| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 植物miRNA作用与研究概况 | 第12-16页 |
| 1.1 miRNA调控植物的生长发育 | 第12-13页 |
| 1.2 miRNA调控植物内源激素信号 | 第13页 |
| 1.3 miRNA调控植物环境适应性 | 第13-14页 |
| 1.4 果树miRNA及其靶基因功能的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.5 葡萄花果特异性miRNA及其靶基因的研究 | 第15-16页 |
| 2 赤霉素的作用以及分子作用机制的研究概况 | 第16-20页 |
| 2.1 赤霉素与葡萄生长发育及生产的关系 | 第16-17页 |
| 2.2 赤霉素的分子作用及其信号转导途径 | 第17-18页 |
| 2.3 miRNA与赤霉素的调控作用 | 第18-20页 |
| 第二章 葡萄microRNA061及其靶基因响应赤霉素的表达研究 | 第20-42页 |
| 1 材料与方法 | 第22-30页 |
| 1.1 植物材料与赤霉素处理 | 第22页 |
| 1.2 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 1.3 LMW RNA的分离 | 第23-24页 |
| 1.4 mRNA纯化 | 第24-25页 |
| 1.5 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 1.6 VvmiR061靶基因的预测与克隆 | 第26页 |
| 1.7 序列比对分析及系统发生树的构建 | 第26-27页 |
| 1.8 VvREV和VvHOX32的亚细胞定位分析 | 第27-29页 |
| 1.9 荧光定量分析 | 第29-30页 |
| 1.10 RLM-RACE和PPM-RACE扩增确定VvmiR061剪切靶基因位点 | 第30页 |
| 1.11 VvREV和VvHOX32剪切产物的表达分析 | 第30页 |
| 2 结果分析 | 第30-39页 |
| 2.1 赤霉素处理后葡萄生理状态的变化 | 第30-31页 |
| 2.2 VvREV和VvHOX32的克隆与序列分析 | 第31-36页 |
| 2.3 赤霉素处理对VvmiR061及其靶基因VvREV和VvHOX32表达的影响 | 第36-38页 |
| 2.4 利用RLM-RACE和PPM-RACE分析VvmiR061对靶基因的剪切作用 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 葡萄VvREV和VvHOX32的功能验证 | 第42-50页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 1.1 试验材料与处理 | 第43页 |
| 1.2 质粒和菌株 | 第43页 |
| 1.3 生化和化学试剂 | 第43-44页 |
| 1.4 载体构建 | 第44页 |
| 1.5 烟草遗传转化(叶盘法) | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| 2.1 表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.2 农杆菌转化烟草(N.tabacum) | 第45页 |
| 2.3 转基因烟草的PCR检测 | 第45-46页 |
| 2.4 转基因烟草的形态学观察 | 第46-47页 |
| 2.5 转基因烟草花发育相关基因的表达分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 葡萄VvmiR159及其靶基因VvGAMYB在花发育过程中的作用分析 | 第50-64页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 1.1 试验材料与处理 | 第52-53页 |
| 1.2 总RNA及低分子量RNA的提取与cDNA的合成 | 第53页 |
| 1.3 VvGAMYB基因的克隆与序列分析 | 第53-54页 |
| 1.4 VvGAMYB亚细胞定位 | 第54页 |
| 1.5 RLM-RACE和PPM-RACE扩增确定VvmiR159剪切靶基因位点 | 第54-55页 |
| 1.6 基因表达分析 | 第55页 |
| 1.7 VvGAMYB基因剪切产物的表达分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 2.1 VvGAMYB基因克隆与分析 | 第55-58页 |
| 2.2 VvGAMYB蛋白的亚细胞定位 | 第58页 |
| 2.3 赤霉素处理对VvGAMYB和VvLFY基因表达的影响 | 第58-59页 |
| 2.4 赤霉素处理对VvmiR159表达及其裂解VvGAMYB强度的变化分析 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| 全文结论 | 第64-66页 |
| 主要创新点 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
