白N端功能研究 | 第102-103页 |
| 6.2.3 IFT43调控IFT-A进入鞭毛中的量 | 第103页 |
| 6.2.4 IFT140对马达蛋白量的调控 | 第103-104页 |
| 6.2.5 IFT-A蛋白基体定位于胞内运输功能的研究 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 附录 A 常用溶液配制方法 | 第117-123页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第123页 |
