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两个响应赤霉素信号的microRNA及其靶基因在葡萄花发育过程中作用分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表(Abbreviation)第10-11页
绪论第11-12页
第一章 文献综述第12-20页
    1 植物miRNA作用与研究概况第12-16页
        1.1 miRNA调控植物的生长发育第12-13页
        1.2 miRNA调控植物内源激素信号第13页
        1.3 miRNA调控植物环境适应性第13-14页
        1.4 果树miRNA及其靶基因功能的研究现状第14-15页
        1.5 葡萄花果特异性miRNA及其靶基因的研究第15-16页
    2 赤霉素的作用以及分子作用机制的研究概况第16-20页
        2.1 赤霉素与葡萄生长发育及生产的关系第16-17页
        2.2 赤霉素的分子作用及其信号转导途径第17-18页
        2.3 miRNA与赤霉素的调控作用第18-20页
第二章 葡萄microRNA061及其靶基因响应赤霉素的表达研究第20-42页
    1 材料与方法第22-30页
        1.1 植物材料与赤霉素处理第22页
        1.2 总RNA的提取第22-23页
        1.3 LMW RNA的分离第23-24页
        1.4 mRNA纯化第24-25页
        1.5 cDNA第一链的合成第25-26页
        1.6 VvmiR061靶基因的预测与克隆第26页
        1.7 序列比对分析及系统发生树的构建第26-27页
        1.8 VvREV和VvHOX32的亚细胞定位分析第27-29页
        1.9 荧光定量分析第29-30页
        1.10 RLM-RACE和PPM-RACE扩增确定VvmiR061剪切靶基因位点第30页
        1.11 VvREV和VvHOX32剪切产物的表达分析第30页
    2 结果分析第30-39页
        2.1 赤霉素处理后葡萄生理状态的变化第30-31页
        2.2 VvREV和VvHOX32的克隆与序列分析第31-36页
        2.3 赤霉素处理对VvmiR061及其靶基因VvREV和VvHOX32表达的影响第36-38页
        2.4 利用RLM-RACE和PPM-RACE分析VvmiR061对靶基因的剪切作用第38-39页
    3 讨论第39-42页
第三章 葡萄VvREV和VvHOX32的功能验证第42-50页
    1 材料与方法第43-44页
        1.1 试验材料与处理第43页
        1.2 质粒和菌株第43页
        1.3 生化和化学试剂第43-44页
        1.4 载体构建第44页
        1.5 烟草遗传转化(叶盘法)第44页
    2 结果与分析第44-48页
        2.1 表达载体的构建第44-45页
        2.2 农杆菌转化烟草(N.tabacum)第45页
        2.3 转基因烟草的PCR检测第45-46页
        2.4 转基因烟草的形态学观察第46-47页
        2.5 转基因烟草花发育相关基因的表达分析第47-48页
    3 讨论第48-50页
第四章 葡萄VvmiR159及其靶基因VvGAMYB在花发育过程中的作用分析第50-64页
    1 材料与方法第52-55页
        1.1 试验材料与处理第52-53页
        1.2 总RNA及低分子量RNA的提取与cDNA的合成第53页
        1.3 VvGAMYB基因的克隆与序列分析第53-54页
        1.4 VvGAMYB亚细胞定位第54页
        1.5 RLM-RACE和PPM-RACE扩增确定VvmiR159剪切靶基因位点第54-55页
        1.6 基因表达分析第55页
        1.7 VvGAMYB基因剪切产物的表达分析第55页
    2 结果与分析第55-61页
        2.1 VvGAMYB基因克隆与分析第55-58页
        2.2 VvGAMYB蛋白的亚细胞定位第58页
        2.3 赤霉素处理对VvGAMYB和VvLFY基因表达的影响第58-59页
        2.4 赤霉素处理对VvmiR159表达及其裂解VvGAMYB强度的变化分析第59-61页
    3 讨论第61-64页
全文结论第64-66页
主要创新点第66-68页
参考文献第68-78页
攻读学位期间发表的学术论文第78-80页
致谢第80页

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